猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体的构建

本文旨在研究猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA在猪睾丸支持细胞(ST)中的干扰作用。利用PCR法从ST细胞基因组中扩增猪睾丸ACE启动子,构建重组质粒ACE-pIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,通过红色荧光蛋白表达和双荧光素酶报告基因检测试验检测猪睾丸ACE启动子在ST细胞中的转录活性;根据SPAG6 mRNA靶序列设计合成3条siRNA序列,通过脂质体转染至ST细胞,利用实时荧光定量PCR及Western Blot检测siRNA的干扰效率;基于人miR-30a结构设计SPAG6 shRNA,构建重组载体ACE-sh-SPAG6-pcDNA3.1,Western Blot检测其对SPAG6的干扰效果。结果表明,成功构建重组质粒ACEpIRES2-DsRed、ACE-pGL3-basic,并证明猪睾丸ACE启动子在ST细胞中具有较强的转录活性;各试验组均能对靶基因SPAG6 mRNA的表达产生抑制作用,以siRNA-3的作用最佳。siRNA-3转染48 h后,SPAG6蛋白表达量显著下降(P<0.001),成功筛选出SPAG6基因的最佳干扰序列;成功构建重组质粒ACE-shSPAG6-pcDNA3.1,转染ST细胞48h后SPAG6蛋白表达量较阴性对照组显著下调(P<0.001)。本研究成功构建了猪睾丸ACE启动子驱动的SPAG6 shRNA真核表达载体,并在ST细胞中验证了其具有较好的干扰效果。

靶向猪睾丸支持细胞PPP1CC基因siRNA的筛选与研究

本实验在验证PPP1CC基因在猪睾丸支持细胞ST内源性表达的基础上,针对PPP1CC mRNA靶序列设计并化学合成3段不同的siRNA序列,脂质体瞬时转染ST细胞,通过实时荧光定量PCR及Western blot检测siRNA对ST细胞中PPP1CC的干扰效率。结果显示,转染24 h后,各实验组中PPP1CC mRNA表达量均显著低于阴性对照组,其中siRNA-1效果最佳。siRNA-1转染72 h后,PPP1CC蛋白表达量显著下降。本实验成功筛选出PPP1CC基因的有效干扰序列,为后续研究提供实验依据。

浅谈纯电动集装箱船舶箱式电源充换电火灾防控

2022年9月27日,工业和信息化部、国家发展和改革委员会、财政部、生态环境部、交通运输部联合发布《关于加快内河船舶绿色智能发展的实施意见》,明确提出“要加快发展电池动力船舶”,中国航运业开始向低碳化转型。在国家和地方政府产业扶持力度下,以货船为试点,相关企业加快产业布局,开展标准化箱式电源换电技术研究与应用,积极拓展和配套完善标准化箱式电源换电业务,保障电动船舶航线运营的稳定性。笔者结合工作实际,分析港口集装箱式电源“移动式”换电火灾风险,并从消防技术标准、技术防范以及消防管理层面对集装箱式电源“移动式”换电火灾防控进行讨论。

并行模糊测试综述

软件脆弱性已成为互联网安全的主要威胁来源,软件脆弱性分析技术的重要性日益突出。模糊测试是脆弱性分析的热点技术之一,通过持续生成测试用例、动态监控目标代码执行和反馈调节变异策略的方法尝试触发程序异常,具有部署便捷、适用性广和效果直观的优点。随着测试目标的复杂性增加,从业人员对模糊测试的效率提出了更高的要求。并行模糊测试通过并行执行、任务分解和共享信息等方法提高脆弱性分析的效率。首先,分析了基于覆盖反馈的模糊测试面临的主要挑战;之后,探讨了并行模糊测试的解决思路和方案,从系统结构、任务划分、语料库共享和崩溃去重等方面对并行模糊测试进行了综述;最后,总结了现有并行模糊测试的优缺点,并对未来发展方向进行了展望。

胚胎干细胞在动物育种中的应用

胚胎干细胞(Embryonic stem cells,ESCs)是一类具有无限增殖、自我更新和多向分化潜能的细胞。ESCs广泛应用于转基因动物生产、人类疾病模型构建、濒危物种保护、人体器官移植及细胞分化等方面的研究。ESCs结合基因编辑技术生产大型动物模型在生物医学领域中得到了广泛应用,在动物育种方面不仅改善了动物生产特性和抗病能力,还可生产出具有更高价值和更高品质的产品,展现出良好的社会价值和应用前景。本研究对ESCs的研究现状、动物育种中的应用及前景作简要综述。

元朗丁屋发展特征及其问题

对香港元朗区的房屋发展进行分析,通过研究元朗区部分村庄近30年(1989年—2018年)的不同类型住宅的变化规律,发现丁屋是以村屋为中心进行扩散的蔓延式发展,这种模式浪费了大量的土地也饱受人们的质疑。基于这种现状,对“丁屋政策”的研究提供了新方向。

道教文化公园线性景观规划设计思路与实践

从景观结构、建筑形式、植物种植、景观设施等四个方面,将道教养生文化有机融入景观规划设计中,以塑造文化意向凸显、自然生态的线性景观,探索生态景观与养生旅游协调发展的新模式。

乡村生态体验旅游的营销策略分析——安徽省庐江县汤池镇为例

乡村旅游是近几年来我国农村经济发展的重要课题,同时也得到了国家各项政策的支持,倡导全国开展农村旅游示范活动。安徽省庐江县汤池镇也在良好的政策体制下发展乡村生态旅游,带动了当地的经济发展,但是其在不断的发展过程中遭遇到了瓶颈。因此笔者通过对汤池镇的生态旅游发展情况进行分析,对其在营销过程中存在的问题进行探讨,然后提出汤池镇发展生态旅游的营销对策,以期能够对汤池镇生态体验旅游的发展有一定借鉴和帮助。