人tumstatin基因的克隆表达及其鉴定

目的重组表达人tumstatin,为人tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。方法提取HEK293细胞总RNA,通过RT-PCR扩增人tumstatin基因,导入pMD19-T,测序,然后亚克隆至pET28a,IPTG诱导表达,产物进行SDS-PAGE分析和Western blot鉴定。结果提取的总RNA经电泳,有清晰的28S和18S两条带。RT-PCR扩增产物长度与理论值750bp相一致。测序证实tumstatin基因正确插入载体中。重组人tumstatin在大肠杆菌中高效表达,表达量约占菌体总蛋白量的30%。Western blot证实所表达蛋白为目的蛋白。结论重组人tumstatin蛋白在大肠杆菌中高效表达,为进一步的tumstatin的肿瘤受体显像奠定基础。

肿瘤抑素T_7肽及其衍生物T_7-NGR载体构建及表达

目的为了提高作用靶向性,将导向肽NGR与肿瘤抑素T_7肽的C端连接,获得T_7肽及其衍生物T_7-NGR的载体。方法通过PCR和合成基因序列方法分别构建了肿瘤抑素T_7肽及T_7-NGR的克隆载体pMD-T_7和pMD-T_7N,经酶切和测序鉴定后,将2种载体分别双酶切,经低熔点琼脂糖凝胶电泳分离后,切下目的片段与酶切回收的质粒载体pET28a在低熔点琼脂糖中直接进行连接反应。阳性克隆经酶切和测序鉴定,转化感受态E.coliBL21(DE3),IPTG诱导表达。结果酶切和测序鉴定结果正确,分别成功构建表达载体pET-T_7和pET-T_7N,经IPTG诱导,完成了表达条件的优化。Tricine-SDS-PAGE凝胶电泳结果显示,当IPTG浓度为1mmol/L时,25℃诱导8h,分别获得了T_7肽和T_7-NGR的表达产物。结论已经成功构建T_7肽和T_7-NGR的表达载体,获得了表达产物,为下一步的小肽活性实验奠定了基础。

加强煤矿防治水工作的对策探讨

在煤炭开采过程中,防治水工作是其重要的经营环节和生产环节。因为煤矿开采需要依赖地质环境,在开采中经常会碰到一些比较复杂的情况,例如水文地质情况,会给开采工作增加难度,提高发生水害的概率。本文主要针对加强煤矿防治水工作进行分析,并且提出相关对策,希望给予行业以参考和借鉴。

煤矿地测防治水安全管理技术要点分析

随着煤炭行业发展进入新的资源整合关键时期,同时技术快速发展极大地促进了煤炭生产能力不断提高。而生产过程中存在的安全防患日益凸显,其中水害问题最为突出。目前煤炭水害等安全事故频发,对煤矿安全造成严重威胁,其中导致水害形成的因素较多,因此对加强煤矿地测防治水安全管理至关重要。

复杂地质条件下煤矿采煤掘进支护技术及其运用

随着我国经济建设的持续发展,对煤矿的需求量不断增加,其开采难度也持续上升,对开采的深度和难度都有了更高的要求,煤矿的地质条件也更加复杂,为了保证工作人员的安全,利用支护技术十分关键。主要针对复杂地质条件下的煤矿采煤掘进支护技术的运用进行分析和阐述,希望给予行业以参考和借鉴。

煤矿地质灾害的特征及防治措施

随着我国经济的持续发展,各个行业对煤矿的需求量也逐渐增加,为了满足市场需求,煤矿企业也加大了开采的力度。但是一些企业过度追求经济效益,进行非法采矿,这种行为造成地质灾害的发生,对人们的生命安全以及财产安全带来了威胁。主要针对煤矿地质灾害的成因以及类型进行分析和探讨,并提出相关的防治措施,希望给予行业以参考和借鉴。

核酸杂交的二次酶放大镧系元素发光时间分辨荧光分析

目的建立一种超灵敏的用于核酸杂交分析的方法。方法通过二次酶放大、PCR扩增、Tb螯合物和时间分辨测量技术,测定前列腺特异抗原（PSA）DNA。结果靶PSADNA测定的标准曲线线性范围大于两个数量级;灵敏度为10pmol/L（0.5fmol/孔）;当靶PSADNA为10、30和60pmol/L时,准确度和精密度分别为77%～95%和12.9%～15.3%。结论本法是一种超灵敏的、简捷和快速的全新分析方法,有很好的应用前景。

探究煤矿开采技术及其工艺发展

煤炭是我国工业发展的能源支柱,对促进我国经济发展具有重要作用。因此,采煤方法和技术是极其重要的,直接影响到煤炭开采的产量水平,成为国家能源的有力保障。当代煤炭开采技术正朝着高效、高产、安全可靠的方向发展。在这种背景下,工业发展对煤矿开采技术和技术的要求越来越高。文章针对煤矿开采技术与工艺的发展进行分析,并做简要论述。