基于miR-21探讨针刺对PI3K/AKT信号通路脑缺血再灌注大鼠脑区星形胶质细胞影响

目的 观察电针对激活脑缺血再灌注(cerebralischemia reperfusion injury,CIRI)大鼠脑组织磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)/蛋白激酶B(AKT)信号通路和星形胶质细胞(astrocyte,AS)表达影响,进而调控神经发生过程,以及microRNA-21(miR-21)在此过程中的作用。方法 选取SD级别雌性大鼠18只,应用随机数字表法将其分成3组,即假手术组、模型组、电针组,每组6只。除假手术组外,其他两组采用Longa改良线栓法建立大鼠CIRI模型,评定造模成功后,电针组给予电针治疗,其他两组不做处理。采用动物神经功能评分(Longa评分)及神经行为学测试(Morris水迷宫实验)对各组大鼠进行评定。应用HE染色观察脑组织病理改变,免疫荧光法检测各组星形胶质细胞胶质纤维酸性蛋白(GFAP)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)表达情况,实时荧光定量反转录-聚合酶链反应(Real-time PCR,RT-PCR)法检测各组星形胶质细胞miR-21表达情况,蛋白免疫印迹(Western blot,WB)法检测各组星形胶质细胞胞内磷脂酰肌醇激酶(PI3K)、苏氨酸蛋白激酶(AKT)蛋白表达情况。结果 (1)Longa评分结果:治疗后电针组大鼠Longa评分降低,与假手术组比较,差异具有统计学意义(P<0.05)。(2)Morris水迷宫实验结果:与假手术组比较,模型组大鼠穿越逃生平台次数减少(P<0.05);治疗后电针组较模型组穿越逃生平台次数显著增加(P<0.05)。(3)脑组织病理切片结果:电针组大鼠脑组织损伤情况缓解最为显著。(4)免疫荧光检测结果:电针组较模型组星形胶质细胞数量增多(P<0.05),模型组较假手术组PPARγ阳性表达减弱(P<0.05),电针组较模型组PPARγ阳性表达增多(P<0.05)。(5)RT-PCR检测结果:与假手术组比较,模型组miR-21表达增多(P<0.05),电针组较模型组表达增多更为显著(P<0.05)。(6)WB检测结果:模型组PI3K、AKT蛋白表达较假手术组增多(P<0.05)。电针治疗干预后,与模型组相比,电针组PI3K、AKT蛋白表达增多更为显著(P<0.05)。结论电针治疗可上调PPARγ表达,活化miR-21激活PI3K/AKT信号通路表达,保护因脑缺血再灌注导致损伤的神经元,使其修复与再生,以降低脑缺血再灌注带来的不良影响。