IgM抗体诊断早期先天梅毒

我们用梅毒特异性19(s)IgM-TPPA抗体检测方法,对5例常规梅毒血清学方法RPR和TPPA两个试验均阳性的新生儿(其母亲已在怀孕时被确诊为不同病期梅毒)进行了检测。患儿中有3例19(s)IgM-TPPA阳性,另2例阴性。最终确诊3例新生儿为先天梅毒。特异性IgM检测应该作为新生儿和早期无症状先天梅毒确诊的实验诊断方法。加强婚前、孕前及早孕期的梅毒筛查和治疗,对控制先天梅毒的发生有重要意义。

实时荧光核酸恒温扩增技术检测泌尿生殖道沙眼衣原体感染

目的评价实时荧光核酸恒温扩增技术(simultaneous amplification and testing,SAT)检测沙眼衣原体(CT)核酸试剂盒(RNA恒温扩增)的敏感性和特异性。方法对229例临床疑似患者的尿样及拭子标本同时进行SAT检测和"金标准"沙眼衣原体细胞培养检测,检测结果有差异的标本采用PCR方法对拭子标本进行复测,根据实验结果评估SAT技术在尿样及拭子标本检测中的敏感性和特异性。结果结合细胞培养和PCR的实验结果作为"扩大金标准",得出SAT技术对临床拭子标本的检测敏感性为97.1%,特异性为100%;对尿样标本检测的敏感性为89.4%,特异性为99.2%。拭子和尿样标本检测结果的符合率为95.2%,经卡方检验,差异无显著性(χ2=3.27,P>0.05)。结论 SAT技术检测CT试剂盒对拭子及尿样标本敏感性及特异性均较好,适用于临床实验室对CT的检测。

2000-2003年上海地区性病就诊者支原体感染及耐药监测的结果分析

目的了解上海地区2000～2003年性病就诊者支原体感染及对多种抗生素耐药的发生率、流行情况和耐药特征.方法采用生物梅里埃IST试剂盒.对结果分别计算男女阳性检测率和耐药率等,并进行统计分析.结果共检测11566人次,支原体阳性率42.9%.主要由解脲脲原体(Uu)构成(89.4%),Uu+人型支原体(Mh)混合感染所占比例在逐年下降.受检者的男女性别比例为0.93:1.男性阳性率26.2%,女性阳性率58.6%(x2=1 233.96,P＜0.001).有4 722人次感染的支原体出现对1种或1种以上药物耐药,4.1%感染的支原体对所有9种药物全部敏感,其中单一感染菌株占95.5%(Uu/Mh).总体上单一感染较混合感染的耐药率要低(x2=5.049,P=0.025).各抗生素平均耐药率由高向低依次为:氧氟沙星(Ofl)87.4%,红霉素(Ery)59.2%,环丙沙星(Cip)39.0%,阿奇霉素(Azi)17.2%,四环索(Tet)13.6%,克拉霉素(Cla)7.8%,强力霉素(Dox)6.1%,交沙霉素(Jos)1.6%和原始霉素(PRI)0.6%.多重耐药菌株占76.9%.对Dox、Tet和Cip抗生素,有随着年龄上升而耐药率下降的趋势(P＜0.05).结论近年来,支原体感染和对多种药物的耐药率逐年提高,Pri、Dox、Jos和Tet有较好的抗菌活性.建议上海地区对女性应首选Dox进行抗感染治疗.

19（s）－IgM－TPHA检测先天梅毒及1例报告

用梅毒螺旋体特异性抗体１９（ｓ）－ＩｇＭ＋ＴＰＨＡ检测方法，确诊１例出生４天新生儿患先天梅毒。其母在怀孕晚期患二期潜隐梅毒，分娩前２周给红霉素治疗，分娩后复查ＲＰＲ滴度不变而１９（ｓ）－ＩｇＭ滴度显著下降。治疗１１个月后母婴１９（ｓ）－ＩｇＭ均转阴。作者认为，１９（ｓ）－ＩｇＭ检测是一种先天梅毒确诊手段。此法还是判断梅毒治疗效果的敏感指标。

梅毒硬下疳实验室检查策略初探

目的回顾几种梅毒实验室检测方法在硬下疳患者中的梅毒检出率,分析各检测指标间的相互关系,探讨其临床意义。方法每个患者同时进行暗视野检测(DF)、快速血浆反应素试验(RPR)和梅毒螺旋体明胶颗粒凝集试验(TPPA)检测抗体。对实验数据进行统计分析和检验。结果456例患者检测的敏感性分别为DF72.8%,TPPA83.6%,RPR62.7%(配对χ2检验,P<0.001)。结论为了提高一期梅毒的检出率,对疑似梅毒硬下疳的患者,应同时进行3种方法检查。

上海市1986～2001年梅毒实验室监测结果分析

目的 分析上海市 1986～ 2 0 0 1年性病门诊病例和部分社会人群梅毒感染情况 ,探索梅毒流行规律 ,发现高危人群 ,为有关部门开展性病防治工作提供决策依据。方法 收集和整理上海市 1986～ 2 0 0 1年的性病门诊病例和部分高危人群的血清学检查结果 ,结合梅毒确诊试验进行统计学处理。结果 1986～ 2 0 0 1年共对 2 0 35 5人次做了梅毒确诊试验 ,包括梅毒暗视野检查、梅毒螺旋体血凝试验和荧光螺旋体抗体吸收试验 ,共发现梅毒阳性135 18人次 ,年均阳性检出率为 5 8 6 3%。其中男性检出率 5 1 5 3% ,女性检出率 70 6 5 % ,女性明显高于男性。从1995年起 ,上海市每年梅毒阳性检出数呈逐年快速上升趋势 ,并出现先天梅毒和小儿梅毒增多现象。结论 上海市性病门诊病例中 ,梅毒检出数和检出率逐年升高 。

上海市梅毒螺旋体血清学实验室室间质量评价

目的了解上海市各级医疗机构实验室开展梅毒螺旋体血清学检测质量及变化趋势。方法周期性地将一组样本发送到各实验室进行检测,比较每一实验室的结果与同组的其他实验室的结果/靶值,及时将比较的情况反馈给参与的实验室。结果2004年至2007年共进行了8次梅毒螺旋体血清学室间质量评价(EQA)。平均回报率超过97%。梅毒螺旋体筛查试验总合格率最高的为2004年(90.8%),最低的为2005年(76.1%);分析不同靶值样本结果,阴性和中、高滴度样本的合格率基本在80%,临界和弱阳性样本在32.7%和73.3%;1∶16或以上滴度的样本检测结果的变异系数(CV)值在10%或以下,而弱阳性样本的CV值超过90%;筛查试验的合格率按降序排列为二级医院(85.3%)、三级医院(83.5%)、民营医院(81.0%)和一级医院(76.6%)。4年中梅毒确诊试验总体合格率接近98%;各级医院分组的合格率差异不大。结论弱阳性样本筛查试验结果的CV值是影响整体EQA合格率的主要因素,不同级别的医疗机构,存在着检测质量的总体差异。需要及时调整专业管理模式,加强岗位培训的力度,探索提高检测质量的方法。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4基因启动子区多态性与系统性红斑狼疮的遗传易感性

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4,CTLA-4)基因启动子区多态性与系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE)发病的相关性。方法以医院为基础的病例对照研究,应用PCR-RFLP技术分析了97例SLE患者和200例对照在启动子区-1722T〉C和-318C〉T位点的多态性。结果SLE患者组-1722T〉C位点TT基因型频率高于对照组(P=0.002),患者中的T等位基因比例高于对照组(OR=1.94,95%CI1.34-2.80,P=0.000);而在-318C〉T位点,病例组和对照组的基因型频率和等位基因频率分布无显著差异。但是,两位点等位基因间存在连锁不平衡(精确P<0.05),且在病例组和对照组,单倍型频率分布不同(χ2=12.64,P=0.005);其中,与对照组相比,病例组中T-C单倍型具有较高的频率(P=0.001)而C-C单倍型频率较低(P=0.002)。结论CTLA-4基因-1722T〉C位点多态与SLE易感性有关。虽然本次研究结果未发现-318C〉T位点多态与SLE发病相关,但发现T-C单倍型为SLE易感单倍型,而C-C单倍型为其保护单倍型。

1996～2003年上海市某医院泌尿生殖道分泌物标本性病检测结果分析

目的 了解上海市近几年性病门诊就诊者中淋球菌(NG)、沙眼衣原体(CT)和解脲脲原体(UU)的流行趋势和特征,探讨可能的影响因素,为制定和开展有效的防治措施提供参考。方法 收集1 996～2 0 0 3年到上海市皮肤病性病医院性病门诊就诊,并进行泌尿生殖道分泌物标本性病检测者的人口学特征和检测结果等资料,进行统计学描述和分析。结果 在此期间共有6 6 6 5 8人接受检查,其中NG阳性1 8348例(35 8%) ,CT阳性70. 4 8例(1 8 .1 %) ,NG和CT阳性人数和阳性率在1 997年和1 998年达高峰,之后下降,近年又开始上升。UU阳性6 6 .73例(37 4%) ,其阳性人数和阳性率则基本上呈逐年上升趋势。混合阳性率最高的是CT和UU(1 4 2 %) ,最低的是NG和UU(8 7.%)。女性NG阳性者中的CT阳性率(35 7%)和CT阳性者中的NG阳性率(2 7 .2 %) ,分别高于所有受检者对应的阳性率(2 0 . 4%和1 9. 6 %) ,男性情况相反。结论 上海地区性病流行谱正在发生改变,女性UU感染人数明显增多;近年来NG、CT和UU的混合感染率处于较高水平,尤其是低龄女性;NG和CT的混合感染情况应该引起重视。

2001～2003年上海地区淋病奈瑟菌对抗生素的敏感性测定及质粒分析

目的了解上海地区2001～2003年淋病奈瑟菌(NG)对抗生素的敏感性情况及变化趋势。方法采用琼脂稀释法测定青霉素、头孢曲松、大观霉素、环丙沙星、四环素对742株NG的最小抑菌浓度(MIC)。用纸片酸度法检测β内酰胺酶菌株。用碱裂解方法抽提质粒。结果742株NG检出产青霉素酶菌(PPNG)342株(46.09%);质粒介导高度耐四环素(TRNG)166株(22.37%);耐环丙沙星718株(96.77%);耐大观霉素1株;未发现对头孢曲松耐药菌株;超过20%的菌株同时对青霉素、四环素和环丙沙星耐药;对35株菌株作了质粒分型,含耐药质粒检出率97%,分别带有5.4和7.4kb耐药性质粒。结论淋球菌对青霉素、四环素和环丙沙星3种药物分别有较高比例的耐药率。上海地区治疗淋病应首选大观霉素和头孢曲松。

梅毒螺旋体Tp0453重组蛋白的表达纯化及免疫活性研究

目的表达梅毒螺旋体膜蛋白Tp0453(28-288 aa),纯化表达产物并进行免疫活性分析,为探索Tp0453重组蛋白在梅毒血清学诊断中的应用提供实验依据。方法通过生物信息学分析,挑选Tp0453抗原的优势表位,进行诱导表达;以W estern-b lot和间接ELISA法检测重组蛋白的免疫反应性;用重组蛋白免疫新西兰家兔,评价其免疫原性。结果纯化后获得了相对分子量约为32×103的融合蛋白。W estern-b lot检测其能与梅毒患者阳性血清发生特异性反应;同时以重组蛋白为包被抗原建立间接ELISA法,检测梅毒诊断试剂参考血清,其阴阳性符合率均为100%。用纯化的Tp0453重组蛋白免疫新西兰家兔,能诱导其产生特异性免疫应答,ELISA法测定免疫血清中特异性抗体滴度在1∶1280以上。结论基因重组表达的Tp0453重组蛋白具有良好的免疫原性和免疫反应性,为进一步研究其在梅毒血清学诊断中的应用和其生物学功能奠定了基础。

婴儿头癣1例

犬小孢子菌（Microsporum callis）亦称羊毛状小孢子菌（MiCrospOntBllan,osumsabouraud）是引起儿童头癣的主要病原菌，一般儿童发病较多，而婴儿感染较少见。近期，笔者从一婴儿头癣患者皮损中分离出一株犬小孢子菌，现报告如下。

抗梅毒螺旋体重组蛋白Tp0453单克隆抗体的制备及应用研究

目的利用基因重组抗原免疫BALB/c小鼠,制备抗梅毒螺旋体(Tp)重组蛋白Tp0453的单克隆抗体(mAb),评价其在早期梅毒Tp抗原诊断中的应用。方法以重组蛋白Tp0453免疫BALB/c小鼠,将免疫后的小鼠脾脏与SP2/0细胞融合,用间接ELISA和Western Blot检测杂交瘤细胞分泌的抗体,并对阳性细胞经亚克隆建株;体内诱生腹水法制备抗体,用硫酸铵沉淀法对mAb进行纯化并测定其亚类和效价;以自制的mAb建立间接免疫荧光法(IIF)检测梅毒患者分泌物标本,并与镀银染色的检测结果进行比较。结果获得4株稳定分泌抗重组蛋白Tp0453的杂交瘤细胞株,分别命名为15B2、8B9、9C6和2F8,其mAb效价分别为1∶25000、1∶8000、1∶50000、1∶10000;2F8杂交瘤细胞分泌的mAb为IgG2b,其他3株交瘤细胞分泌的mAb均为IgG1;4株mAb腹水经SDS-PAGE均显示出一条分子量约为50kDa的重链条带和一条分子量为26kDa的轻链条带;4株杂交瘤细胞染色体数在90～108范围内变化。IIF显示自制的mAb能与天然的Tp抗原结合,检测86例分泌物标本,IIF与镀银染色的符合率为95.3%。结论本实验成功获得了抗Tp0453重组蛋白的mAb,该mAb能识别天然的Tp0453抗原,有望应用于早期梅毒感染的抗原检测。

上海市医院实验室检测解脲脲原体质量分析

目的了解上海市各级医院临床实验室泌尿生殖道解脲脲原体(UU)检测情况。方法发放解脲脲原体阳性、干扰菌和阴性泌尿生殖道模拟标本,要求各临床实验室于当日按常规操作进行检测并准时反馈信息。对比结果,进行统计分析。结果三种标本检测结果均符合的单位为39家(31.7%);阴性标本符合单位为123家(100%),阳性标本符合单位为79家(64.2%),干扰菌标本符合单位为50家(40.7%)。结论检测UU的商品化试剂品牌很多,试剂质量参差不齐,给临床正确诊断带来困难。实验室解脲脲原体检验质量有待提高。

上海市某桑拿浴场服务小姐STD及其相关行为调查分析

目的了解上海市中高档桑拿浴场服务小姐性传播疾病／艾滋病（STD／AIDS）的感染情况、相关行为和影响因素。方法对选择的浴场中在2003年4月～2004年10月工作的所有服务小姐117人，进行流行病学调查和实验室检查。结果根据问卷调查，该人群中每次或经常使用安全套者63人（53．8％），偶尔或从不使用者54人（46．2％）；每次或经常使用安全套率〉25岁组（42．2％）低于〈25岁组（67．9％）（χ^2=7．73，P=0．004）。性交后每次或经常冲洗阴道者有93人（79．5％），仅2人（1．7％）不冲洗阴道。疾病总检出率31．6％，其中细菌性阴道炎阳性率最高达17．1％。用Logistic回归进行多因素分析，文化程度、阴道冲洗与细菌性阴道炎有统计学意义（OR=9．22，P=0．001和OR=26．22，P=0．008）。结论该人群与性伴之间的不正确保护或无保护的性行为，极易成为STD的蚤害者和传播者．应采取措旒提高她们的认识．提供医疗服务．减少STD／AIDS的发牛。

镀银染色法在一期梅毒实验室诊断中的应用

目的 探讨镀银染色法在一期梅毒实验室诊断中的意义。方法 对生殖器溃疡患者经刮片取材后作镀银染色和暗视野镜检检测梅毒螺旋体 (TP) ,同时对血清进行RPR和TPPA检测。结果 14 6例患者中镀银染色法阳性检出率为 3 9.7% ,高于暗视野镜检阳性检出率的 2 3 .9% (P <0 .0 0 1)。螺旋体经镀银染色后清晰易辨 ,特别是部分患者溃疡期较长或局部用药后的标本 ,仍有较好的检出率。结论 镀银染色法是早期梅毒实验室诊断的一种比较有效的方法之一 ;对病期相对较长或局部用药的患者标本 ,镀银染色法检出率优于暗视野镜检。

蛋白免疫印迹试验检测新生儿早期先天梅毒21例

目的:评估梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TPPA-IgM-WB)在诊断新生儿早期先天梅毒中的作用。方法:对21例梅毒孕妇所产21例新生儿血清,应用梅毒螺旋体蛋白印迹试验(TPPA-IgM-WB)和常规血清学方法(TPPA、RPR、FTA-ABS-IgM)进行检测,评价上述实验诊断方法和常规实验室检测在先天梅毒早期诊断中的作用。结果:21例孕妇梅毒病例所生的21例新生儿中,按常规综合诊断方法10例诊断为先天梅毒,而新生儿血清IgM蛋白印迹试验l2例阳性(10例常规方法诊断为先天梅毒)。结论:血清IgM蛋白印迹试验诊断先天梅毒具有较高的特异性和敏感性,结果显示可能高于现行的常规综合诊断方法的诊断价值。