益气温阳活血方含药血清对大鼠肥大心肌细胞原癌基因c-fos、c-myc表达的影响

目的探讨中药复方益气温阳活血方含药血清对肥大心肌细胞原癌基因c-fos、c-myc表达的影响。方法通过血管紧张素(Ang)Ⅱ诱导肥大心肌细胞,Lowrys法测心肌细胞蛋白质含量,计算机图像分析系统测量心肌细胞的体积,酶联免疫吸附(ELISA)法检测去甲肾上腺素(NE)、肾上腺素(AD)含量,Western印迹法检测c-fos及c-myc蛋白质表达水平。结果与正常组比较,模型组心肌细胞蛋白质含量〔(20.639±7.665)比(11.220±2.862)μg/5×105cells〕、心肌细胞体积〔(2 081.672±186.040)比(1 090.009±169.542)μm3/单个胞〕、AD〔(16.376±4.949)比(3.782±0.854)ng/ml〕和NE〔(26.716±4.154)比(9.330±2.619)ng/ml〕及c-fos和c-myc蛋白质表达水平(4.110±0.803比2.113±0.559、3.357±0.849比1.975±0.508)明显升高(P<0.05);益气温阳活血方能够明显减少细胞蛋白质含量、心肌细胞体积、AD和NE含量,抑制c-fos和cmyc蛋白质表达水平,与正常组比较(11.825±3.768比11.220±2.862;1 052.684±187.432比1 090.009±169.542;4.066±1.170比3.782±0.854;10.940±2.238比9.330±2.619;2.479±0.658比2.113±0.559;2.011±0.664比1.975±0.508),均无显著性差异(P>0.05)。结论益气温阳活血方可防止心肌细胞肥大,其机制与抑制c-fos、c-myc表达有关。

益气温阳活血方含药血清对肥大心肌细胞β_3-肾上腺素能受体的影响研究

目的探讨益气温阳活血方含药血清对β3-肾上腺素能受体(β3-AR)的影响。方法通过血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)诱导肥大心肌细胞,以3H-亮氨酸掺入量检测心肌细胞蛋白质合成速率,酶联免疫吸附(ELISA)法检测细胞上清去甲肾上腺素(NE)、金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、金属基质蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、金属基质蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)含量,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及蛋白质印记法(Western blot)检测β3-AR m RNA及蛋白质表达水平。结果与正常组比较,模型组心肌细胞蛋白质合成速率、NE、MMP-2、MMP-9含量、β3-AR m RNA和蛋白质的表达水平明显升高(P<0.05),而TIMP-1、TIMP-2含量则明显降低(P<0.05);益气温阳活血方能够明显降低细胞蛋白质合成速率、NE、MMP-2、MMP-9含量,升高TIMP-1、TIMP-2含量,抑制β3-AR m RNA和蛋白质的表达,与正常组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气温阳活血方可抑制心肌细胞肥大,其机制与干预β3-AR表达有关。

益气温阳活血方对慢性心力衰竭大鼠心室重塑相关因子的影响

目的研究益气温阳活血方对慢性心力衰竭大鼠心室重塑相关因子的影响。方法通过异丙肾上腺素(ISO)诱导慢性心力衰竭动物模型。选择健康Wistar大鼠40只,随机分为正常组、模型组、卡维地洛组(西药组)、益气温阳活血方组(中药组);心脏超声检测心脏结构及功能,以酶联免疫吸附法检测去甲肾上腺素(NE)、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)、内皮素-1(ET-1)、一氧化氮(NO)、金属基质蛋白酶-2(MMP-2)、金属基质蛋白酶-9(MMP-9)、金属基质蛋白酶抑制物-1(TIMP-1)、金属基质蛋白酶抑制物-2(TIMP-2)含量。结果模型大鼠左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)明显升高,射血分数(EF%值)则明显降低;NE、AngⅡ、ET-1、MMP-2、MMP-9含量明显升高,而NO、TIMP-1、TIMP-2含量则明显降低,与正常组比较差异有统计学意义(P<0.05);益气温阳活血方可降低慢性心力衰竭大鼠NE、AngⅡ、ET-1、MMP-2、MMP-9含量及升高NO、TIMP-1、TIMP-2含量,提高EF%值、降低IVS及LVPW厚度,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),而与正常组及卡维地洛组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论益气温阳活血方可抑制心力衰竭大鼠相关心室重塑因子的水平,防止心室重塑。

益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽和Ⅲ型前胶原氨基端肽的影响

目的探讨益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠β3-肾上腺素能受体(β3-AR)、血清Ⅰ型前胶原羧基端肽(PⅠCP)和Ⅲ型前胶原氨基端肽(PⅢNP)的影响。方法通过异丙肾上腺素(ISO)诱导慢性心力衰竭动物模型。计算左、右心室心肌的心脏指数(LVMI、RVMI),应用酶联免疫吸附(ELISA)法检测血清PⅠCP和PⅢNP含量,以逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及Western印迹法检测β3-AR mRNA及蛋白质表达水平。结果与正常组比较,模型组LVMI〔(2.987±0.318 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(16.357±3.650 vs 12.843±3.124)pg/ml〕、PⅢNP〔(64.984±17.477 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.888±0.064 vs 0.743±0.086)与蛋白质(4.413±0.729vs 2.312±0.394)的表达水平明显升高(均P<0.05);益气温阳活血方能够明显降低慢性心力衰竭大鼠LVMI,减少PⅠCP和PⅢNP含量,抑制β3-AR mRNA与蛋白质表达水平的升高,与正常组比较〔(2.557±0.379 vs 2.350±0.468)mg/g〕、血清PⅠCP〔(13.111±2.758 vs 12.843±3.124)pg/ml〕和PⅢNP〔(25.967±9.659 vs 21.245±5.354)pg/ml〕含量及β3-AR mRNA(0.781±0.067 vs 0.743±0.086)与蛋白质(2.484±0.642 vs 2.312±0.394),均无显著性差异(P>0.05)。结论益气温阳活血方可能通过抑制β3-AR的表达减少PⅠCP和PⅢNP含量逆转心室重塑,改善心脏功能。

β3-肾上腺素能受体对心室重塑大鼠钙调磷酸神经酶信号通路的调节及益气温阳活血方的干预作用

目的探讨β3-肾上腺素能受体(β3-AR)对心室重塑大鼠钙调磷酸神经酶(CaN)信号通路的调节及益气温阳活血方的干预作用。方法通过异丙肾上腺素(ISO)诱导慢性心力衰竭动物模型。心脏超声检测心脏结构及功能,酶联免疫吸附法检测活化的T细胞核因子3(NFAT3)核蛋白活性,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法以及蛋白免疫印记法(Western-blot法)检测β3-AR、CaN、NFAT3mRNA及蛋白质表达水平。结果模型大鼠左室后壁厚度(LVPW)、室间隔厚度(IVS)明显升高,射血分数(EF%值)则明显降低,与正常组比较差异有统计学意义(均P<0.05);NFAT3核蛋白活性,β3-AR、CaN、NFAT3mRNA和蛋白质的表达水平明显升高,与正常组比较差异有统计学意义(均P<0.05)。益气温阳活血方可抑制慢性心力衰竭大鼠NFAT3核蛋白活性,β3-AR、CaN、NFAT3mRNA和蛋白质的表达水平,提高EF%值、降低IVS及LVPW厚度,与模型组比较差异有统计学意义(均P<0.05),而与正常组及卡维地洛治疗组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。结论益气温阳活血方可通过阻断慢性心力衰竭大鼠过分激活的β3-AR,抑制钙调磷酸神经酶信号通路逆转心室重塑。

椎-基底动脉扩张延长症MRI征象及影响后循环脑卒中的危险因素研究

目的对椎-基底动脉扩张延长症MRI征象及影响后循环脑卒中的危险因素进行相关分析。方法本次研究选取24例患者为对象,采取磁共振图像扫描检查测量患者椎-基底动脉最大内径,并且对患者基底动脉进行位置和高度评分,对比BA指标在椎-基底动脉血流淤滞以及后循环脑卒中间存在的关联性。结果24例椎-基底动脉扩张延长症患者当中,有12例患者椎-基底动脉因流速减慢在T1WI以及FLAIR图像表现为动脉亮血管征,阴性组和阳性组患者的BA位置、BA总评分以及BA内径之间的统计学意义存在意义(P<0.05)。在MRI检查中,后循环脑卒中阳性组和阴性组患者的BA位置、BA总评分以及BA内径之间的差异存在统计学意义(P<0.05)。结论椎-基底动脉扩张延长症患者的BA位置出现偏移极有可能和后循环脑卒中的发生情况相关。

益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠GATA4表达的影响

目的:探讨益气温阳活血方对慢性心力衰竭心室重塑大鼠转录因子GATA结合蛋白4(GATA4)的影响。方法:通过异丙肾上腺素诱导慢性心力衰竭动物模型。健康Wistar大鼠40只,随机分为4组:正常组、模型组、西药组(卡维地洛治疗组)、中药组(益气温阳活血方治疗组),每组10只;计算左、右心室质量指数,应用ELISA法检测心肌组织Ⅰ型和Ⅲ型胶原含量,计算Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值,以RT-PCR法以及Western Blot法检测GATA4 mRNA及蛋白质表达水平。结果:模型组左心室质量指数(LVMI)、Ⅰ型胶原含量、Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值及GATA4 mRNA与蛋白质的表达水平较正常组明显升高(P<0.05);中药组能够明显减少Ⅰ型胶原含量,降低Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值,抑制GATA4 mRNA与蛋白质的表达水平,与模型组比较差异有统计学意义(P<0.05),而与西药组比较差异无统计学意义。结论:益气温阳活血方通过抑制GATA4的表达减少Ⅰ型胶原含量,降低Ⅰ型/Ⅲ型胶原比值,逆转心室重塑,改善心脏功能。

四君子汤合真武汤加味对慢性心力衰竭患者ET、CGRP的影响

目的:观察四君子汤合真武汤加味对慢性心力衰竭患者的临床疗效及血浆内皮素(ET)、降钙素基因相关肽(CGRP)水平的影响。方法:将60例慢性收缩性心力衰竭患者随机分为对照组和治疗组,两组均给予利尿剂、强心剂、扩血管药、抑制心室重塑药等治疗。治疗组在西药治疗的基础上加服四君子汤合真武汤加味。7d为1个疗程,2组均连续治疗2个疗程。观察治疗前后两组患者心功能分级;治疗前后测定左室摄血分数(LVEF)、左室舒张末期内径(LVEDd)、每搏输出量(SV)和每分钟心排出量(CO)等心功能指标。结果:两组患者治疗后心功能均改善,治疗组LVEF、LVEDd、SV以及CO均明显优于对照组(P<0.05)。血浆ET含量均明显降低、CGRP含量明显升高(P<0.05),且治疗组更优于对照组,疗效优于对照组(P<0.05)。结论:四君子汤合真武汤加味能显著改善慢性收缩性心力衰竭患者心功能,提高活动耐量、降低ET、升高CGRP,值得推广应用。

益气温阳活血方含药血清对肥大心肌细胞儿茶酚胺、钙调神经磷酸酶的影响研究

目的:探讨益气温阳活血方含药血清对鼠肥大心肌细胞儿茶酚胺、钙调神经磷酸酶的影响。方法:30只Wistar大鼠分为中药组(益气温阳活血方灌胃)、卡维地洛组(卡维地洛灌胃)、空白血清组(蒸馏水灌胃)各10只,每日给药2次,共8周。末次灌胃后处死动物,分离血清,将血清经微孔滤膜灭活、滤菌后与DMEM培养基配成10%浓度。取新生乳鼠心室肌,用0.25%胰蛋白酶消化分离,经差速纯化2h,接种于10%血清DMEM培养液中,取上述细胞加入AngⅡ作用48h诱导心肌肥大后,分为正常组(正常心肌细胞加空白血清培养)、模型组(肥大心肌细胞加空白血清培养)、中药组(肥大心肌细胞加入益气温阳活血方含药血清培养)、西药组(肥大心肌细胞加卡维地洛含药血清培养)。检测各组心肌细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)、儿茶酚胺(CA)、内皮素-1(ET-1)一氧化氮(No)含量、活化的T细胞核因子3(NFAT3)核蛋白活性、CaN mRNA及蛋白质表达水平。结果:与正常组比较,模型组心肌细胞[Ca2+]i、CA、ET-1含量、CaN mRNA的表达水平以及NFAT3核蛋白活性明显升高,NO含量明显降低。结论:益气温阳活血方能够明显减少心肌细胞[Ca2+]i、CA、ET-1含量,升高NO含量,抑制CaN mRNA和蛋白质的表达水平及NFAT3核蛋白活性,其机制可能与经由CaN信号通路活化抑制交感神经兴奋有关。