用Alu－VectorettePCR方法从酵母人工染色体末端分离人基因组单拷贝片段

分离和克隆ＹＡＣ插入片段的末端顺序是构建ＹＡＣ重叠群的重要手段之一，我们采用Ａｌｕ载体（Ａｌｕ－ｖｅｃｔｏｒｅｔｔｅ）ＰＣＲ方法成功地从含人淀粉样蛋白前体（ＡＰＰ）基因的法国人类多态研究中心（ＣＥＰＨ，Ｃｅｎｔｒｅｄ＇ＥｔｕｄｅｄｕＰｏｌｙｍｏｒｐｈｉｓｍｅＨｕｍａｎ）ＹＡＣ克隆５９９Ｇ１１的未端分离到一个０．５８ｋｂ的单拷贝片段。测序后经核普酸顺序检索分析，证明这是一个新的ＳＴＳ顺序。用这个片段作探针，在英国肿瘤研究基金会（ＩＣＲＦ）的ＹＡＣ库中筛选到一个新的ＹＡＣ克隆，证明这是获得ｃｏｎｔｉｇ的有效而快捷的方法。

从YAC DNA制备荧光原位杂交探针的新方法

介绍了一种新的ＹＡＣ ＤＮＡ的回收方法。该方法先用脉冲电泳分离并回收ＹＡＣ条带，然后连接引物用ＰＣＲ扩增ＹＡＣＤＮＡ。这一方法回收的ＹＡＣＤＮＡ一是量多，节省制备探针的时间；二是产物总的染色体跨度大，有利于染色体原位杂交。经ＦＩＳＨ（荧光原位杂交）鉴定证明该方法得到的ＹＡＣＤＮＡ对ＹＡＣ的定位和嵌合的鉴定非常有效。

Alzheimer氏病分子遗传学的研究新进展

近年来的分子遗传学研究表明,Alzheimer氏病患者脑组织老年斑中的淀粉样蛋白具有神经毒作用,它可能来源于其前体蛋白的裂解;淀粉样蛋白前体有数种,其结构、性质、分布各不相同,其基因定位于21q21—22.1之间;另外人们还发现了Alzheimer氏病相关基因。

神经纤维瘤病的分子生物学研究进展──逆向基因克隆的典范

分子生物学的发展使得从ＤＮＡ到蛋白质的逆向基因克隆成为可能，本文就该方法在克隆神经纤维瘤病基因中的应用、该病基因的复杂结构以及该基因产物的生物学活性作一介绍。并对该病的发病机制进行了有益的探讨。

苏州城区老年人心理健康状况调查分析

对苏州市区1480名老人心理社会状况调查结果表明,33.5％的老人自感健康良好,92.6％的老人对家庭感到满意,多数老人得到子女尊重,遇到困难有人帮助,87.4％的老人对文化生活有兴趣;但在部份老人中(12.0％),存在着各种不良情绪。多因素分析表明,主要影响老人情绪的是躯体健康、工作和婚姻等因素。

人类YAC库PCR三维筛选体系的建立及质量考核

为了在知道某个区域、位点、基因或ＤＮＡ片段的部分信息后，能从ＣＥＰＨＹＡＣ库中筛选出与其对应的ＹＡＣ克隆，为进一步研究奠定基础，需要建立一个筛选体系。本文概述了这一筛选体系的建立过程。随后，用两对与已知基因对应的引物进行了筛选验证工作，证明了这一体系的可用性，同时提出了以后筛选的途径，即首先筛选ＹＡＣ库的ＭｅｇａＹＡＣ部分，并以５块板为一组进行筛选。另外，运用荧光原位杂交技术（ＦＢＨ），对ＣＥＰＨＹＡＣ库的质量及其第一代人类基因组物理图谱进行了考察。我们取２６个ＹＡＣ克隆进行ＦＩＳＨ定位，结果其中嵌合体１３个，占５０％。定位错误的克隆有６个，占２３％。非嵌合体且定位正确的共９个，占３５％。

Alzheimer病患者外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性表达的研究

对１５例Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者和１０例健康老年人的外周血淋巴细胞染色体畸变和脆性的表达进行了研究。实验结果表明，Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病患者的自发和诱发染色体畸变和脆性表达均高于对照组，自发畸变、诱发畸变、自发脆性表达、诱发脆性表达，实验组均值分别为８．３次、３９．３次、４．３次、１８．２次，对照组分别为２．１次，１８．３次、１．６次、７．７次。因此染色体脆性表达的增多在Ａｌｚｈｅｉｍｅｒ病的发生中可能起着一定的作用。

人类基因组17q11-q12:癌基因与抗癌基因富集区

由于人基因组17q11-q12含有许多与癌发生有关的基因,因此成了人们研究的热点。本文仅就该区域的基因克隆、基因组制图以及这些基因与癌发生的关系作一详细介绍。

从酵母人工染色体的人基因组片段直接分离表达顺序的初步研究

报导“从酵母人工染色体的人基因组片段直接筛选表达顺序”的方法体系。以定位于人基因组１３ｑ１４．３的ＹＡＣ２７Ｄ０８和人脑。ＤＮＡ分子库为主要研究材料，从１×１０６个ｃＤＮＡ克隆中筛选到５２个阳性克隆。经ＰＣＲ扩增产物Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交分析，排除了３１个假阳性克隆。继而分别用人基因组总ＤＮＡ、酵母基因组ＤＮＡ和人的ｒＤＮＡ为探针作ｄｏｔｂｌｏｔ杂交分析，又排除１８个非特异杂交的克隆，最后得到３个候选ｃＤＮＡ克隆。经与ＹＡＣ２７Ｄ０８以及１０个定位于染色体其他区带的ＹＡＣ克隆作杂交验证，确认这３个ｃＤＮＡ克隆是来自ＹＡＣ２７Ｄ０８的特异性表达顺序。它们被分别命名为ｃｆｄ１３—１，ｃｆｄ１３—２，ｃｆｄ１３—３。其插入片段分别为２．０ｋｂ，１．１ｋｂ和３．８ｋｂ。Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析结果表明：ｃｆｄ１３—１和ｃｆｄ１３—２所在基因的转录物分别长９．０ｋｂ，７．０ｋｂ，ｃｆｄ１３—３则出现６条杂交带，分别长１２．０ｋｂ，３．０ｋｂ，２．２ｋｂ，１．５ｋｂ，１．０ｋｂ和０．６ｋｂ。

应用PCR—SSCP技术从显微切割的人染色体17q11—12探针池批量分离单拷贝片段的研究

将ＤＮＡ单链构象多态（ＳＳＣＰ）检测的原理，应用于“显微切割的人染色体１７ｑ１１—１２探针池”批量分离单拷贝片段，取得了很好效果。从筛选出的７４个次级单拷贝中有效地鉴定出３７个非同源的单拷贝片段。这比传统的仅限于长度比较而确认的非同源单拷贝片段（１２个）多出２５个．其中部分已经ＤＮＡ测序证实。结果提示：采用ＳＳＣＰ技术区分相似分子量单拷贝片段的同源性，可显著地提高从“显微切割探针池”分离和克隆非同源单拷贝片段的效率。本文还将一部分单拷贝片段作为探讨，与人基因组ＤＮＡ的限制性片段作Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹杂交，结果均只显示单一杂交带，说明单拷贝ＤＮＡ片段的结论是可靠的。