DJ-1抗氧化应激作用及机制的研究进展

氧化应激在多种疾病的发生发展过程中扮演重要角色,疾病早期组织细胞发生氧化应激后细胞抗氧化应激能力增强。DJ-1作为一种抗氧化应激蛋白,在增强细胞抗氧化应激方面日益受到关注。DJ-1可通过自身氧化作用清除细胞内的活性氧类(ROS);调节细胞内线粒体形态及功能,减少细胞内ROS生成;DJ-1还可激活细胞内多种分子信号通路,增强细胞抗氧化酶的表达,促进ROS清除,从而恢复细胞氧化还原平衡状态,最终增强细胞抗氧化、促进其增殖及抑制细胞凋亡。探讨DJ-1在细胞抗氧化应激中的作用及其分子机制,可为氧化应激导致的相关疾病的治疗提供新思路。

传统纸媒的电商思考

新媒体的飞速发展,不仅对纸媒的传播形式有所冲击,也对纸媒的广告份额和广告市场带来挑战。迫使纸媒在保持既有传统优势的同时,也努力探寻与新媒体的融合。纸媒的电商平台建设就是借助两者的特点和优势,充分利用纸媒多年积累的自身品牌影响和现有的发行渠道,发挥新媒体传播快特性,使之相互利用、相互影响,达到传统纸媒和新媒体互相促进双赢、经营收入倍增的效果,不失为纸媒多元化经营可探索的路径之一。

一家省级专业报“VR+新闻+产业服务”的探索

江苏经济报2016年开设VR/AR工作室,组建VR团队,仅仅两年多时间,完成了大量VR新闻与服务产品制作,获得众多奖项与荣誉,跻身于VR制作的第一方阵。更重要的是,实现了从VR新闻、VR制作软件的使用者向软件开发者、销售者的转变。

p53和Parkin通过调节线粒体自噬抵抗凋亡和衰老促进干细胞修复股骨头坏死

目的观察肿瘤蛋白p53和帕金森相关蛋白(Parkin)调节线粒体自噬对骨髓间充质干细胞(BMSCs)应激性凋亡和衰老的影响,以及对BMSCs修复早期激素性股骨头坏死(SONFH)的作用。方法2017年10月至2019年11月,将p53干扰慢病毒和Parkin过表达慢病毒(Lv-Shp53和Lv-Parkin)转染兔BMSCs,用高浓度H2O2处理BMSCs 24 h,将其分5组:BMSCs、BMSCs/绿色荧光蛋白(EGFP)、BMSCs/Shp53、BMSCs/Parkin和BMSCs/Parkin/Shp53,检测线粒体自噬、凋亡、β-半乳糖甘酶(β-gal)活性等指标,探明p53和Parkin调节线粒体自噬对BMSCs应激性凋亡和衰老的影响。然后将BMSCs移植修复早期SONFH,分6组:空白对照、XACB、XACB/BMSCs、XACB/BMSCs/Parkin、XACB/BMSCs/Shp53、XACB/BMSCs/Parkin/Shp53,术后4、8和12周,通过苏木精-伊红(HE)、马松(Masson)染色及成骨标志物水平,评估早期SONFH的修复效果。采用单因素方差分析(ANOVA)数据。结果在氧化应激条件下,BMSCs、BMSCs/EGFP、BMSCs/Shp53、BMSCs/Parkin和BMSCs/Parkin/Shp53组细胞凋亡率分别为(56.900±4.371)、(58.680±4.926)、(28.683±3.767)、(40.223±4.402)、(11.283±3.945)%,β-gal阳性细胞比率分别为(74.133±5.350)、(81.993±4.012)、(43.453±3.503)、(45.310±5.605)、(19.913±4.224)%,其中BMSCs/Parkin/Shp53组线粒体自噬显著增强,细胞凋亡率和β-gal阳性细胞比率最低,差异均有统计学意义(F=64.204和89.383,P<0.05)。术后4周和8周,XACB/BMSCs/Parkin/Shp53组与空白对照、XACB、XACB/BMSCs、XACB/BMSCs/Parkin、XACB/BMSCs/Shp53组比较,骨坏死区的新骨组织和骨钙素水平显著增加,但骨坏死区尚未完全修复。术后12周,空白对照、XACB、XACB/BMSCs、XACB/BMSCs/Parkin、XACB/BMSCs/Shp53和XACB/BMSCs/Parkin/Shp53组骨钙素表达量分别为0.060±0.040、0.097±0.031、0.093±0.040、0.213±0.041、0.267±0.059、0.367±0.040,其中XACB/BMSCs/Parkin/Shp53组,骨坏死区已完全修复,可见成熟骨组织,骨钙素表达最高,差异有统计学意义(F=23.944,P<0.05)。结论p53和Parkin调节线粒体自噬可有效抵抗BMSCs应激性凋亡和衰老,能提高BMSCs对早期SONFH的修复作用。

LOC103693069对BMSCs缺氧性凋亡的作用研究

目的探讨LOC103693069对BMSCs缺氧性凋亡的作用。方法取1周龄SD大鼠骨髓,采用全骨髓贴壁培养法分离培养BMSCs并传代,经成脂、成软骨和成骨诱导分化鉴定后,取第3代细胞分别采用5%O;、1%O;及无氧条件处理48 h,检测细胞活性、凋亡以及凋亡相关蛋白[低氧诱导因子1α(hypoxia inducible factor1α,HIF-1α)、半胱氨酸蛋白酶3(Caspase-3)、B细胞淋巴瘤/白血病基因2(B cell lymphoma/leukemia 2,Bcl-2)]表达,以正常BMSCs作为对照,确定细胞凋亡最明显的浓度组用于后续实验。取缺氧处理48 h后BMSCs,通过基因芯片以及实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative PCR,qRT-PCR)分析,筛选表达下调最显著基因并构建其高表达、低表达以及阴性对照慢病毒并转染BMSCs,经qRT-PCR检测明确转染成功后,缺氧处理48 h观察细胞活性及凋亡相关蛋白表达。结果经细胞活性、凋亡以及凋亡相关蛋白检测,以无氧条件培养48 h后细胞凋亡最显著,上述指标与其他组比较差异均有统计学意义(P<0.05),以该组处理条件进行后续实验。基因芯片分析示缺氧处理48 h后,BMSCs中AC125847.1、LOC102547753、AABR07017208.2、LOC103693069明显下调,qRT-PCR检测LOC103693069表达下调最显著(P<0.05);选择其构建慢病毒并转染BMSCs,qRT-PCR检测示成功转染至细胞;经缺氧处理后检测显示该基因高表达的BMSCs凋亡率和凋亡相关蛋白表达明显降低(P<0.05)。结论LOC103693069可改善BMSCs缺氧性凋亡。

LOC103693069抑制骨髓间充质干细胞缺氧性凋亡

骨髓间充质干细胞(bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植治疗缺血缺氧性疾病已经有了较多研究,然而移植外源性BMSCs后在缺氧微环境中出现大量凋亡,严重限制其修复作用。近年报道了长链非编码RNA(long non-coding RNA,lncRNA)在缺血缺氧相关疾病中对细胞增殖、凋亡发挥重要作用[1]。本研究通过高通量基因测序结合生信分析筛选出LOC103693069作为调控基因,采用细胞功能实验检测LOC103693069对BMSCs缺氧性凋亡的影响。

凋亡抑制因子5促进干细胞修复早期股骨头坏死的研究

目的探讨凋亡抑制因子5(BIRC5)能否促进骨髓间充质干细胞(BMSCs)对早期激素性股骨头坏死(SONFH)的修复。方法采用SD大鼠分离培养BMSCs,BIRC5慢病毒转染BMSCs,完全随机分3组:空白对照、阴性病毒、BIRC5转染;采用BMSCs与异种脱抗原松质骨(XACB)构建组织工程骨移植治疗早期SONFH,实验完全随机分五组:单纯钻孔减压、XACB、XACB/BMSCs、XACB/BMSCs/绿色荧光蛋白(Lv-GFP)、XACB/BMSCs/Lv-BIRC5/GFP。小动物成像仪检测BMSCs存活情况;术后4、8、12周,微型CT(Micro-CT)评估骨坏死修复效果;采用单因素方差分析(ANOVA)分析数据。结果BIRC5转染组的BIRC5 mRNA相对表达量高于阴性病毒组及空白对照组(7.623±0.127比3.367±0.135比3.227±0.156,F=957.483,P<0.05),BIRC5转染组的BIRC5蛋白相对表达量高于阴性病毒组及空白对照组(1.263±0.038比0.393±0.015比0.417±0.031,F=850.551,P<0.05)。XACB具有良好的生物相容性,BMSCs可在XACB表面正常生长。术后第3天,XACB/BMSCs/Lv-BIRC5/GFP组荧光强度值高于XACB/BMSCs/Lv-GFP组及XACB/BMSCs组(0.874±0.066比0.536±0.054比0.557±0.081,F=23.234,P<0.05)。在术后12周时,XACB/BMSCs/Lv-BIRC5/GFP组骨小梁数目高于XACB/BMSCs/Lv-GFP组及XACB/BMSCs组[(3.873±0.176)/mm比(2.763±0.140)/mm比(2.775±0.184)/mm,F=294.717,P<0.05],XACB/BMSCs/Lv-BIRC5/GFP组骨小梁结构完整,可见成熟骨组织散在分布,骨坏死区完全修复。结论BIRC5可促进BMSCs在坏死区的存活,增强BMSCs对早期SONFH的修复。