凝血酶滴定法测定云南菲牛蛭中水蛭素含量的改进研究

目的改进原云南省菲牛蛭质量标准中水蛭素的含量测定方法。方法考察白瓷板法代替原试管方法、两种浓度的凝血酶溶液、几种滴定体积对含量测定的影响;用原方法和改进后的方法分别对五批样品进行滴定比较。结果改进后,用白瓷板法测定,配制两种浓度的凝血酶溶液(40NIH·m L-1与20NIH·m L-1),采用几种滴定体积(1~5μL),每1min滴加1次,先滴加高浓度凝血酶溶液初测消耗的凝血酶溶液体积后,再用两种浓度的凝血酶溶液重新进行精确测定;增加空白对照实验,限定反应时间为10min;菲牛蛭样品浓度在0.00678~0.0597g·m L-1(r=0.9983)内与消耗的凝血酶单位量呈线性相关;五批样品的含量为156.68~234.25U·g-1,RSD均小于5%;含量供试品溶液在4℃下24h内稳定。结论改进后的方法简便、快速,重复性和准确度较原方法好,可作为一种新的云南菲牛蛭水蛭素含量测定方法。