微量补体结合试验检测牛、羊副结核病的研究

采用《中华人民共和国出入境检验检疫行业标准》"副结核病补体结合试验操作规程"方法(简称常量法)和微量补体结合试验(简称微量法)检测3677头进口牛羊的副结核病抗体并进行比较。结果表明,常量法和微量法的溶血素效价测定值相同,补体效价测定值近似,阴性血清对照、抗原对照、补体对照、红细胞对照、血清抗补体结合对照结果均相同,阳性对照血清效价微量法比常量法提高1个滴度,被检血清的阳性检出率微量法高于常量法。比较37℃水浴及37℃恒温培养箱环境下的微量法补体结合试验结果,溶血素效价、补体效价、各项对照试验结果完全相同,被检血清在37℃水浴反应更加充分。比较用变态试验和补体结合试验检验3677头牛羊副结核病的结果、以及用补体结合试验、变态反应和酶联免疫吸附试验方法同时检测2024头牛的结果,发现它们的相关性很小。

用地高辛标记的PCR-ELISA技术快速检测转基因鱼

取含有小鼠重金属螯合蛋白 (mMT)基因启动子及人生长激素 (hGH)基因的鱼样品 ,以Qiagene核酸纯化技术对鱼组织DNA进行纯化。常规PCR检测显示 ,mMT启动基因和hGH基因的PCR产物分别为2 4 0bp和 130bp ,与设计相符。PCR产物的核酸测序结果证实其扩增产物具特异性。地高辛 PCR(Dig PCR)标记反应显示 ,2个基因均产生 1条Dig标记的特异产物带。Dig PCR ELISA检测敏感性试验显示 ,对mMT启动子和hGH基因的检测敏感性可达 10 - 3,与常规PCR结合琼脂糖凝胶电泳检测方法相比 ,检测敏感性可提高至 10 0～ 10 0 0倍。试验证明 ,针对mMT和hGH基因所建立的Dig PCR

猪流行性腹泻和猪传染性胃肠炎弱毒二联疫苗研究

用猪流行性腹泻 (PED)弱毒疫苗株 PEDV- G1P83和猪传染性胃肠炎 (TGE)弱毒疫苗株 TGEV-AG1制成 PED和 TGE弱毒二联疫苗 ,并进行了保存期试验、安全效力、免疫期试验和区域试验。结果表明 ,试验疫苗在 - 2 0℃保存 4个月 ,经 4月保存的疫苗免疫效力未见下降。 4℃保存 4 8h对疫苗病毒的毒价没有明显影响。用该弱毒二联疫苗按程序免疫妊娠母猪 ,对妊娠母猪安全 ,其仔猪获得了良好的被动免疫。其对PEDV强毒、TGEV强毒和该二种强毒混合功击的免疫效力分别达 90 .4 8%、93.75%和 87.5%。用二联弱毒疫苗免疫 8～ 10日龄的哺乳仔猪证明安全 ,2 8日龄时 (2 5日龄断奶 )分别用 PEDV、TGEV和两种强毒混合攻毒免疫效力分别为 10 0 %、90 .9%和 10 0 %。 8～ 10日龄免疫仔猪生长到 4月龄时用 TGEV和 PEDV强毒攻击 ,免疫效力分别为 10 0 %和 73.3%。结果表明 ,该弱毒二联疫苗能够安全地对妊娠母猪和哺乳仔猪进行免疫 ,免疫后能有效地保护初生仔猪、断奶猪和肥育猪抵抗 TGEV和 PEDV强毒的攻击。该弱毒二联疫苗在区域试验中能显著降低猪病毒性腹泻的发病率和死亡率。

猪流行性腹泻和传染性胃肠炎弱毒二联疫苗免疫抗体应答的研究

用猪流行性腹泻 (PED)和传染性胃肠炎 (TGE)弱毒二联疫苗 (下称二联苗 )免疫PED和TGE抗体阴性的妊娠母猪 ,仔猪出生后第 7、14、2 1和 2 8d抽取仔猪血样用微量血清中和试验检测血清抗体。结果 ,免疫母猪所产仔猪通过哺乳获得了相当高的血清抗体 ,在出生后第 7d时接近母体的中和抗体水平 ,并随日龄增大而下降。二联苗免疫母猪所生仔猪和相同株的PED、TGE疫苗株免疫母猪所生仔猪的血清抗体变化基本相似。用二联苗免疫PED和TGE抗体阴性的 10日龄仔猪 ,并于免疫后以 7d的间隔 ( 1月龄内 )或半月 ( 1月龄后 )间隔采取血样进行血清抗体检测。结果 ,用二联苗免疫抗体阴性的 10日龄仔猪 ,抗体在免疫后第 2 1d(TGE)或第 2 8d(PED)达到最高值 ,但抗体下降缓慢 ,在免疫后第 5月 ,免疫猪血清中仍能检测出抗体。相同弱毒株的PED和TGE疫苗免疫组的结果与之基本相同。提示 ,PED和TGE弱毒株联合免疫在诱导妊娠母猪和小猪产生抗体以及母猪产后向哺乳仔猪传递抗体方面未见有相互影响的现象。

供港澳家禽禽流感病毒抗体监测现状与对策

1前言 禽流感（AvianInfluenza，AI）是一种世界范围内的禽类疫病，对养禽业和人类的威胁极大，国际兽疫局将其列为A类动物疫病，我国规定其为一类传染病。自从1997年香港禽流感风波以来，禽流感的爆发呈现出了一些新的流行特点，宿主范围呈现出多样性与复杂性：禽鸟、人和多种哺乳动物均易感；②病毒变异速度快，毒力增强；③传播速度快，流行区域广，造成的损失巨大；④病毒传播方式多样化，疫情在同一国家多个地区反复出现，既有零星的爆发，更有面的扩散；⑤禽流感病毒有可能对人类造成严重的危害。

华南军警犬结核病调查

采用结核菌素皮内变态反应试验，对广东、广西两省（区）的军（警）犬进行了结核病调查。共检测９０只军（警）犬，其中广东５１只，广西３９只。共检出结核病阳性８例，总阳性率为８．８９％；广东检出５例，阳性率为９．８０％；广西检出３例，阳性率为７．６９％。

用微量血清凝集反应检测马副伤寒性流产病

用微量血清凝集反应检测马副伤寒性流产病颜思通（广州动植物检疫局，５１００１０）马副伤寒性流产病，是国家公布的进境动物应检疫的疫病之一，常规采用试管凝集试验进行检验。作者在对该病按《动物检疫操作规程》进行检疫的同时，尝试在９６孔微量板上进行微量凝集试验...

猪流行性腹泻弱毒疫苗的研究

用从广州地区流行性腹泻病猪分离并适应到Ｖｅｒｏ等传代细胞的猪流行性腹泻病毒（ＰＥＤＶ）Ｇ１强毒株，通过Ｖｅｒｏ、ｐＫ１５、ＳＴ细胞株的连续传代，证明第７２代毒已被致弱。用８３代毒（Ｐ８３）对吃初乳前的小猪以８～１０ｍｌ剂量口服连续传５代，每代都从接种猪小肠取样接种细胞进行培养鉴定，并于增殖后作为次代接种材料，结果５代毒均未引起小猪发病，证实该代次毒株的安全、稳定，达到了常规弱毒疫苗株要求的标准。用Ｐ８３制成弱毒疫苗，对２２头８～１０日龄小猪进行免疾效力试验，１４头口服免疫，８头颈肌注射免疫，剂量均为２ｍｌ／头。免疫后２１ｄ以最小发病量（即原毒液的１：１２稀释液）及原毒液的２倍、４倍和８倍的稀释液经口进行强毒攻击，对照组１２头也以相对剂量同时攻击。结果免疫组仅口服免疫、经大于最小强毒攻击量６倍剂量攻击组中１头（１／２）有一过性轻微腹泻，发病不到２４ｈ即恢复。对照组的１２头中有１０头典型发病，严重腹泻，并有寒颤等症状，病程长达３～６ｄ，７ｄ后腹泻症状消失，但体况明显削瘦。试验证明Ｐ８３制备的弱毒疫苗的总免疫效力达９４．６％，表明Ｐ８３已具备弱毒疫苗株的要求。

用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验鉴别诊断猪传染性胃肠炎病毒和猪呼吸道冠状病毒的感染

用固定细胞阻断酶联免疫吸附试验（ＥＬＩＳＡ）对来自丹麦猪的１８０份血清进行了猪传染性胃肠炎病毒（ＴＧＥＶ）和猪呼吸道冠状病毒（ＰＲＣＶ）感染的鉴别诊断，共检出了ＰＲＣＶ抗体阳性血清１０７份（５９．４％），ＴＧＥＶ抗体阳性血清０份。同时也检测了一些来自国内不同ＴＧＥＶ感染类型的猪场血清。该鉴别诊断方法在我国的建立和应用为从ＰＲＣＶ阳性国家进口猪的ＴＧＥ的检疫提供了一条有效途径。

鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒株的选育

本研究利用从国外引进的鸡马立克氏病Ⅰ型弱毒疫苗株，采取回归无特定病原（ＳＰＦ）雏鸡和在细胞培养物上交替接种的方法，连续传代５次后，进行免疫效力试验的结果表明，本研究选育的ＭＤＶＧ１毒株含１０，０００和２，０００蚀斑形成单位（ＰＦＵ）／只鸡剂量试验组对ＭＤ的保护率均达１００％；未经选育的进口ＭＤⅠ型弱毒商品疫苗２，０００ＰＦＵ／只鸡剂量试验组，对ＭＤ的保护率为８６７％；而常规使用的ＨＶＴ商品疫苗２５，００ＰＦＵ／只鸡剂量试验组，对ＭＤ的保护率仅达４００％。并且，通过安全试验、病理学检查、细胞培养特性观察以及血清学、ＰＣＲ和ＭＤＶ形态学检查的结果表明，本研究选育的鸡马立克氏病Ⅰ型ＭＤＶＧ１毒株具有免疫原性好、免疫效力高、致弱性稳定的特点。

实验兔场暴发兔病毒性出血症

实验兔场暴发兔病毒性出血症颜思通，李力复，黄亚德（广州动植物检疫局广州５１００１０）兔病毒性出血症，俗称兔瘟，是兔的一种烈性传染病。患兔以皮下、脏器广泛性出血为特征。不同品种的兔均易感，但以３月龄左右青年兔更为敏感。自从１９８４年我国江苏省首次暴发兔...

微量血清凝集反应检验马副伤寒性流产病的研究

用微量血清凝集反应检验马副伤寒性流产病，与常规试管法比较，其特异性相同，但微量法更为敏感，反应快速，工作效率高。