大豆磷脂散对神经损伤保护作用的研究

目的探讨大豆磷脂散对体外神经细胞、小鼠神经组织的保护作用及其机制。方法细胞实验中,细胞计数试剂盒(CCK-8)法观察不同浓度大豆磷脂散对小鼠小胶质细胞(BV2)和大鼠肾上腺髓质嗜铬瘤细胞(PC12)的细胞毒性作用;NO测定实验分析不同浓度大豆磷脂散对BV2细胞分泌NO水平的影响;显微镜下观察大豆磷脂散对PC12细胞突触生长活性作用;动物实验部分,利用东莨菪碱小鼠模型模拟小鼠认知功能障碍,Morris水迷宫实验测试小鼠学习记忆能力;苏木精-伊红染色(HE)观察东莨菪碱模型小鼠海马组织形态及神经细胞密度。结果大豆磷脂散在浓度为1000μg/ml以下时,对BV2细胞和PC12细胞无明显细胞毒性作用。与对照组相比,大豆磷脂散预处理的BV2细胞NO分泌量明显降低(P<0.01),PC12细胞的神经突生长显著增加(P<0.01)。与模型组相比,大豆磷脂散显著改善东莨菪碱模型小鼠的学习记忆能力(P<0.05),减轻海马齿状回(DG)、锥体细胞区3(CA3)、锥体细胞区1(CA1)神经元损伤,提高神经细胞密度(P<0.001)。结论大豆磷脂散通过从细胞水平上减轻神经炎症、促进神经突生长,改善认知障碍小鼠学习记忆能力,减轻海马组织损伤,发挥神经保护作用。

虎地肠溶胶囊对放射性肠炎的防护作用及其机制

目的探讨在大鼠小肠隐窝细胞(IEC-6细胞)电离辐射损伤中,虎地肠溶胶囊的防护作用及其机制。方法采用(2、4、6、8、10 Gy)的6兆伏的X射线对IEC-6细胞照射,细胞克隆形成实验检测细胞增殖,根据细胞存活率选用6 Gy辐射剂量建立细胞损伤模型。CCK-8法检测虎地肠溶提取液各浓度(12.5、25、50、100、200μg/ml)对IEC-6细胞活力的影响,检测在(10、20、40、80μg/ml)浓度下对辐射后IEC-6细胞活力影响。获取最佳照射剂量和提取液浓度后,将细胞分为对照组、模型组和虎地肠溶提取液组(80μg/ml),对照组予以伪照射,其他两组均接受6 Gy电离辐射,虎地肠溶提取液组在照射前2 h药物预处理。Annexin V-PI双染色检测细胞凋亡;β-半乳糖苷酶(β-Gal)染色检测细胞衰老;DCFH-DA荧光探针检测活性氧;Western blot检测p16、p21、过氧化氢酶(CAT)和超氧化物歧化酶(SOD2)的相应蛋白质表达情况。结果4~10 Gy辐射剂量均可抑制IEC-6细胞增殖(P<0.001);浓度为40、80μg/ml的虎地肠溶提取液可提高受照射的IEC-6细胞的存活率(P<0.001);虎地肠溶提取液组细胞凋亡率、β-Gal阳性率、DCFH-DA荧光强度低于模型组(P<0.05);虎地肠溶提取液组细胞中CAT、SOD2的蛋白质表达较模型组升高(P<0.05),p16、p21的蛋白质表达较模型组降低(P<0.05)。结论虎地肠溶胶囊减轻了IEC-6细胞的辐射损伤,其作用机制可能与抑制活性氧产生,减少氧化应激,减轻细胞衰老及凋亡有关。