乙醇脱氢酶(ADH)产酶菌株的选育

从食醋生产企业的醋醅中采集样品,以乙醇为唯一碳源,用碳酸钙透明圈平板法分离出185株菌株,然后以产酸量和耐乙醇能力为标准,瓶发酵选育出20株ADH产酶菌株；A5-2产酸量为49.85 g/L,耐乙醇能力强,A5-2的菌种形态学和16S rDNA序列分析初步鉴定为巴斯德醋酸杆菌（ Acetobacter pasteurianus）；A5-2乙醇脱氢酶酶学性质研究表明：最适作用温度和pH分别为45℃和pH 4.0,具有一定的耐热性和良好的耐酸碱性；A5-2乙醇脱氢酶粗酶制备条件为硫酸铵饱和度70%~80%,回收率84%。

紫外诱变选育高产碱性木聚糖酶优良短小芽胞杆菌

以短小芽胞杆菌M-11为研究对象,选育碱性木聚糖酶高产优良短小芽胞杆菌,并对其发酵条件进行研究.对短小芽胞杆菌M-11用紫外线（UV）诱变,用刚果红平板染色法初筛、摇瓶发酵复筛及稳定性筛选,选育出高产碱性木聚糖酶突变菌株M-11-2,研究发酵条件.结果表明：突变菌株M-11-2基础产酶活力500～600 IU·mL-,是M-11酶活314.93 IU·mL-1的1.5倍;摇瓶发酵产酶活力811.28 IU·mL-1,是原始菌株M-11（613 IU·mL-1）1.3倍;发酵罐发酵产酶活力2 703.68 IU·mL-,发酵液产酶能力1600000IU·L-1（以成品酶活计）,发酵条件：发酵周期24h,温度37℃,培养基：麸皮7.0％、氯化钠7.0 mmol· L-1、硫酸锌5.0mmol·L-1、硫酸镁0.02％、酵母膏1.0％、氯化铵1.0％、磷酸氢二钾0.4％,pH调节至8.0.因此,采用紫外线诱变方法,成功选育出高产碱性木聚糖酶的短小芽胞杆菌菌株,稳定性良好,适宜发酵工程应用的优良菌株.

麦芽根发酵生产碱性木聚糖酶

目的:Bacillus pumilus M-26以麦芽根为碳源发酵生产碱性木聚糖酶。方法:以单一麦芽根和复合麦芽根分别为碳源,首先确定碳源组成及浓度、氮源组成及浓度、无机盐种类及浓度,然后通过正交试验得出摇瓶发酵的培养基配方,最后进行20L发酵罐发酵生产碱性木聚糖酶工艺条件研究。结果:碳源:麦芽根,麦芽根:麸皮=7∶3,5%和8%,氮源:牛肉膏和氯化铵;无机盐:氯化钠、氯化钙及硫酸镁。摇瓶发酵条件,37℃,220 r·h-1,48 h,发酵罐发酵条件,37℃,24 h。单一碳源发酵培养基,麦芽根5%,Mg SO40.01%,氯化钠5 mmol·L-1,氯化钙1 mmol·L-1,氯化铵1.2%,牛肉膏1.2%,K2HPO40.4%,p H8.0;复合碳源发酵培养基,麦芽根麸皮7%,Mg SO40.03%,氯化钠1 mmol·L-1,氯化钙5 mmol·L-1,氯化铵1.0%,牛肉膏1.2%,K2HPO40.4%,p H8.0。摇瓶发酵最高产酶活力分别为268.38 IU·m L-1和363.13 IU·m L-1,发酵罐发酵最高产酶活力分别为748.58 IU·m L-1和1 348.99 IU·m L-1。结论:麦芽根与麸皮组成复合碳源经Bacillus pumilus M-26发酵生产碱性木聚糖酶,摇瓶产酶活力363.13 IU·m L-1,发酵罐产酶活力1 348.99 IU·m L-1。

碱性木聚糖酶热稳定性及半衰期研究

目的：通过碱性木聚糖酶热稳定性的研究探究其半衰期和保质期。方法：首先对碱性木聚糖酶溶液的热稳定性进行研究,然后再进行碱性木聚糖没固体制剂的热稳定性研究,最后应用一级动力学模型得出各自的半衰期和保质期。结果：碱性木聚糖酶溶液的温度范围60~70℃,热处理时间1~6 min,6 min后残留酶活最高为35.87%~0,25℃的半衰期和保质期分别为13.73 d和2.08 d;碱性木聚糖酶固体制剂的温度范围100~120℃,热处理时间1~6 h,6 h后残留酶活为81.96%~25.99%,25℃的半衰期和保质期分别为4 920.37 d和748.25 d10结论：碱性木聚糖酶固体制剂具有良好的热稳定性,保质期优于酶制剂国家标准。

玉米秸秆发酵生产碱性木聚糖酶

目的:Bacillus pumilus M-26以玉米秸秆为碳源发酵生产碱性木聚糖酶。方法:首先确定碳源组成及浓度、氮源组成及浓度、无机盐种类及浓度,然后通过正交试验得出摇瓶发酵的培养基配方,最后进行20L发酵罐发酵及发酵液处理制备碱性木聚糖酶工艺条件研究。结果:碳源(8%):玉米秸秆:麸皮=4:3;氮源:酵母膏和氯化铵;无机盐:氯化钠、氯化钙及硫酸镁。摇瓶发酵条件,37℃、220r/h、48h,发酵罐发酵条件,37℃、24h。发酵培养基组成:玉米秸秆复合碳源8%,MgSO43 mmol/L,氯化钠3mmol/L,氯化钙7 mmol/L,氯化铵0.9%,K2HPO40.4%,酵母膏0.3%,pH 8.0。摇瓶发酵最高产酶活力620IU/ml,发酵罐发酵最高产酶活力1 815.82IU/ml。碱性木聚糖酶制剂收率80%以上,产品酶活30 000 IU/g,发酵产酶能力800 000IU/L。结论:玉米秸秆与麸皮组成复合碳源经Bacillus pumilus M-26发酵生产碱性木聚糖酶,摇瓶产酶活力620IU/ml,发酵罐产酶活力1 815.82IU/ml。