内毒素耐受对共培养的中性粒细胞和单核细胞分泌TNF-α和IL-8的影响

目的观察脂多糖(lipopolysaccharides,LPS)诱导的耐受对共培养的中性粒细胞和人单核细胞株THP-1细胞表达抗炎因子肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和趋化因子白介素-8(Inter leukin-8,IL-8)水平的影响。方法采用1μg/m L牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)LPS或1μg/m L大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS分别刺激共培养的中性粒细胞和THP-1细胞24 h,洗脱后,再次刺激24 h,诱导细胞产生耐受。采用ELISA技术检测细胞条件培养液中TNF-α和IL-8表达水平的变化。结果 P.gingivalis LPS或E.coli LPS单次刺激后,共培养的中性粒细胞和THP-1细胞分泌TNF-α和IL-8的水平均较刺激前明显增高(P<0.05);P.gingivalis LPS和E.coli LPS重复刺激后,共培养的中性粒细胞和THP-1细胞分泌的TNF-α水平较单次刺激后明显降低(P<0.05),但IL-8水平较单次刺激后明显增高(P<0.05)。结论共培养的中性粒细胞和单核细胞产生的内毒素耐受可能抑制TNF-α表达,促进IL-8表达,进而可能影响牙周组织的炎症和免疫反应。

内毒素耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1、MMP-7及细胞迁移能力的影响

目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,P.gingivalis)脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的耐受对小鼠腹腔巨噬细胞分泌基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinase,MMP)-1和MMP-7的影响,以及耐受巨噬细胞对小鼠成纤维细胞L929迁移能力的影响。方法:采用1μg/mL P.gingivalis LPS重复刺激小鼠腹腔巨噬细胞,构建内毒素耐受模型,并以1μg/mL大肠杆菌(Escherichia coli,E.coli)LPS作为阳性对照。收集细胞条件培养液上清,采用ELISA技术检测MMP-1和MMP-7表达水平。观察耐受巨噬细胞条件培养液对L929细胞划痕创伤构建后细胞迁移能力的影响。结果:P. gingivalis LPS重复刺激后,巨噬细胞MMP-1分泌水平较单次刺激组降低(P <0.05),MMP-7分泌水平无明显变化(P> 0.05)。P. gingivalis LPS诱导的耐受巨噬细胞培养液上清刺激12、24 h后,L929细胞划痕修复面积大于单次刺激组培养液上清刺激后(P <0.05)。结论:P. gingivalis LPS诱导的耐受能抑制小鼠腹腔巨噬细胞分泌MMP-1,促进L929细胞迁移。