自噬在结核分枝杆菌感染免疫应答作用的研究进展

结核分枝杆菌(MTB)是结核病致病病原体,长期协同进化使得MTB制定出专门针对人类宿主免疫系统的逃逸机制。自噬作为细胞内环境稳定机制,广泛地参与宿主对抗MTB的固有免疫及适应性免疫效应等。本综述主要总结了自噬-免疫网络相交的细节过程:传递固有免疫受体信号、协同细胞因子发挥作用、调节免疫相关GTP酶,增强抗原提呈及参与T细胞的稳态调控等交叉信号通路。关于自噬-抗MTB多条免疫通路分子水平的深入研究,将为以自噬为基础的新型治疗带来新的策略。

miR-210过表达载体的构建及Northern鉴定

①目的构建miR-210的过表达载体,为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。②方法首先设计并合成miR-210前体序列的PCR引物,以HEK293细胞的基因组为模板,PCR扩增包含有miR-210前体的序列,大小为440bp;PCR产物经过EcoRI和BglⅡ酶切后,与线性化的pcDNA3.1(+)载体连接后,转化大肠杆菌,扩增、纯化获得所需质粒,以琼脂糖凝胶电泳、酶切鉴定以及基因测序鉴定其分子质量和插入片段的序列;构建的质粒转染HEK293细胞48小时后,提取小RNA,Northern blot检测miR-210的表达水平。③结果纯化质粒的相对分子质量为5.9kb,酶切鉴定结果符合目的条带(440bp)大小,插入的寡核苷酸序列NCBI Genbank提供序列完全相符,Northern Blot检测到的miR-210成熟体大小为21碱基大小。④结论成功构建了miR-210的过表达质粒pcDNA3.1(+)/pri-miR-210,为进一步研究miR-210的功能奠定良好的实验基础。

唐山市周边农村女性真菌感染影响因素调查

目的调查唐山市区周边农村妇女阴道真菌感染情况,并探讨真菌感染的影响因素。方法取妇女阴道分泌物,然后进行生理盐水涂片,镜下检查真菌。取样之后,针对卫生习惯、清洗外阴频率、是否处于妊娠期等问题进行问卷调查。结果本次检测人数共200例,总感染率47.50%。30～40岁年龄组感染率最高(67.75%)。不同清洗外阴频率者的真菌检出率差异有统计学意义(P<0.05),并且检出率随清洗频率增加而降低。妇女的文化程度与生殖道真菌的感染率无相关性(P>0.05)。妊娠期妇女的真菌检出率明显高于非妊娠期(P<0.05)。被调查的妇女中穿紧身内裤感染率明显高于其他三类(P<0.05),穿棉质内裤感染率明显偏低。有内衣与袜子同洗习惯者其真菌检出率明显高于分开洗的(P<0.05)。长期使用抗生素的被调查者检出率相对较高(P<0.05)。结论唐山市周边农村妇女真菌感染率较高,应引起医务人员及有关部门的重视。

中医药治疗慢性支气管炎临床与基础研究进展

慢性支气管炎（chronic bronchitis,CB）是一种常见的慢性非特异性呼吸系统疾病。其急性发作期在祖国医学中属＂咳嗽＂、＂胸痹＂、＂哮喘＂的范畴,证型以痰热郁肺型最常见,主要临床特征为反复发作的咳嗽、咳痰或伴有喘息。CB发病率高,病情反复,可并发阻塞性肺气肿,甚至肺动脉高压、

肠道厌氧菌失调加重流感病毒感染小鼠肺部免疫病理损伤

目的探讨肠道厌氧菌失调与流感病毒感染之间的关系,以及对小鼠肺部免疫细胞中炎性因子的影响。方法将36只BALB/c小鼠随机分为正常对照组、病毒对照组、甲硝唑组,每组12只。甲硝唑组小鼠用18 mg/m L甲硝唑灌胃8 d,造成小鼠肠道厌氧菌菌群失调;再予每只小鼠50μL/d FM1株流感病毒连续滴鼻4 d,建立厌氧菌失调小鼠感染流感病毒的动物模型。观察各组小鼠精神状态、肺指数、肺组织病理形态变化、盲肠及肠黏膜病理形态变化,ELISA测定小鼠肺组织匀浆中白细胞介素4(IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)、IL-10和IL-17含量的变化。结果甲硝唑能使该组小鼠肺指数明显升高,其肺组织及盲肠组织病理改变较病毒对照组小鼠而言,表现出更为严重的炎症损伤。FM1甲型流感病毒感染后,甲硝唑组小鼠肺组织匀浆中IFN-γ、IL-17水平与病毒对照组相比显著降低,IL-4、IL-10含量虽有升高,但差异无统计学意义。结论肠道厌氧菌失调可能通过调节小鼠肺部炎性因子的分泌,抑制其适应性免疫应答,影响FM1流感病毒在体内复制及清除的时间,从而进一步加重流感病毒引起的免疫病理损伤。

小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺中RLH信号通路的影响

【目的】研究小檗碱对甲型流感病毒FM1株感染小鼠肺组织中RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒作用的机制。【方法】以50μL流感病毒FM1株LD50滴鼻感染RIG-I-/-小鼠和正常野生型C57BL/6小鼠,建立小鼠流感模型,分别用小檗碱和奥司他韦治疗。观察小鼠的生存率以及肺组织炎症损伤状况;RT-q PCR和Western-blot检测正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。【结果】正常野生型C57BL/6小鼠小檗碱组的生存率为80%,与病毒组50%相比明显提高,其肺组织病变局限,炎症明显减轻。通过RT-q PCR和Western-blot检测到小檗碱可下调正常野生型C57BL/6小鼠RLH信号通路中RIG-I、NF-κB和MAVS的表达。与病毒组相比,RIG-I、NF-κB和MAVS的m RNA表达量分别降低42.28%、33.12%和48.12%,同时,它们的蛋白表达量分别降低17.37%、13.83%和28.91%。【结论】小檗碱对于FM1株引起的小鼠流感具有较好的治疗作用,可通过影响RLH信号传导通路的活化来发挥抗流感病毒作用。

益气化痰组方对慢性支气管炎模型小鼠的药理学作用研究

目的从药理学角度研究化痰组方对慢性支气管炎模型小鼠抗炎、化痰、平喘、镇咳及机体免疫力的影响,揭示中药作用机制。方法采用烟熏和SO2交替法造模,共计3周。48只小鼠分为模型组、益气化痰方低、中、高剂量组。治疗2周后,观察小鼠咳嗽潜伏期和咳嗽频率的变化;采用爬杆试验观察各组动物运动能力;酚红排痰实验测定痰液的分泌情况。结果造模3周后,与造模前相比,小鼠体重明显降低(P<0.05);小鼠咳嗽潜伏期明显缩短(P<0.05);咳嗽频数明显增加(P<0.05)。治疗2周后,中、高剂量组均能够有效延长小鼠咳嗽潜伏期时间和降低咳嗽频率(P<0.05),但低剂量药物无明显影响(P>0.05)。中、高剂量组均能增加痰液分泌(P<0.01),有明显祛痰作用。各治疗组均能明显延长小鼠爬杆时间(P<0.05)。结论烟熏和SO2交替法烟熏可使小鼠成功患慢性支气管炎。高、中剂量益气化痰组方具有镇咳、平喘、化痰作用;但高、中、低剂量均具备强心、提高机体免疫力和抗疲劳等作用。

改良益气化痰方的主要药理作用研究

目的探讨中药改良益气化痰方主要药理作用。方法对实验小鼠进行耐高温、耐低张缺氧实验观察,观察其对小鼠的抗疲劳及生存能力的作用。采用氨水致小鼠咳嗽方法,观察其对小鼠的镇咳作用。对小鼠尾静脉注入伊文思蓝,观察其对小鼠的化痰效果。结果改良益气化痰方对小鼠在高温、低氧等应激耐受性的效果显著(P(0.05),并可延长小鼠在高温、缺氧情况下的生存时间(P<0.05);改良益气化痰方能延长因氨水导致小鼠咳嗽的潜伏期,并减少小鼠的咳嗽次数(P<0.05);改良益气化痰方对小鼠毛细血管通透性呈现负值,表明改良益气化痰方的化痰效果良好(P<0.05)。结论改良益气化痰方具有明显的抗疲劳、增强机体抵抗力作用,提高应激能力以及耐缺氧能力,同时还具有镇咳化痰作用,因此适用于慢性呼吸道炎症的治疗。

益气化痰组方对小鼠机体功能的作用机制研究

目的探讨益气化痰方对小鼠机体功能状况的作用及其机制。方法 50只小鼠随机分为对照组,低、中、高剂量组、急支糖浆组,每组10只,采用对比法,对小鼠进行氨中毒实验,观察其对急性损伤的耐受力、耐高温(55-600C)、爬杆时间观察;采用烟熏致小鼠咳嗽,观察药物对小鼠镇咳作用;最后颈椎脱臼法处死,取小鼠胸腺与脾脏,称重并计算重量指数,观察药物对小鼠免疫力的影响。结果益气化痰方可明显提高小鼠耐急性损伤能力(P<0.05);益气化痰方可以使小鼠对高温的耐受性显著增强,并可延长小鼠在高温下的生存时间(P<0.05);益气化痰方能延长因氨水导致小鼠咳嗽潜伏期,并减少小鼠的咳嗽次数(P<0.05),具有明显的抗疲劳作用。高、中剂量组可提高小鼠的胸腺和脾脏指数(P<0.05)。结论益气化痰方有良好镇咳、平喘作用,同时具有抗疲劳、抗损伤、增强机体免疫力、提高应激能力作用。

基于方波溶出伏安法同时测定贝类中的痕量铅、镉

在pH=5.2的HAc-NaAc缓冲液中，运用方波溶出伏安法同时测定贝类样品中的铅、镉离子。通过优化方波伏安检测条件，得到该检测方法的最佳参数：方波频率25Hz，方波振幅25mV，扫描速度4mV，沉积电位-1.1V，沉积时间120s。铅、镉离子分别在电位-0.571V与-0.743V附近产生灵敏的方波伏安溶出峰，在1×10-8-4×10-6mol/L范围内铅、镉离子的溶出峰电流与其物质的量浓度呈良好的线性关系，检出限分别为0.267μg/L，0.374μg/L，相关系数分别为0.9975，0.9995。该方法具有成本低廉、灵巧轻便、检测迅速等优势，可广泛应用于贝类等海产品的检测。

改良益气化痰组方主要药理作用研究

①目的探讨改良益气化痰方主要药理作用。②方法对实验小鼠进行耐高温、抗低张缺氧实验观察。采用氨水熏致小鼠咳嗽的方法,观察其镇咳作用。采用小鼠尾静脉注入伊文氏蓝,观察药物对组织渗透力的影响。③结果对小鼠耐高温时间的影响由高到低分别是高剂量组>中剂量组>低剂量组>对照组,具备剂量依赖性(P<0.01),有明显统计学意义;与对照组比较,高剂量组抗低张缺氧时间明显延长(P<0.05),有统计学意义;但中、低剂量组与对照组比较(P>0.05),无统计学意义;该方能延长因氨水刺激导致小鼠咳嗽的潜伏期,并减少小鼠咳嗽次数(P<0.05);高剂量组明显提高组织渗透力,增加痰液排除的功效(P<0.05)。④结论改良益气化痰方具有镇咳、祛痰作用的同时,还具有抗疲劳、抗缺氧能力、增强机体抵抗力和提高应激反应的能力,因此适用于慢性呼吸道炎症的治疗。

血清视黄醇结合蛋白与β2-微球蛋白联合检测在肾脏疾病中的临床诊断价值

目的探讨血清视黄醇结合蛋白(serum retinol binding protein,sRBP)与β2微球蛋白(sβ2-MG)联合检测在肾脏疾病的临床诊断价值。方法检测162例肾脏病患者和100例正常体检者sRBP、尿素(Urea)、肌酐(Cr)、尿酸(UA)、sβ2-MG水平并作相关比较。结果162例肾脏病患者sRBP、Urea、Cr、UA、sβ2-MG检测值高于对照组(P<0.01);sRBP、sβ2-MG水平在不同肾脏病组患者组别与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.01);sRBP、Urea、Cr、UA、sβ2-MG的阳性率明显高于对照组(P<0.01);sRBP在各组的阳性率最高,与sβ2-MG联合检测的阳性检出率更高,ROC曲线下面积为0.89。结论血清视黄醇结合蛋白是肾脏病的敏感指标,联合sβ2-MG检测可以为肾脏病的临床诊断提供更可靠的理论依据。

暨南大学附属第一医院产检孕妇铁代谢水平的初步分析

目的 探讨暨南大学附属第一医院产检孕妇不同孕期、年龄段铁代谢相关指标血清铁(SI)、血清铁蛋白(SF)、转铁蛋白(TRF)、总铁结合力(TIBC)、可溶性转铁蛋白受体(sTfR)水平的改变。方法 检测30例健康非妊娠女性和128例不同孕期、不同年龄段妊娠妇女的血常规(RBC、Hb)和生化指标(SI、SF、TRF、TIBC、sTfR)并进行统计学分析。结果 除SI、sTfR外,妊娠妇女血清铁代谢指标(TRF、TIBC、SF)与正常对照组比较差异均有统计学意义(P <0.05),TIBC、SF较对照组降低,TRF较对照组升高。孕晚期TRF较孕中期高,差异有统计学意义(P <0.05)。20~27岁和28~35岁年龄段的铁代谢指标TRF、TIBC、SF与正常对照组比较,差异均有统计学意义(P <0.05)。TRF和TIBC两者相关性显著。结论 通过分析暨南大学附属第一医院产检的妊娠妇女的铁储备水平,发现年龄、孕期均与孕妇体内铁代谢水平密切相关,TRF、TIBC、SF可作为临床有一定指导意义的指标,为临床评估孕妇体内真实的铁储备水平及后续诊疗提供依据。

改良益气化痰方对急、慢性支气管损伤模型小鼠药理学作用研究

急、慢性支气管损伤为本虚标实,虚实夹杂,证型以气虚血瘀痰阻最常见。以气虚、气阴二虚、脾肾阳虚为主,标实则以痰、瘀、风、热为著。治疗要标本兼治,虚、痰、瘀等同调。

唐山市周边农村妇女阴道毛滴虫感染因素调查

以在唐山市某医院妇科体检的唐山市周边农村成年女性为调查对象,取被调查者阴道分泌物,然后进行生理盐水涂片,镜下检查阴道毛滴虫。共调查200人,阴道毛滴虫感染16人,感染率8.00%;30～岁年龄组被调查者感染率(22.22%),显著高于其他年龄组;有公共浴池盆浴经历者感染率(17.07%)高于使用淋浴者(5.66%)。清洁外阴频率不同者阴道毛滴虫感染率差异无统计学意义(P>0.05)。提示,应积极对居民尤其是农村居民开展健康教育,增强其自我保护意识,同时应积极治疗患者及带虫者。

桂枝麻黄各半汤对流感病毒FM1株感染小鼠RLH信号通路的影响

目的研究桂枝麻黄各半汤对甲型流感病毒FM1株感染小鼠RLH信号通路的影响,探讨其抗病毒的作用机制。方法将8周龄的SPF级C57BL/6小鼠和敲除基因的MAVS-I^(-/-)小鼠各60只,随机分为6组,即正常对照组、病毒对照组、奥司他韦(30 mg·kg^(-1))组、银翘散(11.2 g·kg^(-1))组、桂枝麻黄各半汤(9.4 g·kg^(-1))组、新加香薷饮(5.4 g·kg^(-1))组,饲养于寒环境。另取60只8周龄C57BL/6小鼠,分组同前,饲养于正常环境。采用流式细胞术检测小鼠脾脏免疫细胞Th1/Th2、Th17/Treg的比值;HE染色观察小鼠肺组织病理变化;RT-PCR法检测FM1、RIG-I、MAVS及NF-κB p65的m RNA表达;Western Blot法检测RIG-I、MAVS及NF-κB p65的蛋白表达。结果在正常环境中和寒环境中,桂枝麻黄各半汤均可明显减轻C57BL/6小鼠的肺部炎症,明显降低C57BL/6小鼠肺指数、FM1 m RNA表达水平以及肺组织的RIG-I、MAVS、NF-κB p65 m RNA及蛋白表达水平;寒环境中桂枝麻黄各半汤还可以降低MAVS^(-/-)小鼠的RIG-I m RNA及蛋白表达水平;桂枝麻黄各半汤等3种中药复方均可不同程度地调节Th1/Th2和Th17/Treg比值。结论桂枝麻黄各半汤对甲型流感FM1株感染的小鼠在正常环境及寒环境均有较好的治疗作用,可能通过下调RLH信号通路的关键因子发挥抗流感作用。