二甲亚砜对酵母多糖致肠道屏障损伤的保护作用

目的:探讨二甲亚砜(DMSO)对酵母多糖诱导的肠道炎性因子释放及肠屏障功能损伤的影响。方法:SD大鼠随机分为4组:生理盐水组(SS组),DMSO组(DS组),酵母多糖+生理盐水组(ZS组)和酵母多糖+DMSO组(ZD组)。每组又分为伤后4 h和24 h两个亚组。检测肠组织细胞因子TNF-α和IL-10含量和血中二胺氧化酶(DAO)活性,并对肠损伤程度进行组织学评分。结果:与ZS组相应时间点相比,ZD组肠组织TNF-α含量减少、IL-10含量增加,血中DAO活性降低,肠绒毛损伤减轻、肠损伤评分降低。结论:DMSO可抑制酵母多糖引起的肠组织炎性因子释放,减轻肠屏障损伤程度。

电针足三里穴复合延迟静脉液体复苏对60%血容量失血性休克大鼠的作用研究

目的研究电针足三里穴复合延迟静脉液体复苏对60%血容量失血性休克(HS)大鼠生存率、血流动力学、血气指标、脏器血流量和脏器功能的影响。方法选取144只SPF级成年雄性大鼠,制作60%血容量HS模型。大鼠麻醉后置管,沿腹中线剖开腹腔长约4 cm,用浸润0.9%氯化钠溶液的纱布覆盖。从股静脉注射1%肝素0.9%氯化钠溶液行全身肝素化后,从股动脉开始抽血。首先在10 min内从股动脉抽出全身血容量的40%,然后在170 min内利用抽液泵从股静脉缓慢抽取全身血容量的20%,总失血量为大鼠全身血容量的60%,HS模型制作完成,记为休克即刻。(1)实验一,选用72只大鼠HS模型,按随机数字表法分成休克不补液组(HS组)、休克后电针组(HS+EA组)、休克延迟补液组(HS+DFR组)、休克后电针复合延迟补液组(HS+EA+DFR组)。HS组:只进行HS模型制作,不进行针刺和补液。HS+EA组:于HS模型制作完成后30 min针刺双侧足三里穴,不进行补液;HS+DFR组:在休克后3 h用3倍失血量的乳酸林格氏液进行股静脉输液30 min,不进行针刺;HS+EA+DFR组:HS模型完成后30 min针刺双侧足三里穴,休克后3 h进行与HS+DFR组相同的静脉延迟补液。计算4组大鼠休克即刻、休克后3、12、24 h生存率;监测造模前30 min,休克即刻,休克后3、12 h平均动脉压(MAP)和腹腔各脏器血流量。(2)实验二,选择余下72只大鼠HS模型,分组及处理同实验一,计算休克后3 h各组动脉血气和脏器功能指标。数据比较采用单因素方差分析或Kruskal-Wallis秩和检验、t检验、log-rank检验。结果(1)休克即刻,各组生存率均为100.0%,休克后3 h,HS组、HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组大鼠的生存率分别为61.1%、77.8%、77.8%和88.9%,4组比较差异无统计学意义(P>0.05)。休克后12 h,HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组大鼠的生存率分别为55.6%、55.6%、61.1%,均显著高于HS组(0),差异均有统计学意义(t=6.51、6.73、6.84,P值均小于0.05)。休克后24 h,HS+EA+DFR组大鼠生存率(50.0%)显著高于HS+DFR组(16.7%)和HS+EA组(11.1%),差异有统计学意义(t=2.51、2.17,P值均小于0.05)。(2)休克即刻,4组MAP、肝组织血流量(HBF)、肾组织血流量(RBF)和小肠黏膜血流量(IMBF)较造模前30 min均显著降低,差异均有统计学意义(P值均小于0.05)。休克后3、12 h,HS组、HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组MAP分别为(43.32±5.94)、(64.09±9.64)、(52.85±10.12)、(62.04±7.12)mmHg(1 mmHg=0.133 kPa)和0、(55.52±11.32)、(67.39±12.03)、(94.78±9.54)mmHg,2个时间点HS组与HS+EA组比较差异均有统计学意义(t=3.61、37.00,P值均小于0.05);HS+EA+DFR组与HS+DFR组比较,差异均有统计学意义(t=2.01、6.54,P值均小于0.05);休克后3 h,HS+EA+DFR组与HS+EA组比较,差异无统计学意义(t=1.04,P>0.05),休克后12 h,2组比较差异有统计学意义(t=3.68,P<0.05)。休克后3、12 h,HS组、HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组HBF分别为(41.31±4.13)、(47.55±3.21)、(42.54±4.19)、(49.86±4.68)U和0、(52.14±5.53)、(66.24±4.04)、(79.41±7.51)U,2个时间点HS组与HS+EA组比较差异均有统计学意义(t=4.16、45.00,P值均小于0.05);HS+EA+DFR组与HS+DFR组比较,差异均有统计学意义(t=3.41、3.12,P值均小于0.05);休克后3 h,HS+EA+DFR组与HS+EA组比较,差异无统计学意义(t=1.58,P>0.05),休克后12 h,2组比较差异有统计学意义(t=3.98,P<0.05)。休克后3、12 h,HS组、HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组RBF分别为(81.29±8.49)、(106.48±9.74)、(77.59±8.32)、(100.18±10.48)U和0、(86.81±4.58)、(113.38±10.03)、(158.01±11.63)U,2个时间点HS组与HS+EA组比较差异均有统计学意义(t=3.21、24.00,P值均小于0.05);HS+EA+DFR组与HS+DFR组比较,差异均有统计学意义(t=2.67、3.49,P值均小于0.05);休克后3 h,HS+EA+DFR组与HS+EA组比较,差异无统计学意义(t=1.55,P>0.05),休克后12 h,2组比较差异有统计学意义(t=3.71,P<0.05)。休克后3、12 h,HS组、HS+EA组、HS+DFR组和HS+EA+DFR组IMBF分别为(43.98±4.75)、(89.92±4.72)、(51.03±6.90)、(94.50±7.61)U和0、(76.65±11.32)、(104.42±12.03)、(143.26±9.54)U,2个时间点HS组与HS+EA组比较差异均有统计学意义(t=3.71、30.00,P值均小于0.05);HS+EA+DFR组与HS+DFR组比较,差异均有统计学意义(t=2.37、4.38,P值均小于0.05);休克后3 h,HS+EA+DFR组与HS+EA组比较,差异无统计学意义(t=1.08,P>0.05),休克后12 h,2组比较差异有统计学意义(t=4.74,P<0.05)。(3)休克后3 h,HS组pH、乳酸、动脉血二氧化碳分压、丙氨酸转氨酶、肌酐、二胺氧化酶分别为7.04±0.07、(9.11±1.28)mmol/L、(50.08±3.07)mmH g、(153.15±16.56)U/L、(82.70±7.26)mmol/L、(19.06±2.50)U/L,与HA+EA组[7.19±0.03、(7.16±1.18)mmol/L、(42.53±4.40)mmH g、(98.26±11.45)U/L、(74.4±6.56)mmol/L、(29.35±2.06)U/L]比较,差异均有统计学意义(t=8.36、4.75、5.97、11.57、3.60、13.48,P值均小于0.05);休克后3 h,HS+DFR组各指标分别为7.04±0.04、(9.06±1.15)mmol/L、(48.14±3.10)mmH g、(136.46±14.24)U/L、(86.5±7.38)mmol/L、(20.56±2.64)U/L,与HS+EA+DFR组[7.17±0.14、(7.22±1.07)mmol/L、(40.52±3.09)mmH g、(99.01±10.14)U/L、(72.5±6.41)mmol/L、(25.74±3.20)U/L]比较,差异均有统计学意义(t=3.79、4.97、7.39、9.09、6.08、5.30,P值均小于0.05);HS+EA组与HS+EA+DFR组各指标比较,差异均无统计学意义(t=0.31、0.28、0.33、0.36、0.29、0.35,P值均大于0.05)。结论电针足三里穴能显著改善致死性HS模型大鼠的组织灌流并保护脏器功能,提高延迟补液大鼠24 h生存率。

丁酸钠对50%总体表面积烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层保护作用和机制研究

目的研究丁酸钠对严重烫伤大鼠肺血管内皮糖萼层的保护作用及可能机制。方法将144只成年雄性SD大鼠按照随机数字表法分成假伤+盐水组(n=24),假伤+丁酸钠组(n=24),烫伤+盐水组(n=48),烫伤+丁酸钠组(n=48)。制作50%总体表面积Ⅲ度烫伤模型:烫伤+盐水组和烫伤+丁酸钠组大鼠麻醉、备皮后置于80℃水浴锅中(背部15 s,腹部8 s,双下肢15 s),假伤+盐水组和假伤+丁酸钠组大鼠浸入37℃水相同时间。假伤+丁酸钠组和烫伤+丁酸钠组立即皮下注射丁酸钠(300 mg/kg);假伤+盐水组和烫伤+盐水组立即皮下注射0.5 mL 0.9%氯化钠溶液。于伤后3、6 h分别处死动物并取材,测定肺泡灌洗液蛋白(BALF)浓度,肺湿干重比;采用蛋白质印迹法和酶联免疫法检测肺组织多配体蛋白聚糖-1(SDC-1)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)和血管内皮生长因子(VEGF)的蛋白表达和含量率的变化。数据比较采用单因素方差分析和Newman-Kueuls法。结果(1)伤后3、6 h,烫伤+盐水组BALF蛋白浓度分别为(0.6575±0.0455)、(0.6841±0.0760)mg/mL,高于假伤+盐水组[(0.4766±0.0658)mg/mL],差异均有统计学意义(q=7.188、8.243,P值均小于0.05);伤后3、6 h,烫伤+盐水组肺湿干重比分别为4.5451±0.4444,4.7951±0.6066,均高于假伤+盐水组(2.6360±0.1575),差异均有统计学意义(q=10.950、12.380,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤+丁酸钠组BALF蛋白浓度分别为(0.5410±0.071)、(0.5381±0.0636)mg/mL,均低于烫伤+盐水组[(0.6575±0.0455)、(0.6841±0.0760)mg/mL],差异均有统计学意义(q=4.610、5.799,P值均小于0.05);且伤后3、6 h,烫伤+丁酸钠组肺湿干重比值3.6266±0.4461、3.4779±0.5107,均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义(q=5.269、7.555,P值均小于0.05)。(2)蛋白质印迹法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤+盐水组肺组织SDC-1表达水平分别为0.3761±0.0757、0.3298±0.0749,假伤+盐水组肺组织SDC-1表达水平均为1.0000±0,2组比较差异均有统计学意义(q=13.280、14.260,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤+丁酸钠组肺组织SDC-1表达水平分别为0.7605±0.2071、0.6783±0.1179,均高于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义(q=8.180、7.417,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤+盐水组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9:2.6834±0.3188、2.6556±0.4489;VEGF:3.8063±0.7038、2.8500±0.3963),假伤+盐水组MMP-9、VEGF表达水平均为1.0000±0,烫伤+盐水组均低于假伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=9.356、9.202),(VEGF:q=12.700、8.375);P值均小于0.05]。伤后3、6 h,烫伤+丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF表达水平分别为(MMP-9:0.9952±0.3785、1.5271±0.3428;VEGF:1.5746±0.2160、1.7215±0.3418),均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=9.383、10.100),(VEGF:q=6.272、5.108);P值均小于0.05]。(3)酶联免疫法检测结果显示,伤后3、6 h,烫伤+盐水组与假伤+盐水组比较,肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均显著增高,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=8.850、8.436),(VEGF:q=9.090、9.186);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量显著降低,差异均有统计学意义(q=8.296、8.331,P值均小于0.05)。伤后3、6 h,烫伤+丁酸钠组肺组织MMP-9、VEGF蛋白含量均低于烫伤+盐水组,差异均有统计学意义[(MMP-9:q=6.579、6.939),(VEGF:q=7.853、7.768);P值均小于0.05];SDC-1蛋白含量高于烫伤+盐水组(q=6.265、4.456,P值均小于0.05)。结论丁酸钠能减轻严重烫伤大鼠肺组织水肿,保护肺血管内皮糖萼层,其作用机制可能与抑制MMP-9和VEGF通路相关。

电针足三里穴对Ⅲ度烫伤大鼠口服补液后胃排空率和胃黏膜血流的影响

目的研究电针足三里穴对Ⅲ度烫伤大鼠口服补液时胃排空率和胃黏膜血流的影响。方法采用随机数字表法将120只SPF级成年大鼠分为5组:假伤后胃内补液组(GR组)、烫伤后胃内补液组(SGR组)、烫伤后电针+胃内补液组(SGR+EA组)、双侧迷走神经切断+烫伤后胃内补液(VGX+SGR组)、双侧迷走神经切断+烫伤后电针+胃内补液组(VGX+SGR+EA组),每组24只。在1000 mL无菌蒸馏水中,加入3.5 g丙酮酸钠、3.5 g氯化钠,1.5 g氯化钾和20.0 g葡萄糖,配置丙酮酸钠口服补液盐(Pyr-ORS),调节pH值至7.35。将大鼠麻醉后分别行颈动脉、股静脉和股动脉分离术并置管。烫伤大鼠采用沸水(100℃,15 s)造成背部约35%总体表面积(TBSA)的Ⅲ度烫伤,假烫伤大鼠采用温水浸泡(37℃,15 s)。烫伤后即刻,每只大鼠给予皮下注射0.5 mL 0.9%氯化钠溶液和500 mL丁丙诺啡用于止痛。采用输液泵立即经胃管输注Pyr-ORS,持续1 h。VGX+SGR组和VGX+SGR+EA组大鼠烫伤前进行双侧迷走神经切断术。SGR+EA组和VGX+SGR+EA组,选择足三里穴进行针刺,连接电针仪,强度为2 mA,2~100 Hz,针刺深度7 mm,在给予烫伤大鼠Pyr-ORS的胃内补液后,持续电针刺激0.5 h。分别于烫伤后2、4 h检测各组大鼠胃排空率、胃黏膜血流量。数据比较采用单因素方差分析和LSD-t检验。结果烫伤后2、4 h,SGR组、SGR+EA组、VGX+EA组和VGX+SGR+EA组大鼠的胃排空率[2 h:(16.5±3.2)%、(22.6±3.7)%、(13.6±3.0)%、(14.2±3.2)%;4 h:(12.9±2.4)%、(17.1±2.3)%、(10.8±2.7)%、(12.7±2.5)%]均分别低于GR组[2 h:(45.9±4.6)%;4 h:(42.4±5.7)%],差异均有统计学意义[2 h:(t=18.18、13.67、20.37、19.60,P值均小于0.05);4 h:(t=28.29、24.71、28.67、27.96,P值均小于0.05)。SGR+EA组的胃排空率高于SGR组、VGX+SGR组和VGX+SGR+EA组,差异均有统计学意义[2 h:t=4.32、6.54、5.94,P值均小于0.05);4 h:(t=4.38、6.15、4.49,P值均小于0.05)]。烫伤后2、4 h,SGR组、SGR+EA组、VGX+EA组和VGX+SGR+EA组大鼠胃黏膜血流量[2 h:(54.0±7.3)、(74.6±8.7)、(42.0±5.5)、(45.2±6.2)BPU;4 h:(46.0±6.8)、(65.6±10.1)、(37.8±5.6)、(42.7±6.4)BPU]均分别明显低于GR组[2 h:(142.0±18.1)BPU;4 h:(127.4±16.5)BPU],差异均有统计学意义[2 h:(t=15.67、11.67、18.35、17.56,P值均小于0.05);4 h:(t=15.80、11.07、17.81、16.58,P值均小于0.05)];SGR+EA组与SGR组、VGX+SGR组和VGX+SGR+EA组比较,差异均有统计学意义[2 h:(t=6.28、10.97、9.53,P值均小于0.05);4 h:(t=5.58、8.33、6.63,P值均小于0.05)]。结论电针足三里穴能促进Ⅲ度烫伤大鼠口服补液后的胃排空率,增加胃黏膜血流,提高口服补液的疗效,其作用机制可能与兴奋迷走神经有关。