脊髓背角星形胶质细胞Cx43组成的半通道在大鼠急性切口痛中的作用

目的研究脊髓背角星形胶质细胞Cx43半通道在大鼠急性切口痛中的作用。方法成年雄性SD大鼠60只,随机分为对照组(C组)、切口痛组(I组)和Gap19组。Western blot分别检测大鼠急性切口痛术后脊髓背角的Cx43及星形胶质细胞GFAP的表达变化;术前30 min,鞘内应用Gap19测定术后大鼠50%机械缩足阈值(PWT)的变化,免疫荧光检测大鼠脊髓背角的Cx43及GFAP表达的变化,ELISA检测炎症因子的变化。结果与C组相比,I组大鼠脊髓背角Cx43和GFAP表达在术后6 h明显增加,术后3 d和7 d无改变。I组和Gap19组大鼠在切口建立后2 h、6 h、24 h、3 d的PWT明显降低(P<0.01),术后7 d无变化。与I组比,Gap19组PWT在术后2、6、24 h明显增加(P<0.01),3 d和7 d无变化。免疫荧光结果显示,I组术后6 h脊髓GFAP和Cx43表达相较C组增加(P<0.01);与I相比,Gap19组GFAP和Cx43表达明显下降(P<0.05),但术后7 d各组间无统计学差异。ELISA显示,与C组相比,I组脊髓背角炎症因子IL-1β、IL-6以及TNF-α的表达明显增多(P<0.05);与I组相比,Gap19组炎症因子表达则明显下降(P<0.05)。结论特异性抑制Cx43半通道能明显抑制脊髓星形胶质细胞活化和炎症因子表达,减轻急性切口痛大鼠术后痛觉过敏。

抗抑郁药对海马星形胶质细胞缝隙连接蛋白表达和通道功能的影响

目的探讨3种不同机制抗抑郁药对海马星形胶质细胞缝隙连接蛋白和通道功能的影响。方法CCK-8实验检测不同机制抗抑郁药对海马星形胶质细胞的细胞毒性,采用蛋白免疫印迹法和细胞接种荧光示踪法测定3种不同机制抗抑郁药对由缝隙连接蛋白43(Cx43)组成的通道功能和Cx43蛋白表达的影响。结果CCK-8实验显示,25.00μmol/L氟西汀、0.10μmol/L阿米替林和0.20 nmol/L文拉法辛对海马星形胶质细胞无细胞毒性(P均>0.05);25.00μmol/L氟西汀、0.10μmol/L阿米替林和0.20 nmol/L文拉法辛能抑制海马星形胶质细胞缝隙连接的荧光传递功能(P均<0.05),但3种抗抑郁药均不影响海马星形胶质细胞Cx43蛋白的表达(P均>0.05)。结论抗抑郁药能够显著降低海马星形胶质细胞Cx43组成的通道功能。