工程化细胞外囊泡与癌症治疗

细胞外囊泡(extracellular vesicle,EV)作为细胞间通讯的重要媒介之一,具有稳定性高、进入组织细胞的能力强和生物相容性好等特点,在癌症治疗中有先天优势.但天然EV靶向性差、杀伤癌细胞的能力弱.大量研究表明,工程化改造有望提升EV的癌症治疗效果.现有的EV工程化策略包括EV表面修饰和药物装载.通过在EV表面修饰纳米抗体、肿瘤靶向肽、核酸适体或超顺磁纳米颗粒等分子,可以提高EV的靶向性.在EV中装载化学小分子、蛋白质或核酸类抗癌药物,可以增强EV的肿瘤杀伤能力.经过工程化改造的EV可以行使多种功能,包括靶向递送化疗药物、调控癌细胞基因表达、促进抗肿瘤免疫反应以及联合多种治疗方法等,具有广阔的临床应用前景.目前,工程化EV作为癌症治疗研究的探索热点,亟需制订相关法律法规及标准来规范其研发、生产和使用,并降低生产成本以提高其在临床应用中的可及性.

正常人SC细胞株分化的M1型巨噬细胞模型表征

该文以佛波酯诱导正常人单核细胞来源的SC细胞建立SC-巨噬细胞模型,并表征其形态、吞噬作用、表面标志物和炎症细胞因子分泌情况,评价SC-巨噬细胞模型是否具有典型M1型巨噬细胞表型。结果表明, SC-巨噬细胞贴壁生长,形态以圆形或椭圆形为主;具有caveolae介导的吞噬荧光微球的能力,表面标志物CD11b和LPS受体CD14较SC细胞均显著上调。加入LPS后, SC-巨噬细胞大部分呈长梭形或纺锤形,有明显的伪足,巨噬细胞成熟标志物CD80和CD86均表达上调,炎症细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8的分泌水平均显著上调,这些细胞因子的mRNA转录水平也有上调趋势。SC-巨噬细胞具有正常M1型巨噬细胞的表型特征,该研究的结论支持SC-巨噬细胞模型更为广泛地应用于科研。

可稳定表达ZsGreen1基因的正常细胞来源单核细胞株的构建

为探索构建可表达外源基因的正常细胞来源单核细胞株的可行方案,该研究分别尝试以脂质体转染法、腺病毒载体感染法和含Tet-On调控元件的慢病毒载体感染法,构建可表达绿色荧光蛋白的SC细胞株。经慢病毒感染和靶向扩增获得稳定表达目的基因的SC细胞后,该研究进而验证了该细胞可否在PMA诱导下分化为典型的巨噬细胞。研究结果显示,脂质体转染法和腺病毒载体感染法未能有效导入外源基因至SC细胞;经慢病毒感染和靶向扩增,该研究成功构建了2株可稳定表达ZsGreen1基因的SC细胞株(SC-ZsGreen1),其ZsGreen1阳性表达率均高于95%; SCZsGreen1细胞与SC细胞经PMA处理后均具相似的巨噬细胞表型特征,包括CD11b和CD14表达升高、吞噬能力上调和趋化因子IL-8分泌水平上升。综上,该研究报道了一种构建可稳定表达外源基因的正常人外周血来源单核细胞株的可行方案。