应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳技术分析健康猪唾液细菌结构及多样性

本试验旨在研究健康猪唾液细菌结构及多样性。试验采用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCR-DGGE)技术结合PCR-DGGE图谱及特异性条带的克隆和测序,同时采用主成分分析和聚类分析方法分析试验结果。结果表明:PCR-DGGE图谱中仔猪唾液细菌平均条带数为23条,而育肥猪为28条;育肥猪唾液细菌种群的多样性指数、均匀度和丰富度均较高,分别为3.34、0.877和28.40,而仔猪分别为3.17、0.834和23.20;聚类分析显示,虽然不同生长阶段猪唾液细菌群落具有一定差异性,但所有样品间相似性系数均高于0.66。PCR-DGGE图谱中共性条带属于发酵乳杆菌(Lactobacillus fermentum)、大肠杆菌(Escherichia coli)、Mycobacterium arosiense、厚壁菌(Firmicutes)和猪链球菌(Streptococcus suis),它们是猪口腔中的优势菌群;仔猪的特异性条带属于Neisseria dentiae和Neisseria shayeganii,而育肥猪的特异性条带主要是葡萄球菌亚种(Staphylococcus sp.)。结果提示,健康仔猪和育肥猪唾液细菌结构存在明显差异,随着猪的生长发育,唾液细菌多样性增加且趋于稳定。