鲜壁虎酶解物对小鼠H_(22)移植瘤抑制作用的研究

目的:探索鲜壁虎粗提物经蛋白酶酶解后对小鼠H22移植瘤的抑制作用。方法:采用可溶性氮含量(SNTCA指数)法进行酶解度测定,鲜壁虎粗提物经胃蛋白酶、木瓜蛋白酶组合水解得到酶解物;采用小鼠H22肝癌移植模型,分阴性对照组、阳性对照组、粗提物组及粗提物酶解组,测小鼠瘤重及脾和胸腺指数。结果:粗提物组、粗提物酶解组对H22荷瘤小鼠肿瘤抑制率分别为29.17%、48.99%,粗提酶解组与阴性对照组相比有显著差异(P<0.05)。粗提物组及粗提物酶解组的荷瘤小鼠脾、胸腺质量及其指数与阴性对照组相比无差异。结论:鲜壁虎粗提物组及粗提物酶解组对小鼠H22移植瘤具有抑制作用,酶解后增加了鲜壁虎粗提物的抗肿瘤活性。

家蚕茧壳水解粉的急性毒性和遗传毒性

目的:研究家蚕茧壳水解粉的急性毒性和遗传毒性。方法:应用小鼠急性毒性实验、体外哺乳类细胞(V79/HGPRT)基因突变实验、小鼠骨髓细胞染色体畸变实验及小鼠精子畸变实验对家蚕茧壳水解粉毒性进行研究。结果:该家蚕茧壳水解粉对雌雄小鼠半数致死量(median lethal dose,LD50)均大于11.50 g/kg,属实际无毒物质;基因突变实验中各受试物剂量组的突变率均没有达到自发突变率的3倍,亦无剂量-反应关系,结果为阴性;染色体畸变实验中家蚕茧壳水解粉各剂量组与阴性对照组无显著差异(P>0.05);精子畸变实验中,样品低、中剂量组与阴性对照组无显著差异(P>0.05),而高剂量组畸变率显著低于阴性对照组(P<0.05),证明实验结果均为阴性。结论:本次实验条件下,该家蚕茧壳水解粉属实际无毒级,未显示有急性毒性和遗传毒性作用。

WST-8方法用于蓝藻细胞活力的检测

作为重要的模式生物,蓝藻活细胞数量的测定方法应用非常广泛。本研究尝试将用于哺乳动物细胞的快速活力检测方法 WST-8方法用于蓝藻的检测。首先考察WST-8法与传统的蓝藻细胞计数法的相关性从而判断WST-8法应用的可行性,然后优化检测条件,考察检测波长、是否光照、孵育温度、孵育时间以及底物加入量对测定结果的影响。结果表明,细胞密度与WST-8方法测定的吸光度呈线性(r^2=0.996 7),此方法可用于集胞藻6803的细胞活力测定。最佳检测波长为457 nm,在25℃、30℃、37℃3个温度下,随温度升高,底物还原量增多,随孵育时间增加,产物逐渐增加,在0~120 min内呈现良好的线性关系,当底物加入量在2~10μL范围内,产物量随底物量增加而增加,当底物量大于10μL后产物量不再增加。因此,建议的检测条件为在30℃时,取100μL蓝藻培养液(浓度为1×10~7~6.4×10~7 cell/mL)于96孔板孔中,加入10μL WST-8试剂,光照恒温摇床孵育120 min,测定457 nm吸光度。