耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及其耐药机制的研究

目的分析临床分离耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗菌药物的耐药特征及其对亚胺培南耐药机制。方法应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验,头孢哌酮/舒巴坦采用K-B法;应用聚合酶链反应（PCR）方法检测碳青酶烯酶相关基因（IMP、VIM、GIM、SPM、OXA、GES）、膜微孔蛋白基因oprD2,采用Etest试验观察氰氯苯腙（CCCP）对亚胺培南最低抑菌浓度（MIC）的影响,以研究细胞内主动外排机制。结果耐亚胺培南铜绿假单胞菌除对阿米卡星100%敏感外,对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦敏感率为48.0%~54.0%,对三代、四代头孢菌素、氨曲南、喹诺酮类等抗菌药物抗菌活性差,敏感率为3.0%~29.0%;对美罗培南29.0%敏感,对氨苄西林/舒巴坦、氯霉素、四环素、复方新诺明全部耐药;检测到IMP阳性率17.6%,oprD2阳性率2.9%,其余耐药基因未检测到;当CCCP存在时,亚胺培南的MIC值下降4个浓度梯度,提示存在主动外排机制的菌株占11.8%。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌除阿米卡星外,对其他常用抗菌药物耐药严重;产IMP型金属β-内酰胺酶、细胞内主动外排机制以及膜微孔蛋白基因oprD2缺失,是铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的原因,但膜微孔蛋白基因oprD2缺失,不是铜绿假单胞对亚胺培南耐药的主要机制。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及β-内酰胺类耐药基因研究

目的分析该院2005年1～12月临床分离的34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特征以及B～内酰胺类耐药相关基因存在状况。方法应用BDPhoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验，头孢哌酮／舒巴坦敏感性检测采用K—B法。应用PCR方法检测12种β-内酰胺类耐药相关基因，分别为TEM、SHV、CARB、OXA-10、PER、VEB、GES、DHA、IMP、VIM、GIM、SPM。结果亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100．00％敏感外，对哌拉西林、哌拉西林／他唑巴坦敏感率为48．00％～55．00％，对第3、4代头孢菌素、氨曲南、喹诺酮类等抗生素抗菌活性差，敏感率为3．22％～29．03％。对美洛配能29．03％敏感，对氨苄西林／舒巴坦、氯霉素、四环素、复方新诺明全部耐药。β-内酰胺类耐药相关基因TEM、CARB、DHA、IMP阳性率分别为5．9％、32．4％、14．7％、17．6％，而SHV、0XA-10、PER、VEB、GES、VIM、GIM、SPM均为阴性。结论耐亚胺培南的铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外，对其他常用抗生素耐药严重。携带TEM、CARB、DHA、IMP基因是本组试验菌株对β-内酰胺类抗生素和亚胺培南耐药的重要机制。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药相关基因的研究

目的分析我院2005年1～12月临床分离34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药相关基因存在状况，为临床抗感染治疗提供依据。方法应用PCR方法检测13种β-内酰胺类抗菌药物耐药相关基因，分别为blaTEM、blaSHV、blacCARB、blaoXA-10、blaPER、blaVEB、blaGES、blaDHA、blaIMP、blaVIM、blaGIM、blaSFM、oprD2；3种氨基糖苷类修饰酶基因，分别为：aac（6′）-I、aac（6′）-H和ant（2″）-I；整合酶基因I（intll）。结果耐药相关基因blaTEM、blaCARu、blaDHA、blaIMP、oprD2、aac（6′）-I、aac（6′）～II和ant（2″）-I、intI1阳性率分别为：5．9％、32．4％、14．7％、17．6％、97．1％、21．2%、33．3％、48．5％、3．0％；其余耐药基因均未检测到。结论携带多种耐药相关基因是耐亚胺培南的铜绿假单胞菌对多种抗生索耐药的重要原因之一，膜孔蛋白基因oprD2缺失不是本组铜绿假单胞菌对亚胺培南耐药的主要原因。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌的耐药特征及耐消毒剂基因的检测分析

目的 分析和调查我院2005年1月～12月临床分离34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素耐药特点以及耐消毒剂相关基因携带状况。方法 应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和17种药物敏感试验，头孢哌酮／舒巴坦采用KB法。用PCR方法检测季胺类（如苯扎溴铵）、双胍类（如氯己定）耐药相关基因qac EΔ1-sull。结果 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100％敏感外，对哌拉西林、哌拉西林／三唑巴坦敏感率为48％～54％，对第三代及第四代头孢菌素、氨曲南和喹诺酮类等抗菌活性差，敏感率为3％～29％，对美罗培南敏感率为29％，对氨苄西林／舒巴坦、氯霉素、四环素、复方磺胺甲噁唑全部耐药。34株亚胺培南耐药铜绿假单胞菌有14株EΔl-sull基因阳性，携带率为41．2％。结论 本组亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外，对其它常用抗生素耐药严重，且耐消毒剂相关基因阳性携带率较高，应引起临床微生物和消毒界的重视。

肠球菌耐药趋势研究及抗感染用药建议

目的分析该院各类临床标本中分离的肠球菌对常用抗生素耐药情况,为临床医生提供抗肠球菌感染的治疗对策。方法应用Vitek微生物系统回顾性统计分析近3年来该院肠球菌的耐药情况。结果3年来,肠球菌属的构成比发生改变,屎肠球菌分离率有增加趋势;粪肠球菌和屎肠球菌引起的感染部位有差异,屎肠球菌主要引起泌尿系统感染(47.3％)。不同标本来源粪肠球菌对常用抗生素耐药率明显不同,粪肠球菌引起的泌尿系统感染可选用呋喃妥因或万古霉素。万古霉素对粪肠球菌的MIC50呈上升趋势;四环素MIC50呈下降趋势;呋喃妥因、青霉素-G的MIC50无明显变化;氨苄青霉素、环丙沙星对粪肠球菌的MIC50趋势不定。呋喃妥因对屎肠球菌MIC50呈上升趋势;氨苄青霉素、四环素、万古霉素MIC50呈下降趋势;环丙沙星、青霉素-G的MIC50无明显变化。结论临床医生应合理选用抗生素,延长抗生素的使用寿命,使肠球菌耐药得到有效控制。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌亲缘性分析

目的了解耐亚胺培南铜绿假单胞菌菌株的亲缘性。方法聚合酶链反应(PCR)法对耐亚胺培南铜绿假单胞菌进行β-内酰胺酶基因、氨基糖苷类修饰酶(AMEs)基因、消毒剂耐药基因(qacE△1-sul1)、膜微孔蛋白基因(oprD2)及整合酶基因(intⅠ1)的检测,并以耐药基因为分子标记作聚类分析。结果β-内酰胺类耐药相关基因TEM、CARB、DHA、IMP阳性率分别为5.9%、32.4%、14.7%、17.6%,而SHV、OXA-10、PER、VEB、GES、VIM、GIM、SPM均为阴性;oprD2缺失率为2.9%;aac(6′)-Ⅰ、aac(6′)-Ⅱ和ant(2″)-Ⅰ阳性率分别为21.2%、33.3%、48.5%;qacE△1-sull基因为41.2%;IntⅠ1阳性率为3.0%,试验菌株存在克隆传播和近缘关系现象。结论耐亚胺培南铜绿假单胞菌可导致克隆传播,遗传标志物聚类分析方法可快速了解试验菌株间的亲缘关系。

5·12汶川地震伤患者感染病原菌分布及药物敏感试验结果分析

目的分析5.12汶川地震伤患者感染病原菌的分布及抗菌药物敏感试验结果,为特大自然灾害抗感染治疗提供参考依据。方法收集2008年5～2008年7月地震伤患者送检各类样本中分离的非重复病原菌共441株。所有菌株以BD Phoenix100或VITEK32全自动微生物分析仪鉴定到种,药敏试验采用BD Phoenix100或VITEK32配套药敏试验复合板,药敏标准按2007年版CLSI/NCCLS规定执行。结果地震伤住院患者以伤口感染和呼吸道感染最常见,感染病原菌种类分布广,覆盖13个菌属,主要包括不动杆菌属、假单胞菌属、埃希菌属、肠杆菌属、葡萄球菌属等,感染病原菌中以多重耐药革兰阴性杆菌比革兰阳性球菌更为常见,并且合并2种甚至3种细菌的混合感染常见,混合感染率达60.6%。鲍曼不动杆菌耐药非常严重,除了有20%对亚胺培南和阿米卡星敏感,其余抗生素敏感率<12%;铜绿假单胞菌对氨基糖苷类(庆大霉素、阿米卡星、妥布霉毒)敏感率为80%;对哌拉西林、哌拉西林/他唑巴坦、头孢他啶敏感率为61.4%～73.9%,亚胺培南敏感率为48.6%,对其余抗生素敏感率<50%;大肠埃希菌对亚胺培南敏感率为100%,对哌拉西林/他唑巴坦敏感率为73.9%,对其余抗生素敏感率<35%;阴沟肠杆菌对亚胺培南敏感率为100%,对其余抗生素敏感率<30%。金黄色葡萄球菌对万古霉素、利奈唑胺敏感率为100%,对奎奴普丁/达福普丁、呋喃妥因、复方新诺明敏感率为92%～96%,对红霉素和克林霉素敏感率为57%～64%,对其余抗生素敏感率<40%。泛耐鲍曼不动杆菌为45.7%,泛耐铜绿假单胞菌为4.3%,产ESBLs大肠埃希菌为68.5%,产ESBLs肺炎克雷伯菌为52.9%,对甲氧西林耐药金黄色葡萄球菌分离率为78.3%。结论地震伤患者感染病原菌种类分布广、耐药严重,应根据药敏试验结果合理使用抗生素,同时做好消毒隔离工作,避免交叉感染和医院感染爆发流行。

医院内非发酵革兰阴性杆菌类型分布抗菌耐药特征分析

目的总结临床送检标本中分离到的非发酵革兰阴性杆菌（NFGNB）的类型分布及对常用抗菌药物的耐药特征，指导临床合理使用抗生素。方法根据《全国临床检验操作规程》，应用Vitek-32全自动微生物分析仪和ATB半自动细菌鉴定和药敏系统对细菌进行鉴定和药物敏感试验。结果共分离到NFGNB836株，分属7个菌属，未分离到无色杆菌属和金氏杆菌属；分离率前3位为铜绿假单胞菌（47．25％）、鲍曼不动杆菌（17．34％）和嗜麦芽窄食单胞菌（14．11％）；铜绿假单胞菌对SCF、COL、TZP、IMP较敏感，敏感率为75．0％～89．0％；鲍曼不动杆菌对IMP、COL、TZP、TIC／CA、SCF较敏感，敏感率为72．0％～90．0％；嗜麦芽窄食单胞菌对IMP天然耐药，除了对TZP、SMZ、SCF、TIC／CA较敏感，敏感率为50．0％～71．0％，对其它抗生素耐药严重。铜绿假单胞菌对IMP和SCF敏感率有下降趋势；不动杆菌对IMP较稳定，但对SCF有下降趋势。结论我院NFGNB耐药情况严峻，应密切监测细菌耐药特点和耐药趋势，严格控制和合理使用抗生素，避免医院感染爆发流行。

医院内常见革兰阳性球菌分布及耐药性研究

目的 总结分析 2 0 0 0年 1月～ 2 0 0 3年 12月各类临床送检标本中分离到的革兰阳性球菌的分布及对常用抗生素的耐药情况 ,指导临床合理应用抗生素。方法 根据《全国临床检验操作规程》 ,应用Vitek 3 2全自动微生物分析仪对细菌进行鉴定和药敏实验 ,并监测耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)、凝固醇阴性耐甲氧西林葡萄球菌(MRSCON)、耐青霉素肺类链球菌 (PRP)、对高浓度氨基糖苷类耐药肠球菌 (HLAR)和对万古霉素耐药肠球菌 (VRE)的发生率。结果 共分离到革兰阳性球菌 2 44 1株 ,葡萄球菌属 14 19株 ( 5 8 1% ) ,链球菌属 719株 ( 2 9 5 % ) ,肠球菌属 3 0 3株( 12 4% )。葡萄球菌属对常用抗生素耐药严重 ,尤其对 β 内酰胺类抗生素 ,耐药率达 80 %～ 10 0 % ;耐甲氧西林金黄色葡萄球菌 (MRSA)分离率为 5 6 7% ,MRSE和耐甲氧西林溶血葡萄球菌 (MRSH)分离率为 84 2 %和 94 7% ;未分离到耐万古霉素葡萄球菌。肺炎链球菌对青霉素耐药率 (PRP)为 2 3 2 % ,对红霉素耐药率为 48 9%。屎肠球菌对青霉素和氨苄青霉素耐药率明显高于粪肠球菌 ;粪肠球菌和屎肠球菌对高浓度庆大霉素耐药率分别为 5 7 9% ;和 66 7% ,对高浓度链霉素耐药率分别为 5 2 6%和 3 3 3 % ;VRE分离率为 5 6%。结论 细菌耐药性仍是目?

耐亚胺培南铜绿假单胞菌CARB-3基因的发现

目的 分析我院2005年1-12月临床样本中分离的34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌CARB基因携带情况，并对CARB基因分型。方法 应用BD phoenix 100全自动微生物分析仪鉴定临床分离的铜绿假单胞菌并筛选耐亚胺培南的铜绿假单胞菌。采用PCR方法筛查耐亚胺培南铜绿假单胞菌的CARB基因，用DNA测序法对阳性扩增产物进行分型。结果 34株耐亚胺培南的铜绿假单胞菌中，有32．4％携带CARB基因，测得DNA序列进行BLASTn比对，基因型为CARB-3型。结论 我院临床样本中分离的耐亚胺培南的铜绿假单胞菌携带CARB-3型基因，携带率较高，医务工作者应重视和加强耐亚胺培南的铜绿假单胞菌的防治和耐药监测。

基质辅助激光解吸电离飞行时间质谱在临床微生物领域的应用进展

在临床微生物实验室,革兰染色、菌落形态、显微镜检查、选择培养基的生长特点、各种手工或自动的生化试验是细菌、酵母、真菌的主要鉴定方法。这些方法依赖细菌生产代谢过程,需要长时间的孵育,一般需要24～48h,不能满足临床对感染患者的快速诊断和适当的治疗。分子生物学方法、细菌核糖体（16SrRNA）基因序列分析、实时荧光定量PCR检测特定的基因被认为是替代方法，但这些技术复杂、耗费高，不适用于临床微生物实验室的检测工作。

肠球菌耐药特征及对高浓度庆大霉素耐药基因的研究

目的 研究从临床标本中分离到的303株肠球菌的耐药特征,以及了解我院庆大霉素高浓度耐药肠球菌耐药基因的流行分布。方法 细菌鉴定和抗生素药敏试验采用Vitek 32全自动微生物系统自动分析,运用PCR方法检测acc(6’) Ie aph(2”) Ia,aph(2”) Ib和aph(2”) Ic基因;并对部分PCR扩增产物DNA测序分析。结果 303 株肠球菌中以粪肠球菌和屎肠球菌最多见,分别占72.6%和22.4%;对庆大霉素高浓度耐药的粪肠球菌和屎肠球菌分别为57.9%和66.7%;对链霉素高浓度耐药粪肠球菌和屎肠球菌分别为52.6%和33.3%;对145株肠球菌进行高浓度庆大霉素耐药基因的检测显示:acc(6’) Ie aph(2”) Ia基因是高浓度庆大霉素耐药肠球菌的惟一耐药基因,未检测到aph(2”) Ib和aph(2”) Ic基因。结论 监测肠球菌属对高浓度氨基苷类抗生素的耐药情况和应用分子生物学技术检测高浓度庆大霉素耐药基因,为临床医师治疗肠球菌感染提供依据。

耐亚胺培南铜绿假单胞菌耐药特征及β-内酰胺类耐药基因研究

目的 分析我院2005年1．12月临床分高34株耐亚胺培南铜绿假单胞菌对常用抗生素的耐药特征以及β-内酰胺类耐药相关基因存在状况。方法 应用BD Phoenix100全自动微生物分析仪进行细菌鉴定和药物敏感试验，头孢哌酮，舒巴坦采用K-B法。应用PCR方法检测12种β-内酰胺类耐药相关基因，分别为TEM、SHV、CARB、OXA．10、PER、VEB、GES、DHA、IMP、VIM、GIM、SPM。结果 亚胺培南耐药铜绿假单胞菌除对阿米卡星100％敏感外，对哌拉西林、哌拉西林，他唑巴坦敏感率为48％-54％，对三代、四代头孢菌素，氨曲南，喹诺酮类等抗生素抗菌活性差，敏感率为3％-29％。对美洛培能有29％敏感，对氨苄西林，舒巴坦、氯霉素、四环素、复方新诺明全部耐药。β-内酰胺类耐药相关基因TEM、CARB、DHA、IMP阳性率分别为5．9％、32．4％、14．7％、17．6％，而SHV、OXA-10、PER、VEB、GES、VIM、GIM．SPM均为阴性。结论 耐亚胺培南的铜绿假单胞菌除对阿米卡星敏感外，对其它常用抗生素耐药严重。携带TEM、CARB、DHA、IMP基因是本组试验菌株对β-内酰胺类抗生素和亚胺培南耐药的重要机制。

耐高浓度氨基糖甙类抗生素肠球菌的研究进展

随着肠球菌院内感染率增加,耐药或多重耐药肠球菌已成为院内感染的重要病原菌。肠球菌对氨基糖甙类药物表现出高度的耐药性,极大地影响了临床用药的选择。重视对耐高浓度氨基糖甙类抗生素肠球菌耐药表型的筛选,从分子水平对耐氨基糖甙类抗生素肠球菌的耐药机制及耐药基因进行研究,可从理论上指导临床采取合理措施对肠球菌感染进行有效治疗和预防。

肺炎链球菌粘附机制的研究现状

肺炎链球菌粘附宿主细胞是肺炎链球菌侵袭、感染宿主细胞的先决条件。粘附过程是特异的,是细菌表面的粘附分子和宿主细胞膜受体相互作用的结果。荚膜对肺炎链球菌的粘附无影响,而细胞壁(CW)在介导肺炎链球菌粘附宿主细胞过程中起重要作用;CW亚组分脂磷壁酸(LTA)介导肺炎链球菌的粘附过程,并导致炎症反应;细菌表面的结构蛋白或分泌蛋白是细菌与宿主细胞连接的桥梁;肺炎链球菌能与宿主细胞外基质蛋白特异性结合,进而粘附宿主细胞。研究阐明肺炎链球菌的粘附机制,将有助于预防和治疗肺炎链球菌的早期感染。

细菌感染过程建立的分子机制

目前认为，病原菌感染宿主细胞包括：病原菌粘附宿主细胞；宿主细胞摄入病原菌；细菌在宿主细胞内存活、繁殖；细菌产物导致宿主细胞中毒死亡。研究细菌致病机理，即病原菌感染过程建立的分子机制，对于发展新一代抗感染药物有重要意义。

尿路感染病原菌分布及耐药性检测

目的 探讨尿路感染病原菌的分布及耐药性特征 ,为临床合理选用抗生素、控制医院感染提供依据。方法 收集我院尿路感染患者标本中分离的 15 1株病原菌进行鉴定 ,同时对G-杆菌进行ESBLs的检测 ,肠球菌属进行氨基糖苷类高水平耐药 (HLAR)的筛选。结果 尿路感染病原菌分布占前几位的细菌为大肠埃希菌5 3 6 4 %、肠球菌属 9 2 7%、凝固酶阴性葡萄球菌 7 95 %、假单胞菌 5 96 % ;产ESBLs大肠埃希菌的检出率为13 5 8% ,产ESBLs肺炎克雷伯菌的检出率为 16 6 7% ,HLAR肠球菌属检出率为 5 7 14 %。结论 重视尿路感染病原菌耐药性检测 ,对控制医院感染。