m^(6)A甲基化修饰在肿瘤耐药中的作用机制研究进展

N^(6)-甲基腺嘌呤(m^(6)A)甲基化是哺乳动物体内最常见、规模最大的一类RNA修饰过程,属于表观遗传学修饰之一,在甲基化酶、去甲基化酶、识别酶等调控下参与RNA转录、核输出、翻译和微RNA的加工处理等,因此m^(6)A甲基化修饰可调控基因的表达。肿瘤耐药性是肿瘤临床治疗的主要障碍,在细胞癌变过程中,m^(6)A甲基化修饰可通过调控基因的表达、激活或抑制信号转导通路等引发相应信使RNA翻译改变,促进肿瘤进展,导致再次使用靶向药物时产生耐药性。因此,深入研究m^(6)A甲基化修饰在肿瘤耐药中的作用机制,可以为肿瘤的治疗提供新思路。

促进我国小城镇发展的财政政策选择

小城镇的建设是一个国家社会经济发展的重要标志,是推进我国农村城镇化、市场化、现代化建设的重要战略部署,同时也是解决“三农”问题的深层次矛盾和实现全面建设小康社会的途径。目前,在小城镇建设的进程中存在体制不健全、资金困难等方面的问题,针对这些问题,我们必须在市场经济整体框架下,对小城镇建设的财政政策进行分析,才能有效推进社会主义新农村建设,促进城镇化健康发展。

煤巷围岩稳定性分析的EW-UCA模型及其应用

准确判定巷道围岩稳定性是进行巷道支护设计与安全施工的基础。对未确知测度理论进行优化,结合巷道围岩控制理论和相关研究成果,选取巷道埋深、跨度等6个主要影响因素作为巷道围岩稳定性分析的判别指标,以20组实测数据作为训练样本,建立了煤巷围岩稳定性分析的EW-UCA模型。为检验模型的可靠性,利用该模型,对潘四东矿4条煤巷围岩稳定性进行了分析研究。结果表明,该模型判别结果和实际情况完全一致,说明该模型具有较高的准确度和良好的实用性。

税费改革后强化农村义务教育财政保障机制的思考

党的十六届五中全会提出要全面建设社会主义新农村,而农村义务教育的协调发展与新农村建设息息相关,财政政策作为调节国民经济的重要手段,应尽快调整思路,在解决农村义务教育问题方面发挥积极作用。本文通过对税费改革后农村义务教育存在的主要问题进行分析,阐述了现行农村义务教育财政保障机制面临的困境并探讨了相应的完善对策。

原发性肝癌ATM基因启动子甲基化及其与放疗疗效的相关性

为探究原发性肝癌(hepatocellular carcinoma, HCC)共济失调-毛细血管扩张突变基因(ataxia-telangiectasia mutated gene, ATM)启动子甲基化情况,分析其与临床特征的关系及与放疗疗效的相关性,采用甲基化特异性PCR法(methylation-specific PCR, MSP)检测50对肝癌手术标本及相应的癌旁肝组织标本、20例正常肝组织、38例局部中晚期肝癌肝穿刺标本的ATM基因启动子甲基化状态,并采用BSP (bisulfite sequencing PCR)测序法对样本的甲基化状态进行验证,分析ATM基因启动子甲基化状态与患者临床特征的关系及与放疗疗效的相关性。结果发现, 88例肝癌组织中ATM基因启动子甲基化率为39.8%(35/88),其中38例肝癌肝穿刺标本有42.1%(16/38)存在ATM基因启动子甲基化, 50例肝癌手术标本有38%(19/50)存在ATM基因启动子甲基化,相应癌旁肝组织只有8.0%(4/50)存在ATM基因启动子甲基化;正常肝组织未发现有ATM基因启动子甲基化, ATM基因启动子甲基化在肝癌组织中的发生率与癌旁肝组织、正常肝组织相比差异具有统计学意义(χ^2=24.818,P<0.05)。此外,存在ATM基因启动子甲基化的局部中晚期肝癌患者的放疗疗效显著优于无甲基化的病例(χ^2=5.955,P=0.015), ATM基因启动子甲基化状态与肝癌放疗疗效呈显著正相关关系(r=0.396, P=0.014)。实验结果表明原发性肝癌ATM基因启动子存在异常甲基化, ATM基因启动子甲基化状态与肝癌放疗疗效关系密切,可为筛选放射敏感差异病人提供新的思路。

下调脂肪酸合成酶表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移及侵袭能力的影响

目的:研究脂肪酸合成酶(FASN)表达对膀胱癌UMUC3细胞增殖、迁移、侵袭的影响,探讨其内在可能机制。方法:免疫组化法检测30例膀胱癌和15例正常膀胱组织FASN蛋白的表达;用脂质体2000分别转染FASN siRNA和无义siRNA至UMUC3细胞,筛选、鉴定siFASN和siControl稳定的细胞,siFASN组细胞设为实验组,siControl组设为对照组;采用蛋白印迹法(Western blot)和实时荧光定量PCR(RT-PCR)法分别检测siFASN组和siControl组细胞FASN蛋白及mRNA的表达,MTT法检测siFASN组和siControl组细胞增殖情况,划痕试验、Transwell试验分别检测siFASN组和siControl组细胞迁移、侵袭能力。结果:FASN蛋白在膀胱癌组织中过表达,且与病理分期、分级密切相关(P<0.05)。与siControl组相比,siFASN组细胞FASN mRNA及蛋白表达下调(P<0.05),细胞增殖活力明显下降(P<0.05),迁移能力明显下降(P<0.05),穿膜细胞数量明显减少(P<0.05)。结论:FASN过表达在膀胱癌发生、发展中发挥重要作用,下调FASN表达能抑制膀胱癌细胞的增殖、迁移、侵袭能力,抑制FASN表达有望成为一种新的膀胱癌治疗方法。

常规放疗与三维适形放疗治疗原发性巨大肝癌的疗效对比及对血清肿瘤标志物的影响

目的对常规放疗与三维适形放疗治疗原发性巨大肝癌的疗效及治疗前后血清肿瘤标志物的变化情况进行比较,评价不同的放疗方法治疗原发性巨大肝癌的临床应用价值。方法选取100例原发性巨大肝癌患者作为研究对象,根据随机数字表法将其分为常规组和研究组,每组50例。常规组患者接受常规放疗,研究组患者接受三维适形放疗,比较两组患者的临床疗效和治疗前后血清肿瘤标志物的变化情况。结果治疗后,研究组患者的总有效率为60.0%(30/50),明显高于常规组患者的34.0%(17/50)(P﹤0.01)。治疗过程中,两组患者均发生了胃肠道反应(恶心呕吐、上腹部疼痛、上消化道出血)。两组患者恶心呕吐、上消化道出血的发生率比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。研究组患者上腹部疼痛的发生率低于常规组患者,差异有统计学意义(P﹤0.05)。治疗前,两组患者的血清甲胎蛋白(AFP)、血清α-L-岩藻糖苷酶(AFU)、糖类抗原19-9(CA19-9)水平比较,差异均无统计学意义(P﹥0.05)。治疗后,两组患者的血清AFP、AFU、CA19-9水平均较本组治疗前降低(P﹤0.05),且研究组患者的血清AFP、AFU、CA19-9水平均明显低于常规组患者(P﹤0.01)。研究组患者的1年、2年、3年生存率均高于常规组患者(P﹤0.05)。结论相较于常规放疗,三维适形放疗治疗原发性巨大肝癌的临床疗效较好,患者的远期生存率较高,值得临床推广应用。

悬索桥组合梁吊装施工方案技术探讨

悬索桥箱梁吊装是桥梁施工的关键技术,在保证安全、质量的前提下采取更好的施工方案,对节约工程造价和保证工程进度优为重要。本文主要对传统的施工工艺采用的缆索吊装安装箱梁技术进行探讨。

氯胍通过下调FASN/SREBP-1c通路抑制肝癌细胞增殖、集落形成及迁移

目的探讨氯胍对肝癌细胞Hep-G2及SMMC-7721增殖、集落形成和迁移的影响及可能机制。方法用不同浓度的氯胍分别处理Hep-G2及SMMC-7721细胞。采用MTT法检测细胞增殖情况,克隆形成实验检测细胞集落形成能力,Transwell检测细胞迁移能力,Western blotting检测脂肪酸合成酶(FASN)及调节元件结合蛋白(SREBP-1c)的表达情况。结果氯胍抑制Hep-G2及SMMC-7721的增殖、集落形成及迁移能力;Western blotting显示氯胍下调FASN及SREBP-1c的表达。结论氯胍能抑制肝癌细胞Hep-G2及SMMC-7721增殖、集落形成及迁移,其作用机制可能与下调FASN/SREBP-1c通路有关。

苯乙双胍通过激活AMPK抑制肝癌细胞增殖、集落形成及侵袭

目的探讨苯乙双胍对肝癌SMMC-7721、Hep-G2细胞系增殖、集落形成和侵袭的影响及分子机制。方法使用不同浓度苯乙双胍处理SMMC-7721细胞、Hep-G2细胞以及腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)沉默的Hep-G2细胞,MTT实验检测细胞增殖生长情况,克隆实验检测细胞集落形成能力,细胞侵袭实验检测细胞侵袭能力,蛋白印迹法(Western blot)检测AMPK和磷酸化哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)的表达。结果苯乙双胍抑制肝癌细胞增殖生长、集落形成以及侵袭能力。苯乙双胍处理组p-AMPK蛋白表达明显上升,p-mTOR蛋白表达明显下降,沉默AMPK后的Hep-G2细胞,苯乙双胍抑制肝癌细胞增殖和侵袭能力下降。结论苯乙双胍通过激活AMPK抑制肝癌细胞的增殖生长、集落形成和侵袭,为苯乙双胍应用于临床治疗肝癌提供理论基础。

脂肪酸合成酶抑制剂TVB-2640对膀胱癌细胞的影响研究

目的研究脂肪酸合成酶(FASN)抑制剂TVB-2640对膀胱癌UMUC3细胞株增殖、凋亡、侵袭及转移的影响。方法取对数生长期UMUC3细胞,分为对照组(加入PBS)和低、中、高3个浓度实验组(12. 50,25,50μmol·L-1TVB-2640),分别处理24,48,72 h后用于后续实验。用噻唑蓝(MTT)法、克隆形成实验检测细胞增殖情况,以流式细胞术检测细胞凋亡情况,以细胞划痕实验检测细胞迁移能力变化,以Transwell实验检测细胞侵袭能力变化。结果药物处理24h后,低、中、高3个浓度实验组细胞增殖抑制率分别为(21. 97±1. 39)%,(28. 12±2. 22)%,(41. 67±2. 12)%,药物处理48 h后,细胞增殖抑制率分别为(30. 83±1. 92)%,(38. 12±1. 44)%,(62. 33±2. 32)%,药物处理72 h后,细胞增殖抑制率分别为(43. 22±2. 54)%,(58. 33±3. 52)%,(83. 32±3. 32)%,中、高浓度组与低浓度组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。TVB-2640作用于UMUC3细胞在24,48,72 h的IC50值分别为58. 92,40. 52,19. 41μmol·L-1,说明抑制效应呈时间依赖性。药物处理24 h后,25,50,100μmol·L-1实验组细胞凋亡率分别为(16. 72±0. 74)%,(21. 83±1. 11)%,(27. 40±1. 22)%,药物处理48 h后,细胞凋亡率分别为(23. 61±1. 12)%,(28. 33±1. 77)%,(30. 11±2. 24)%,各实验组细胞与对照组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 05),高、低浓度实验组比较,差异均有统计学意义(均P <0. 05)。中、高浓度实验组处理细胞24 h,细胞平均迁移能力分别为16. 82±1. 57,79. 04±2. 11,各实验组细胞与对照组相比,差异均有统计学意义(均P <0. 05),说明药物对细胞的迁移活性具有显著抑制作用;中、高浓度实验组处理细胞24 h,细胞穿膜细胞数分别为117. 25±2. 11,66. 70±2. 01,各实验组细胞的侵袭能力与对照组(175. 10±2. 14)相比,差异均有统计学意义(均P <0. 05),说明药物对细胞的侵袭活性具有显著抑制作用。结论 FASN抑制剂TVB-2640可显著抑制膀胱癌UMUC3细胞的增殖、侵袭转移活性并诱导其凋亡,FASN可能是潜在的膀胱癌治疗靶点,FASN抑制剂有望成为一种新的膀胱癌治疗方法。