lncRNA SNHG1调控铁死亡减轻HIV-1 gp120 V3环所致小胶质细胞炎症的分子机制研究

目的:探究长链非编码RNA(lncRNA)SNHG1调控铁死亡改善HIV-1 gp120 V3环致CHME-5人源小胶质细胞炎症的分子机制。方法:体外培养CHME-5人源小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120V3环组(HIV-1 gp120组)、HIV-1 gp120+shCon组、HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组、HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+ferrostatin-1(Fer-1;铁死亡抑制剂)组和HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527(Sirt1抑制剂)组。随机肽段和gp120 V3环分别处理正常CHME-5细胞24 h;抑制剂预处理SNHG1 sh2细胞2 h后,gp120 V3环处理24 h。ELISA法检测细胞上清中炎症因子水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白[溶质载体家族7成员11(SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)]、Sirt1和p53蛋白表达水平;酶标仪检测细胞内亚铁离子(Fe^(2+))和丙二醛(MDA)含量。结果:(1)ELISA结果显示:较空白组,HIV-1 gp120组炎症因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素6(IL-6)和IL-1β表达水平显著提高(P<0.05);较HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组炎症因子表达水平显著降低(P<0.05);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组炎症因子表达水平显著降低(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组炎症因子表达水平显著升高(P<0.01)。(2)Western blot结果显示:较空白组,HIV-1 gp120组铁死亡相关蛋白SLC7A11和GPX4表达水平显著下调(P<0.01);较HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组SLC7A11和GPX4表达水平显著上调(P<0.01);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组SLC7A11和GPX4表达水平明显上调(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组SLC7A11和GPX4表达水平显著下调(P<0.01),p53表达水平显著上调(P<0.05)。(3)较空白组,HIV-1 gp120组Fe^(2+)和MDA含量显著提高(P<0.05);较HIV-1 HIV-1 gp120组,HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组Fe^(2+)和MDA含量显著降低(P<0.01);较HIV-1 gp120+SNHG1 sh2组,HIV-1gp120+SNHG1 sh2+Fer-1组Fe^(2+)和MDA含量显著降低(P<0.05),HIV-1 gp120+SNHG1 sh2+EX527组Fe^(2+)和MDA含量显著提高(P<0.05)。结论:敲减SNHG1可减轻HIV-1 gp120 V3环介导的小胶质细胞炎症反应,其机制可能是通过Sirt1/p53信号通路调控铁死亡相关信号分子实现的。

脑白质高信号与阿尔茨海默病认知障碍的相关性研究

目的 采用定量化软件计算各部位脑白质高信号(WMH)体积,并分析其与认知功能的关系。方法选取2019年1月至2022年12月于深圳市第二人民医院住院的阿尔茨海默病(AD)患者65例、轻度认知障碍(MCI)患者67例、认知正常者(NC) 65例。所有参与者均已完善认知量表评估。通过ITK-SNAP软件分别标注并计算深部皮质下白质高信号(DWMH)、脑室旁白质高信号(PVWMH)和总脑白质高信号WMH体积,比较不同程度认知障碍患者间的各部位WMH体积的差异,通过Spearman偏相关性分析评估各WMH体积与认知评分及不同认知域之间的关系。结果 AD组、MCI组和NC组的DWMH、PVWMH和总WMH体积存在显著差异,AD组的各部位WMH体积最大,健康对照组的各部位WMH体积最小。两两组间比较还发现,在PVWMH和总WMH体积上,各组间比较差异均有统计学意义(P <0.05)。调整年龄、受教育年限、脑血管病、高血压及糖尿病等混杂因素后,各WMH体积与认知评分呈负相关,其中PVWMH及总WMH体积与认知评分的相关性更强。在单个认知域方面,DWMH、PVWMH和总WMH体积均与定向力、延迟回忆和注意力呈负相关,其中与定向力的相关性最强(r=-0.287、-0.305、-0.312),此外PVWMH和总WMH体积还与计算力障碍相关(r=-0.281、-0.254)。结论 各部位WMH体积与认知障碍密切相关,认知损害越重,WMH体积越大;与DWMH体积相比,PVWMH和总WMH体积与认知功能的相关性更强。DWMH、PVWMH和总WMH体积均与定向力、延迟回忆和注意力障碍密切相关。

阿尔茨海默病神经炎症相关药物治疗研究进展

探讨AD神经炎症的分子机制和病理生理学特征,总结当前针对AD神经炎症的药物治疗研究的最新进展,包括神经胶质细胞抑制剂(如非甾体抗炎药、糖皮质激素等)、炎症介质抑制剂(如单抗类、TNF-α抑制剂等)、抗炎siRNA治疗、抗炎中药等,对比了上述药物在AD治疗中的临床疗效,并讨论了它们的作用机制和不良反应,为未来的研究和临床实践提供了有价值的参考。

铁死亡在HIV-1 gp120 V3环致小胶质细胞炎症中的作用机制研究

目的:探讨人类免疫缺陷病毒1型(human immunodeficiency virus type 1,HIV-1)gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症反应与铁死亡的关系,并观察p53和铁死亡对该炎症反应的影响及可能机制。方法:体外培养人源CHME-5小胶质细胞,设立空白组、随机肽段组、HIV-1 gp120 V3环组、HIV-1 gp120 V3环+ferrostatin-1(Fer-1;铁死亡抑制剂)组和HIV-1 gp120 V3环+pifithrin-α(p53抑制剂)组。分别采用HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)和随机肽段(终浓度2 mg/L)处理CHME-5细胞24 h;Fer-1(终浓度20μmol/L)和pifithrin-α(终浓度10μmol/L)预处理CHME-5细胞2 h,HIV-1 gp120 V3环(终浓度2 mg/L)再处理24 h。ELISA法检测各组细胞上清液中炎症因子水平;Western blot法检测铁死亡相关蛋白[转铁蛋白受体1(transferrin receptor-1,TFR-1)、溶质载体家族7成员11(solute carrier family 7 member 11,SLC7A11)和谷胱甘肽过氧化物酶4(glutathione peroxidase 4,GPX4)]及p53的蛋白表达;酶标仪法检测细胞内亚铁离子(Fe2+)和谷胱甘肽过氧化物酶(glutathione peroxidase,GSH-Px)活性。结果:(1)ELISA结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组炎症因子白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)水平显著升高(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组炎症因子IL-1β、IL-6和TNF-α水平显著下降(P<0.01);(2)Western blot结果显示,与对照组相比,gp120 V3环组蛋白p53显著上调(P<0.01),铁死亡相关蛋白TFR-1显著上调(P<0.01),SLC7A11和GPX4显著下调(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+pifithrin-α组铁死亡相关蛋白TFR-1显著下降(P<0.05),SLC7A11和GPX4蛋白显著升高(P<0.05);(3)与对照组相比,gp120 V3环组Fe2+含量显著增加(P<0.01),GSH-Px活性显著降低(P<0.01);与gp120 V3环组相比,gp120 V3环+Fer-1组和gp120 V3环+pifithrin-α组Fe2+含量显著下降(P<0.05),GSH-Px活性显著升高(P<0.01)。结论:HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症中存在铁死亡,且抑制铁死亡能减轻炎症。HIV-1 gp120 V3环致CHME-5小胶质细胞炎症与p53蛋白调控铁死亡有关,抑制p53可减轻铁死亡和炎症反应。

柯萨奇病毒B3型3D蛋白抗体的制备

肠道病毒3D蛋白是其RNA聚合酶。柯萨奇病毒B3型(coxsackievirus B3,CVB3)主要感染心脏,其3D蛋白在心肌表达中的时序和分布尚不清楚。本研究将通过聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)获得的CVB 3D片段插入pET28a(+)的表达框,获得pET28a(+)-3D重组质粒。异丙基β-D-硫代半乳糖苷(isopropylβ-D-1-thiogalactopyranoside,IPTG)诱导pET28a(+)-3D表达3D-His蛋白,十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis,SDS-PAGE)后,切胶,获得3D-His蛋白。3D-His蛋白加佐剂免疫新西兰大白兔制备3D蛋白多克隆抗体,蛋白免疫印迹法检测抗体效价及特异性。结果显示,本研究获得了高效价且特异性好的抗CVB3 3D蛋白抗体,可用于CVB3 3D蛋白功能的后续研究。

川芎嗪对LPS致神经认知障碍的影响及功能影像学评价

目的:探讨中药单体川芎嗪对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导的神经认知障碍的影响及其功能影像学机制。方法:将36只SD大鼠随机分成空白对照组、假手术组、模型组(LPS组)、低剂量川芎嗪组、中剂量川芎嗪组和高剂量川芎嗪组,每组6只。模型组及低剂量、中剂量和高剂量川芎嗪组均行侧脑室注射LPS,每只150μg;假手术组侧脑室注射等量的脑脊液;空白对照组不做处理;低、中和高剂量川芎嗪组分别腹腔注射50 mg/kg、100 mg/kg和200 mg/kg的盐酸川芎嗪注射液。用Morris水迷宫实验观察LPS对神经认知障碍的影响;酶联免疫吸附测定(ELISA)法检测脑组织匀浆中白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;同时用影像学扫描IVIM D和IVIM D*功能序列,测定LPS致神经认知障碍的影像学纯水分子的扩散运动成分和血流灌注相关的扩散运动。结果:Morris水迷宫大鼠空间学习和记忆结果显示:与对照组比,模型组的逃避潜伏期延长,平台周边穿梭次数减少,目标象限停留时间缩短(P<0.05);与模型组相比,低剂量川芎嗪组逃避潜伏期缩短,平台周边穿梭次数增加,目标象限停留时间延长(P<0.05),中、高剂量川芎嗪组无显著差异。ELISA结果显示:与对照组比,模型组皮层和海马区的IL-1β和TNF-α均增加(P<0.05);与模型组比,低剂量组皮层和海马区IL-1β和TNF-α均降低(P<0.05),中、高剂量组无显著差异。影像结果显示:与对照组比,模型组皮层和海马的IVIM D、IVIM D*和f值均降低(P<0.05);与模型组比,低剂量组皮层和海马的IVIM D、IVIM D*和f值均升高(P<0.05),中、高剂量组IVIM D、IVIM D*和f值无显著差异。结论:川芎嗪具有减轻LPS所致大鼠神经认知障碍的作用,其机制可能与川芎嗪通过促进脑中水分子扩散运动和脑血流灌注而抑制炎症反应有关。

挖掘生活化内容 优化课堂教学设计

挖掘生活中的素材,让数学课堂贴近学生生活,使学生发现数学就在身边。教学内容要用生活中的实例呈现,提高数学课堂的趣味性和可操作性,培养学生学数学、爱数学的情感,激发学生学习数学的积极性。

p62/NF-κB通路调控HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症的机制研究

目的:探讨自噬关键蛋白p62在HIV-1 gp120 V3环所致小鼠神经炎症中的作用及相关信号分子机制。方法:野生型C57BL6小鼠随机分成4组:空白组、假手术组(人工脑脊液组)、模型组(gp120 V3环组)及gp120 V3环+NF-κB活化阻滞剂BAY 11-7082组,每组12只。用Morris水迷宫检测小鼠学习记忆能力;免疫荧光染色检测海马和皮层Iba-1表达水平;ELISA法检测海马和皮层炎症因子的表达水平;Western blot检测海马和皮层相关蛋白表达水平。结果:(1)Morris水迷宫结果显示,与空白组相比,模型组小鼠逃避潜伏期显著延长(P<0.01),平台区域停留时间及穿越平台次数显著减少(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组小鼠逃避潜伏期显著缩短(P<0.01),平台区域停留时间及穿越平台次数显著增加(P<0.05)。(2)免疫荧光染色结果显示,与空白组相比,模型组海马和皮层Iba-1荧光强度显著增强(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组海马和皮层Iba-1荧光强度显著降低(P<0.05)。(3)ELISA结果显示,与空白组相比,模型组IL-1β、TNF-α和IL-6水平均显著上调(P<0.05);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组IL-1β、TNF-α和IL-6水平显著下调(P<0.05)。(4)Western blot结果显示,与空白组相比,模型组p62蛋白表达水平显著上调(P<0.01),p-p65/p65及p-IκB/IκB比值均显著升高(P<0.01);与模型组相比,gp120 V3环+BAY 11-7082组p62蛋白显著下调(P<0.05),p-p65/p65及p-IκB/IκB比值均显著下降(分别P<0.01和P<0.05)。结论:HIV-1 gp120 V3环所致小鼠学习记忆功能障碍的机制可能与通过激活p62/NF-κB信号通路引起神经炎症有关,p62-NF-κB正反馈环的抑制可能会减轻神经炎症。

地方图书馆立法述论

1 引言立法,是一个十分严肃和理性的课题,同时也是一个热门话题。改革开放20多年来,立法之'行云'摇曳于经济领域上空,飘飘洒洒滋润着国家经济建设并伴随其发展壮大。据不完全统计,目前我国立法中,直接或间接用于规范协调经济活动的法律、法规占51%,初步形成了一个较为完善的体系。对图书馆而言。

职业需求导向课程改革的研究与实践

当前，国家正以前所未有的力度大力发展职业教育，职业教育又一次迎来重大发展机遇。课程改革是当前职业教育改革的热点问题，也是关乎职业学校发展的核心问题，对其进行研究和实践探索具有重大的理论和现实意义。本文拟以株洲市生物工程中专学校课程改革为例，探讨新时期中职学校课程改革的有效途径。

物理知识在住房装修中的运用

随着生活水平的不断提高，人们对于居住环境的要求越来越高．对新房的装修程度越来越高。在新房装修中涉及很多物理知识．我对这些知识做一些梳理。同学们在学习中除了学习物理知识外。同时还应注重物理知识在生活中的广泛应用，体现“从生活走向物理，从物理走向社会”的新课程理念。

浅谈小学数学生活化应用题的设计

新课标要求数学教学要促进学生全面、持续、和谐的发展,应用题的教学是解决问题的根本形式,应该贯穿在教学过程中,不再以单独知识章节的形式出现.在教学中巧妙设计应用题,把数学与学生的知识水平和生活背景有机结合起来,能有效激发学生学习数学、解决实际困难的兴趣,更好培养学生逻辑思维能力和创新精神,提高学生综合实践能力.

中国农村图书馆建设“的”与“矢”探研

我国是一个农业大国,农村人口占全国人口的百分之八十以上。可以毫不夸张地讲,中国农民的素质,就是中华民族的素质。因此,党中央发出的《关于深入开展农村社会主义精神文明建设活动的若干意见》中,明确提出了建设农村社会主义精神文明的具体目标和要求。作为图书馆工作者。

人乳头瘤病毒16型E7蛋白的表达、纯化及抗血清制备

目的建立人乳头瘤病毒(human papillomavims,HPV)16型E7蛋白的原核表达系统,表达HPv16E7蛋白,制备小鼠抗HPV16E7血清。方法采用PCR方法扩增HPV16E7基因,构建人pET21b质粒,重组表达载体经鉴定后转化大肠埃希菌BL21(DE3)。诱导表达后经十二烷基硫酸钠(sodium dodecyl sulphate,SDS)-聚丙烯酰胺凝胶电泳(polyacrylamide gel electrophoresis,PAGE)和westemblot鉴定表达产物。提取包涵体进行变性复性处理后纯化,纯化后的可溶性蛋白免疫Balb/C小鼠,检测小鼠体内γ-干扰素(interferon-γ,IFN-γ)水平、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化。结果PcR扩增片段为0.3Kb,酶切和序列测定证实重组质粒构建正确。SDS—PAGE在11KD处出现蛋白条带。蛋白表达以包涵体为主。免疫后小鼠抗体效价升高,CD4/CD8比值无升高,IFN-γ无反应。结论成功制备可溶性HPV16E7蛋白和小鼠抗HPvl6E7高效价抗血清。

人乳头瘤病毒16型E4蛋白表达、纯化及抗血清制备

目的 表达人乳头瘤病毒16型（HPV16） E4蛋白,并制备小鼠抗HPV16 E4血清.方法 将HPV16 E4基因克隆入pQE30,重组质粒pQE30-HPV 16E4经鉴定后转化大肠埃希菌M15（PREP4）,诱导表达并鉴定表达产物.因纯化、变性和复性方法,制备可溶性HPV16 E4蛋白.免疫Bal B/C小鼠制备抗血清,检测小鼠IFN-γ水平、CD4/CD8比值和抗血清滴度变化.结果 酶切和测序结果表明pQE30-HPV16F4构建成功.表达分子相对分子量（Mr）为10 000,Western blot法证明具有较高特异性.小鼠抗血清效价升高,CD4/CD8无升高,小鼠γ干扰素（IFN-γ）无升高.结论 成功制备可溶性HPV16 E4蛋白和小鼠抗HPV16 E4高效价的抗血清.

基于核心素养的初中物理规律教学课堂观察实践初探

现代教育是为未来社会发展培养现代公民。在进行教育实践的过程中,培养面向未来的人所需的终身发展的能力与品格——核心素养。初中物理规律教学是初中阶段物理教学的重要组成部分,搞好规律课教学对培养学生的物理学科核心素养起着举足轻重的作用。我们通过研制规律课堂观察量表,对我区的初中物理规律课进行有效诊断,提练规律教学课教学设计策略,优化教师在规律课教学中提升学生的物理核心素养的有效途径,让学生核心素养在规律课教学中落地生根。

肠道病毒受体的研究进展

肠道病毒包括脊髓灰质炎病毒、柯萨奇病毒和肠道病毒71型等类型,可引起多种严重的肠道外疾病。鉴于肠道病毒感染的巨大危害性,肠道病毒研究,尤其肠道病毒受体研究也受到关注。近年来,肠道病毒的经典受体的新功能和新受体不断被发现,应用重组肠道病毒受体分子预防和治疗肠道病毒感染也取得了一定的进展,现就肠道病毒受体分子的结构、功能、机制及应用等方面进行综述。