拟南芥抗旱相关基因的表达载体构建及转基因植株鉴定

文章以拟南芥Col-0植株的基因组DNA和cDNA为模板扩增出LWT2基因全长和CDS片段,用pEASY-Blunt Zero Cloning Kit试剂盒连接至中间载体,转化到Trans1-T1感受态细胞内,通过单克隆挑选、菌落聚合酶链式反应(polymerase chain reaction,PCR)鉴定及质粒测序验证获得DNA阳性克隆。利用限制性内切酶双酶切获得含有黏性末端的目的片段和载体片段,进行DNA连接反应可得最终的互补和过表达构建。提取质粒DNA测序确认后将2个构建分别转化至农杆菌菌株GV3101,菌落PCR鉴定后通过浸花转化法转化拟南芥lwt2-1突变体植株,最后通过转基因筛选与遗传鉴定获得相应构建的转基因阳性植株。

公安院校要积极适应改革与发展的主旋律

当今世界是知识经济和信息技术高速发展的时代。历史反复验证，社会的发展离不开科学技术的进步，任何一项事业的繁荣也离不开教育的促进。在新的历史条件下，形势的发展不仅给公安工作带来了新的挑战，也给公安教育提出了新的要求，改革和发展公安教育是大势所趋，人心所向，势在必行。作为公安教育的重要阵地，公安院校已经成为科教强警的生力军，振兴公安教育，推动公安事业发展是广大公安教育工作者义不容辞的责任。因此，公安教育工作者必须站在讲政治的高度，充分认识改革与发展公安教育的极端重要性，深刻理解公安教育在公安工作和队伍建设中的地位和作用，进一步增强大局意识、服务意识和责任意识，正视过去，立足现在，展望未来，以饱满的工作热情，崭新的工作姿态，优异的工作成绩，把充满生机与活力的公安教育推向新世纪。 一、改革和发展公安教育是形势发展的需要，公安院校必须增强大局意识，紧扣教育发展主题 教育是知识创新、传播和应用的主要阵地，也是培养创新精神和创新人才的重要摇篮。建国以来特别是改革开放以来，我国的教育事业发展取得了令人瞩目的巨大成就。但面对形势的变化和新时期的要求，我们国家在教育观念、教育体制、教育结构、教育内容、教学方法和人才培养模式等方面...

公安院校应加强对学生价值取向的引导

价值取向是人们对社会生活的认识态度,也是人生追求的精神动力,它对人生的影响颇大,正确的价值取向可激人奋进,增强对生活的无限热爱;错误的价值取向则使人碌碌无为,低迷不振,削弱奋发进取的劲头。当代公安院校的大学生是我国公安事业跨世纪的一代,是公安队伍建设的后备力量,是公安工作的希望与未来。公安机关的性质和任务决定了公安院校的学生必须树立正确的人生价值取向。然而,随着改革开放的不断深入,市场经济体制的建立和社会利益分配的进一步调整,公安院校学生的价值取向也悄然地发生一些变化。 首先应当肯定。

以长霞精神育一代新警——河南公安高专学习任长霞活动的探索与实践

时代楷模、公安局长的好榜样任长霞是河南公安高等专科学校83届毕业生，也是该校优秀毕业生中的杰出代表。任长霞同志因公殉职后，该校充分利用这一政治优势和文化资源，坚持把学长霞活动作为政治建校的主要内容，作为忠诚教育的主要内容，作为荣辱观教育的主要内容，深入持久地开展了一系列学长霞活动，有力地促进了学校思想政治工作的开展，开辟了育人成才的新天地，为学校的建设与发展提供了强大的精神动力。

河南公安高专:用文化锻铸警魂

优美的诗韵,动人的乐曲,诗与歌完美结合,让人听得如痴如醉、心旷神怡,河南公安高等专科学校校园广播站《每周一诗一歌》栏目为学校校园文化建设奉上了一片新绿。多年来,该校在校园文化建设上,注重在广度和深度上下功夫,积极拓展校园文化的活动空间。

木薯SR家族基因的克隆和亚细胞定位

木薯(Manihot esculenta Crantz)是热带地区重要的粮食和能源植物,关于木薯的分子生物学研究对栽培品种的遗传改良和性状优化具有积极的理论指导意义。本研究以木薯基因组数据库为基础,Gateway誖技术为主要手段,克隆了木薯剪接因子SR蛋白(MeSRs)家族18个成员,进行生物信息学分析和亚细胞定位。通过氨基酸序列同源性分析将其分为6类;蛋白理化性质分析表明,由于富含带正电荷的Arg残基,SR蛋白均为亲水的碱性蛋白。通过在烟草叶表皮细胞中表达GFP融合蛋白,发现全部18个基因都具有位于细胞核中的荧光信号,表明木薯SR蛋白是核定位蛋白。本研究为后续深入探究木薯剪接因子SR蛋白家族基因功能及选择性剪接的调节机制提供科学帮助。

木薯MeSR34a的表达分析和植物表达载体的构建

富含丝氨酸和精氨酸的SR蛋白(serine/arginine-rich proteins, SR)是一类重要的剪接因子,其在植物响应非生物胁迫过程中具有重要作用。MeSR34a是木薯SR蛋白家族成员之一。为了解析MeSR34a的功能,首先对MeSR34a进行生物信息学分析,并通过实时荧光定量PCR (qRT-PCR)分析了MeSR34a在木薯不同组织部位和胁迫处理后的表达水平。最后,从木薯中克隆MeSR34a基因,构建植物表达载体。生物信息学分析结果表明MeSR34a基因全长为768 bp,编码255个氨基酸,蛋白大小大约为29 kD,等电点pI为10.45,含有11个外显子和10个内含子,是亲核的碱性蛋白。MeSR34a蛋白包含RRM结构域和RS结构域,与拟南芥MeSR34a的亲缘关系最近。荧光定量PCR结果发现,MeSR34a在木薯根中表达水平最高。在山梨醇(Sorbitol)、脱水(Dehydration)、脱落酸(ABA)和氯化钠(NaCl)处理条件下,MeSR34a的表达水平显著上调或下调,这些结果表明MeSR34a参与调控木薯响应非生物胁迫。本研究有助于后续深入研究MeSR34a在非生物胁迫中的功能。

木薯MeRSZ21a的克隆、生物信息学分析和表达模式分析

在非生物胁迫过程中,植物中SR蛋白(serine/arginine-rich proteins, SR)发挥着重要作用。本研究利用生物信息学分析方法,对木薯MeRSZ21a基因结构、理化性质、结构域、保守基序、系统进化等方面进行了分析,并分析MeRSZ21a在各组织中的表达,以及胁迫后其剪接模式和表达水平。我们之前的研究表明,木薯MeRSZ21a是SR蛋白家族中RSZ亚家族的成员之一。本研究结果表明MeRSZ21a基因全长为2 263 bp,编码160个氨基酸,蛋白大小为18 kD,属于亲水性碱基蛋白。MeRSZ21a含有RRM和zf-CCHC结构域,与野生大豆亲缘关系最近。在3个木薯品种‘W14’、‘Arg7’和‘Ku50’各组织中,MeRSZ21a在发育前期组织中表达量较低,在成熟的侧芽与叶组织器官中表达量较高。胁迫处理后,MeRSZ21a的转录本及表达量发生较大变化,其中叶片中转录本数均上升,并且对木薯进行不同温度(42℃,-3℃)胁迫处理后,根和叶中MeRSZ21a的表达水平显著性上调,表明在响应胁迫过程中,MeRSZ21a发挥着重要作用。这有助于进一步探索木薯MeRSZ21a在植物响应非生物胁迫中的功能。