一种新型重组抗体导向溶栓剂的体外溶栓研究

目的 :探讨一种新型重组融合基因抗体导向溶栓剂SZ5 1Hu scuPA的体外溶栓效力。方法 :通过转瓶扩大生产获得的大量基因重组融合蛋白SZ5 1Hu scuPA ,通过抗体竞争结合实验确定融合蛋白的抗体亲和力 ;进而与尿激酶进行不同浓度血小板血浆凝块体外溶栓比较。结果 :该融合蛋白体外纤溶活性为 390 0 0U mg ;其抗体亲和力是鼠源性单抗的 6 7% ;体外溶栓效力较uPA提高 4.1～ 8.4倍。结论 :体外溶栓结果证明 ,融合蛋白SZ5 1Hu scuPA既兼有与人活化血小板结合特性又有纤溶酶原激活剂特性的双功能分子 。

一种新型单克隆抗体导向血栓显像剂的基因工程制备

目的为简化抗血小板P 选择素鼠/人嵌合单克隆抗体SZ 51/Hu的99mTc标记过程 ,并提高其99mTc标记效率 ,利用金属硫蛋白(MT)可与金属稳定结合的特点 ,通过基因工程的手段制备融合蛋白SZ 51/Hu MT。方法构建了SZ 51/Hu与MT的重组表达载体 ,并在小鼠骨髓瘤细胞Sp2/0中进行了目的融合蛋白的表达。结果该融合蛋白在Sp2/0细胞中的表达量为3mg/L。对融合蛋白的各项性质分析表明 ,该融合蛋白的相对分子质量(Mr)为180000 ,且具有双向结合的特异性 :即一方面保持了SZ 51与活化血小板P 选择素的特异结合能力 ;另一方面又具有MT高效结合金属的特性。99mTc标记研究表明 ,该分子不需预处理即可被99m Tc直接标记 ,标记率可达79 %。结论获得具有双向结合特异性的融合蛋白SZ 51/Hu MT ,为研制新型血栓导向显像剂开辟了新途径。

重组SZ51Hu-scuPA融合蛋白的体外溶栓研究

目的 获得大量人源化抗人活化血小板单抗SZ5 1Hu和尿激酶原 (scuPA)融合蛋白SZ5 1Hu scuPA并测定该基因重组抗体导向溶栓剂的导向溶栓性。方法 通过转瓶扩大培养系统获得大量SZ5 1Hu scuPA ;通过抗体竞争结合实验证明融合蛋白的抗体亲和力 ;进而与尿激酶进行比较对不同浓度血小板血浆凝块的溶栓研究。结果 该融合蛋白在培养上清中的表达量为 5mg/ml;其纤溶活性为 390 0 0IU/mg ;抗体亲和力是鼠源性单抗的 6 7% ;体外溶栓效力较uPA提高 4 1～ 8 4倍。结论 该融合蛋白比uPA具有更高、更快的溶栓效率 。

SZ-51单链抗体与金属硫蛋白的融合基因构建及其在大肠杆菌中的表达

近年来，对活化血小板膜糖蛋白１４０（ＧＭＰ１４０）的单抗ＳＺ５１进行了系列基因工程抗体的研究，首先克隆出抗体的可变区基因［１］，从而获得了系列基因组抗体［２］，使鼠源性抗体对人体的免疫原性大大降低。我们利用金属硫蛋白（ＭＴ）的低相对分子质量（６０...