慢性肾脏病患者治疗前后血清miR-30a-5p和miR-196a水平变化及价值

目的检测并分析慢性肾脏病(chronic kidney disease,CKD)患者治疗前、连续治疗不同随访时间点血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平动态变化,探讨其作为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的价值。方法收集江苏省中医院肾内科2015年4月至2016年2月就诊的20例CKD患者治疗前以及连续治疗并随访3~6个月的血清标本,记录患者血生化及尿液指标,同时收集23例体检健康者血清标本作为对照。采用实时荧光定量PCR检测各组血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平。采用非参数检验、Spearman秩相关分析血清miR-30a-5p和miR-196a-5p的水平变化及临床应用价值。结果与健康人对照相比,CKD患者治疗前血清miR-30a-5p[0.563(0.324,1.737)vs 0.270(0.127,0.435),U=100.5,P=0.004]和miR-196a-5p[0.423(0.154,1.270)vs 0.121(0.056,0.168),U=74,P=0.0003]水平显著升高。与CKD患者治疗前相比,CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平从治疗后第3个月开始呈持续降低趋势,至第6个月,其miR-30a-5p[0.344(0.128,0.672)vs 0.563(0.324,1.737),P=0.020],miR-196a-5p[0.227(0.079,0.474)vs 0.423(0.154,1.270),P=0.030]水平与治疗前比较差异有统计学意义。Spearman相关性分析显示,血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平与估算的肾小球滤过率(eGFR)呈显著负相关(r=-0.223,P=0.013;r=-0.191,P=0.035)。结论CKD患者血清miR-30a-5p和miR-196a-5p水平检测有助于反映肾脏功能,具备成为CKD患者辅助诊断及疗效监测分子标志物的潜能。

男性不育患者精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平检测的价值

目的探讨精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p表达特征及其在男性不育患者精浆中变化和价值。方法选取2019年1月至2021年12月于江苏省中医院检验科留存的血清、晨尿、胸水、脑脊液和精浆标本各30例;进一步选取2010年至2019年江苏省中医院和南京大学医学院附属金陵医院冻存的非梗阻性无精子症患者精浆标本、弱精子症患者精浆标本及正常对照精浆标本各54例。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)检测不同体液、不育患者精浆和正常对照精浆中miR-135a-5p和miR-135b-5p表达。ROC曲线分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平区分男性不育患者及对照的ROC曲线下面积(AUC^(ROC));相关性分析精浆miR-135a-5p、miR-135b-5p水平与精液参数的相关性。结果5种不同体液间miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=64.88,P<0.01和H=64.7,P<0.01),二者在血清和精浆中水平均最高,在尿液中水平均最低。无精子症组、弱精子症组及正常对照组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平差异具有统计学意义(H=32.14,P<0.01;H=21.37,P<0.01)。与正常对照组相比,无精子症组2种miRNA水平均显著降低(U=687,P<0.01;U=843,P<0.01);弱精子症组与正常对照组差异无统计学意义(P均>0.05);无精子症组与弱精子症组精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平具有显著差异(U=635,P<0.01;U=779,P<0.01)。精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p区分无精子症与正常对照及弱精子症患者AUCROC分别为0.764(95%CI:0.675~0.854),0.711(95%CI:0.612~0.810)和0.782(95%CI:0.695~0.869),0.733(95%CI:0.637~0.829)。相关性分析结果显示,精浆miR-135a-5p和miR-135b-5p水平与精子浓度、精子活动率、前向运动精子百分率和非前向运动精子百分率均呈正相关(P均<0.01)。结论miR-135a-5p和miR-135b-5p为精浆高表达miRNA,在无精子症患者中显著降低,二者与男性不育发生关系密切。

外周血中KCNMA1基因甲基化水平与肺癌的发生和发展相关

目的探究外周血中KCNMA1基因的甲基化水平与肺癌的相关性。方法应用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱(MALDI-TOF-MS)技术对285例肺癌患者、186例年龄、性别匹配的良性肺结节患者和278例匹配的健康对照外周血中KCNMA1基因上4个CpG位点甲基化水平进行半定量检测。使用Logistic回归模型校正协变量分析DNA甲基化水平与肺癌的相关性。使用Mann-Whitney U检验分析不同临床特征组别的甲基化水平差异。结果在>55岁和女性人群中,KCNMA1_CpG_5甲基化水平最高四分位Q4 vs最低四分位Q1均与肺癌显著相关(>55岁人群:OR=2.60,95%CI:1.25~5.41,P=0.011;女性人群:OR=2.09,95%CI:1.03~4.26,P=0.042),且KCNMA1_CpG_5甲基化的相关性从Q2到Q4逐渐增强(P=0.003,0.038)。与良性患者相比,KCNMA1_CpG_5最高四分位Q4在男性肺癌患者中的OR值为0.35(95%CI:0.16~0.79,P=0.012)。浸润性腺癌中KCNMA1_CpG_3甲基化水平显著低于非浸润性腺癌(P=0.028),较大肿瘤(T2-4)中KCNMA1_CpG_1甲基化水平显著高于较小肿瘤(T1)(P=0.021)。结论外周血中KCNMA1甲基化水平的改变可能与肺癌发生和发展相关。

中国人群外周血RABL6基因甲基化与早期肺癌的关联性研究

目的基于病例对照研究,探索中国人群外周血RABL6基因甲基化水平与早期肺癌(LC)之间的相关性。方法采用基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱定量检测275例LC患者(81.5%为Ⅰ期)和年龄、性别匹配的185例良性肺结节对照以及267例健康对照外周血RABL6中7个CpG位点的甲基化水平。采用无序多分类Logistic回归法分析RABL6甲基化水平与LC之间的相关性。应用Mann-Whitney U检验比较不同临床特征分组之间RABL6甲基化水平。结果与健康对照比较,RABL6_CpG_17甲基化水平与LC在女性中呈负相关(甲基化水平每减少10%:OR=2.47,95%CI=1.19~5.13,P=0.016),在男性中呈正相关(甲基化水平每减少10%:OR=0.52,95%CI=0.29~0.94,P=0.030)。此外,在年龄>55岁的人群中观察到了RABL6_CpG_2和RABL6_CpG_5位点的高甲基化与LC存在关联(甲基化水平每减少10%:OR=0.77,95%CI=0.60~0.99,P=0.038;OR=0.58,95%CI=0.34~0.97,P=0.038)。结论外周血RABL6甲基化水平与早期LC之间存在关联,为开发基于外周血DNA甲基化来评估早期LC风险的潜在标志物提供了新的线索。

miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中的表达及价值

目的探究微小RNA-494-3p(miR-494-3p)在胃癌患者血清外泌体中的表达水平及临床意义。方法采用TaqMan探针法RT-qPCR检测44例胃癌患者和44例健康人对照组血清外泌体中miR-494-3p的表达水平,采用ROC曲线分析并评估其对胃癌的鉴别诊断价值。同时,在14例胃癌组织和16例胃良性疾病对照患者胃组织中进行进一步验证。结果与健康人对照组(1.00±0.36)相比,胃癌组血清外泌体中miR-494-3p的相对表达水平(0.21±0.03)显著降低,差异有统计学意义(Z=3.64,P<0.01);胃癌组织中miR-494-3p的相对表达水平(0.22±0.07)亦显著低于胃良性疾病对照组(1.00±0.39),差异有统计学意义(Z=2.66,P<0.01)。血清外泌体miR-494-3p筛查胃癌和健康人的ROC曲线下面积(AUC ROC)为0.725(95%CI:0.622~0.829,P<0.01),当cut-off值为0.370时,其敏感性为50.0%,特异性为86.4%,阳性预测值为63.3%,阴性预测值为78.6%,准确性为68.2%。结论miR-494-3p在胃癌患者血清外泌体中呈低表达,有望成为胃癌筛查和辅助鉴别诊断的潜在生物学标志物。

抗氧化性维生素与男性生殖

生殖系统内过多的活性氧 (ROS)产生可导致精子膜脂质过氧化损伤 ,而抗氧化性维生素对于清除ROS 避免精子脂质过氧化损伤具有一定保护作用。

细菌性阴道病的研究进展

细菌性阴道病(BV)是一种由一些厌氧菌和兼性厌氧菌(主要是加德纳菌属、Prevotella属、拟杆菌属、动弯杆菌属、革兰阳性球菌、支原体属)的过度增殖以及乳酸杆菌的减少或缺失所引起的多细菌性紊乱疾病。近年来的研究发现,BV与其他性传播疾病(STD)之间存在较强的相关性,过高频率的性生活易产生BV,属于性传播疾病的一种。该文就细菌性阴道病的研究进展作一简述。

心脑血管疾病中血清C3的研究进展

补体系统是人体免疫防御的一个重要部分。近来研究发现补体系统参与动脉粥样硬化的形成。血清C3水平在冠状动脉硬化性心脏病及脑梗死等心脑血管疾病中有明显变化,被认为是冠心病的独立危险因素,是心血管疾病一个很好的标志物。现就C3在心脑血管疾病中的研究作一综述。

加强内部审核在实验室质量管理体系中的监督作用

近年来，随着医学实验室认可工作的大力推行，以及卫生部关于《医疗机构临床实验室管理办法》的出台都推动了各级实验室对全面质量管理的重视。就目前情况来看，可以较容易建立1套质量管理体系，然而实验室认可的宗旨是持续改进，这就要求作者以各种方式去发现、解决问题并预防，因此，如何去维持这一管理体系才显得更为困难。内部审核是保证质量管理体系进一步改善，以达到持续改进目的的重要环节。

加味犀角地黄汤对大鼠CIA急性关节肿胀与滑膜组织中VEGF表达的影响

目的通过测定大鼠关节滑膜组织中血管内皮生长因子(VEGF)在大鼠胶原诱导性关节炎(CIA)模型形成及应用加味犀角地黄汤(XDD)治疗过程中的表达水平,探讨加味XDD对类风湿关节炎(RA)的治疗作用。方法用SD大鼠制作Ⅱ型胶原蛋白诱导的CIA大鼠模型,实时荧光定量PCR法检测正常组、模型组和实验组大鼠在第42d关节滑膜组织中VEGF的表达情况。结果模型组大鼠关节滑膜组织中VEGF的表达明显高于正常组,加味XDD治疗组VEGF的表达低于模型组。结论加味XDD可降低大鼠关节滑膜组织中VEGF的表达,可能会对RA急性期有一定的治疗作用。

冠心病患者血清C3和CRP的水平分析

目的了解C3、CRP与冠心病(CAD)的相关性。方法测定40名病人(经冠状动脉造影术确诊为典型冠心病)及40名年龄、性别相当的正常对照人群的血清C3、CRP、CHO、TG、HDL、LDL及空腹血糖水平。结果病人组的C3、CRP水平明显高于正常对照组(C3分别为2.94g/l和1.43g/l,P<0.001;CRP分别为19.32mg/l和5.71mg/l,P=0.005)。通过包括C3、CRP、CHO、TG、HDL、LDL及空腹血糖等参数的相关分析,C3与冠心病是独立相关的。结论CAD病人血清C3和CRP水平是升高的,且C3比CRP具有更好的相关性。

Olympus AU2700全自动生化分析仪不同进样模式的偏差评估及应用

目的探讨Olympus AU2700全自动生化分析仪急诊台进样模式的校准与质控的必要性。方法按照NCCLS的EP9-A2文件的要求,以样本架进样模式为对比方法,急诊台进样模式为试验方法,用患者血清对丙氨酸氨基转移酶、总蛋白、尿素等16个生化项目进行检测,计算相关系数和直线回归,对两种进样模式之间的预期偏差、系统误差进行评估。结果在所检测的16个项目中,所有测定结果的预期偏差均可以接受。结论根据比对结果显示,与样本架进样模式结果偏差在允许范围内,急诊台进样模式无需另外校准与室内质控。

丙肝患者唾液中一氧化氮水平的测定

目的测定丙肝患者唾液一氧化氮(Nitrico xide,NO)代谢产物的水平,验证NO水平是否与HCV-RNA存在相关。方法用NO试剂盒测定50名丙肝患者唾液中NO代谢产物的含量,同时以20名健康者作为对照组。采用RT-PCR测定血清和唾液中的HCV-RNA。而NO水平是通过测定其稳定的代谢终产物硝酸盐(NO3-)和亚硝酸盐(NO2-)的水平反映的。结果患者组与对照组唾液中NO的浓度无明显区别,与HCV-RNA的存在与否无关,伴有肝硬化的丙肝患者具有较高的NO浓度但与无肝硬化的丙肝患者或对照组无明显区别。结论丙肝患者唾液中NO水平未见增加,间接表明此类患者可能较少发生慢性涎腺炎,或许病变较轻不足以增加唾液中的NO水平。

细菌性阴道病与性传播疾病

细菌性阴道病是一种由一些厌氧菌和兼性厌氧菌(主要是加德纳菌属、Prevotella属、拟杆菌属、动弯杆菌属、革兰阳性球菌、支原体属)的过度增殖以及乳酸杆菌的减少或缺失所引起的多细菌性紊乱疾病。近年来的研究发现细菌性阴道病与其他性传播疾病之间存在较大的相关性,过高频率的性生活易产生细菌性阴道病,属于性传播疾病的一种。

褪黑素在活性氧致精子线粒体功能损伤中的保护作用

目的 :探讨活性氧 (ROS)对精子线粒体功能的损伤以及褪黑素 (MLT)的保护作用。 方法 :采用Percoll梯度离心法选择具有正常生理功能的精子 ,作为本实验的正常精子模型。应用次黄嘌呤—黄嘌呤氧化酶体系产生ROS ,在MLT存在与不存在情况下 ,与精子模型分别孵育 30和 6 0min后 ,采用酶组织化学方法分析精子线粒体部位的琥珀酸脱氢酶 (SDH)活性 ,采用Rhodamine 1 2 3(Rh1 2 3)荧光探针标记精子 ,通过流式细胞仪检测线粒体膜电位。 结果 :正常精子与ROS孵育后 ,精子线粒体膜电位明显降低 ,线粒体SDH活力降低极为显著 ;而MLT则减轻了ROS对精子线粒体功能的损伤。 结论 :ROS可通过对精子线粒体膜电位和SDH活力的影响 ,而导致精子线粒体功能损伤 ;MLT可通过其有效的抗氧化能力 。

血培养病原菌分布及污染菌判定的实验室检查

目的通过回顾该院的血培养病原菌检出情况以及污染菌的判定分析,了解该院血流感染的主要病原菌构成比,并证实开展双侧双瓶采血检测等实验室检查方法,能有效提高阳性率和血培养污染菌的判定。方法对该院2010年7～12月的1 121份血培养标本进行回顾性分析,了解其病原菌分布,对部分患者开展双侧双瓶采血检测,以血培养中最常见的污染菌凝固酶阴性葡萄球菌(CNS)为例,评价该方法对血培养污染菌判定的价值。结果血培养阳性检出率为10.0%,主要检出菌种为大肠埃希菌,占25.0%,临床分布和时间分布显示为散发,未见院内感染趋势。其中采用双侧双瓶采血检测的血培养标本98例,阳性检出率达22.5%,高于单侧单瓶采血(9.6%),其中检出CNS的比例为22.7%,双瓶48h内同时检出CNS仅为4.5%,而单瓶检出占18.2%,提示临床CNS可能为污染菌,建议结合患者临床资料、状态综合判断,指导用药。结论血培养检出病原菌种类仍以大肠埃希菌为最高,同往年相似。开展采用双侧双瓶采血方法对判定CNS是否为污染菌有一定作用,可提示临床结合患者具体情况综合判断,减少不合理用药。

PEI与脂质体介导基因转染的比较研究

目的比较新型转染试剂阳离子聚合物聚乙烯亚胺(PEI)与脂质体2000介导的血管内皮细胞生长因子VEGF165基因转染人胚肾细胞293T的转染效率,为基因转染提供新的方法。方法分别采用脂质体和不同N/P比值的PEI将合成的含有绿色荧光蛋白(GFP)和VEGF165的质粒转入293T细胞。转染24h后,采用CCK-8试剂盒检测细胞活性;转染48h后在荧光显微镜下观察比较两种转染方法的转染效率,并通过ELISA方法检测细胞上清液中VEGF165浓度,比较两种方法的转染效果。结果当N/P=9时,PEI转染的细胞活性与脂质体转染相近,对细胞的毒性较小;此时,PEI转染效率与脂质体也相似,均可达到约70%;同样,转染后细胞上清中VEGF165浓度较未转染组提高(P<0.05),但两种方法转染组间比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 PEI作为一种新型的转染试剂,与脂质体相比,在一定比例范围内,具有转染效率高,对细胞毒性小且价格低廉的优势,有望成为基因转染的有效载体。

降压益肾颗粒对原发性高血压患者动脉功能、抵抗素和炎症因子影响的研究

[目的]通过观察降压益肾颗粒对原发性高血压患者动脉功能、抵抗素和炎症因子的影响,探讨降压益肾颗粒治疗原发性高血压的作用机制。[方法]收集符合纳入标准的原发性高血压患者120例,随机分为治疗组60例,对照组60例,治疗组给予非洛地平加降压益肾颗粒治疗,对照组给予非洛地平治疗,疗程为8周,观察治疗前后两组动脉功能、抵抗素和炎症因子水平的变化。[结果](1)对动脉功能影响方面,治疗组治疗后可明显改善血管功能(P<0.01);(2)对抵抗素影响方面,两组治疗后均可降低抵抗素水平(P<0.05),治疗组优于对照组(P<0.05);(3)对炎症因子影响方面,两组治疗后均可降低IL-1、TNF-α、Hs-CRP水平(P<0.01),治疗组明显优于对照组(P<0.01)。[结论]降压益肾颗粒联合非洛地平改善原发性高血压患者动脉功能及降低抵抗素、Hs-CRP、IL-1、TNF-a水平疗效优于单独应用非洛地平。

检验科在临床沟通中可采取的措施

目的探讨检验科与临床沟通与互动的技巧和举措。方法采取一系列富有江苏省中医院特色的临床沟通与互动举措。包括建立检验科对外网站，印发《检验项目指南》，发行月刊《临床检验信息》，成立临床沟通小组，召开检验新项目推广会，强化LIS系统的互动功能，强化检验科内部继续教育等。结果科室较早的通过了ISO15189的认可，检验结果的可信度获得了医生和患者的认可，连续9年获得“配合临床最佳的医技科室”。结论探索了一些检验与临床沟通的举措，提升了我科服务质量，减少了临床的医疗差错，增强了检验工作者的荣誉感。

儿童原发性肾病综合征患者血清miR-150水平变化及其临床意义

目的分析儿童原发性肾病综合征(nephritic syndrome,NS)患者血清miR-150水平变化,评估其作为NS新型辅助诊断标志物临床价值。方法收集2010年3月~2014年5月在南京军区总医院和江苏省中医院住院并确诊的78例原发性NS患儿及南京市儿童医院79例年龄、性别匹配的健康对照儿童血清样本,记录患者及对照临床资料。实时荧光定量PCR技术(quantitative real-time PCR,qRT-PCR)检测和比较NS患儿及对照儿童血清miR-150水平变化,同时测定其血清总蛋白(TP)、清蛋白(ALB)、球蛋白(GLO)、总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)和肾功能指标[尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(Uric acid)和尿蛋白]水平,统计学分析血清miR-150临床价值及与上述指标相关性。结果 NS患儿血清miR-150的水平为101.4(21.29~336.6)fmol/L,明显高于对照组34.11(5.53~134.2)fmol/L(F=3.658,P<0.001)。ROC曲线分析显示,miR-150作为NS诊断的曲线下面积(ROCAUC)为0.892(95%CI=0.843~0.940)。Spearman相关性分析显示,NS患儿血清miR-150水平与GLO(r=-0.231,P=0.042)和TG(r=-0.233,P=0.040)水平均呈显著负相关。逐步多元线性回归分析显示,在校正其他相关因素的影响下NS患儿血清miR-150水平与ALB水平呈显著独立相关(β=0.241,P=0.034;校正r2=0.046)。多因素逻辑回归分析显示,在校正了年龄、性别等因素后,血清miR-150水平是NS的独立危险因素[OR=16.07(95%CI=5.35~48.28),P<0.001]。结论儿童NS患者血清miR-150水平显著升高,且与肾功能损伤和血脂指标密切相关,有望作为其临床辅助诊断新指标。