芋头球蛋白的提取纯化及其对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶抑制活性研究

目的:探究芋头球蛋白体外调节血糖活性。方法:以磷酸缓冲液提取芋头球蛋白,以蛋白质提取率为指标考察了料液比、温度、时间和次数对蛋白质提取的影响,在此基础上采用响应面优化提取工艺。采用DEAE-52离子纤维素柱层析法纯化粗蛋白,通过高效液相色谱法检测纯化所得球蛋白的纯度,并测定其等电点和分子量。研究了芋头球蛋白对α-淀粉酶和α-葡萄糖苷酶的抑制活性及抑制动力学,以阿卡波糖为阳性对照,评价其体外调节血糖活性。结果:最佳提取条件为:料液比1:16 g/mL、温度41℃、时间124 min,此时提取率为36.75%±0.31%,得率0.70%±0.04%,纯度85.72%±0.47%。纯化后的球蛋白经高效液相色谱检测得一主峰,纯度为93.27%,得率为0.20%±0.01%,等电点pI=5.6,分子量为22 kDa左右。芋头球蛋白对两种酶的抑制活性与蛋白浓度存在量效关系,对α-淀粉酶的IC_(50)为0.75±0.10 mg/mL,对α-葡萄糖苷酶的IC_(50)为(2.09±0.19) mg/mL,而阿卡波糖对α-淀粉酶的IC_(50)为(0.61±0.13) mg/mL,对α-葡萄糖苷酶的IC_(50)为(0.69±0.16) mg/mL,说明芋头球蛋白对α-淀粉酶略低于阿卡波糖,而对α-葡萄糖苷酶抑制活性远低于阿卡波糖,二者的抑制类型均为可逆性的非竞争性抑制,对α-淀粉酶抑制的K_(i)=(0.61±0.05) mg/mL,对α-葡萄糖苷酶抑制的K_(i)=(0.26±0.02) mmol/L。结论:本研究优化了芋头球蛋白的提取工艺,纯化得到芋头球蛋白,研究发现其有一定的体外调节血糖的活性,对功能食品的研发和芋头产品提高附加值具有一定的指导意义。

荔浦芋球蛋白结构表征及其对HepG2细胞糖代谢的影响

为了对荔浦芋球蛋白基本性质进行表征和探究其对细胞糖代谢影响的机制,测定了荔浦芋球蛋白的热稳定性、氨基酸组成和二级结构组成等性质;研究不同浓度荔浦芋球蛋白对胰岛素抵抗HepG2细胞的葡萄糖消耗量、肝糖原含量、己糖激酶和丙酮酸激酶活性的影响。结果表明,荔浦芋球蛋白的变性温度为79.30±1.36℃,对应焓值为7.46±0.53 J/g,该球蛋白富含天冬氨酸和谷氨酸,氨基酸评分为103.10%;二级结构组成为:β-折叠、无规卷曲、β-转角和α-螺旋含量分别为39.42%~42.14%、26.34%~31.38%、18.25%~24.16%和5.04%~13.27%;荔浦芋球蛋白能影响胰岛素抵抗细胞糖代谢,与对照组相比,球蛋白高剂量组(500μg/mL)的葡萄糖消耗增加率40.62%±0.98%,肝糖原合成增加率26.35%±1.13%、己糖激酶活性增加率54.63%±2.48%和丙酮酸激酶活性增加率44.29%±2.64%。综上,荔浦芋球蛋白可以促进细胞葡萄糖的吸收、增加肝糖原合成和提高己糖激酶和丙酮酸激酶活性,从而影响糖代谢,作用机制可能与促进胰岛素分泌和增强糖酵解有关。

原料组分与工艺条件对腐竹品质的影响

采用物性测定仪、色差计和扫描电镜等对腐竹物理性质进行测定。以腐竹得率、食用品质等作为综合性评价指标,研究其原料组分与品质之间的相互联系,优化腐竹生产工艺条件。结果表明:当豆浆质量分数6%、pH 8.0、揭膜温度90℃、蛋白质与脂肪质量比3∶1、蛋白质与总糖质量比4∶1时,所得腐竹得率最高,为43.13%,拉伸强度为12.46 g/mm^2,延伸率为9.85%;且当豆浆中11S与7S蛋白质量比为4∶1时,腐竹食用品质最好;与传统生产工艺相比,得率和拉伸强度分别提高了10.11%和74.02%,以综合因素(得率、机械性能和色泽等)进行评分,优化腐竹比传统企业生产工艺的腐竹评分高17.7%。

《爸爸的花儿落了》微妙情感解读

《爸爸的花儿落了》节选自林海音的自传体小说《城南旧事》,尽管体裁上属于小说,但因为带有作家本人成长的深深印记,作品透着如抒情散文般丰富的情感、浓烈的情绪。那么,贯穿《爸爸的花儿落了》全文的情感线索是什么呢？人教版的配套教参并没有给出答案或提示。

芋头水溶性多糖的分离纯化及其对巨噬细胞免疫活性功能的影响

为探究芋头水溶性多糖的免疫活性功能,本文用DEAE-52纤维素阴离子交换柱层析对由水提醇沉的方法得到芋头水溶性粗多糖进行分离纯化,并利用Sephadex G-200凝胶柱层析、SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳和傅里叶红外光谱分析其组成结构。再通过CCK-8试剂法、中性红吞噬实验、Griess法和酶联免疫吸附法测定其对巨噬细胞RAW264.7的增殖活性、吞噬能力以及分泌NO和细胞因子能力的影响。结果表明,得到的两种芋头水溶性多糖TPS_1和TPS_2纯度分别为87.4%和81.5%。TPS_1主要成分为含有甘露糖的α型中性多糖,TPS_2主要成分为含有硫酸基团的β型吡喃酸性多糖。细胞实验表明TPS_1和TPS_2在25~400μg/mL浓度范围内对RAW264.7无毒害作用。其中,TPS_1能够显著提高该细胞的中性红吞噬能力(P<0.05),吞噬指数最大可达到空白对照组的2.07倍;TPS_2则具有更强的促进NO、细胞因子分泌的作用。TPS_1和TPS_2作用下的NO分泌量分别为空白对照组的3.07倍和4.57倍,TNF-α的分泌量为空白对照组的3.04倍和3.76倍,IL-1β的分泌量为空白对照组的1.37和1.54倍。以上结果表明,TPS_1和TPS_2均具有免疫调节的功能,有望进一步开发作为免疫调节剂添加到食品中。

{第一部分}热点专题阅读训练——热点一：西南旱情

河水断流、水井干涸、农田龟裂……导致中国西南五省的旱情不断加重。其中云南、广西部分地区的旱情已达到特大干旱等级，严重干旱对群众生活、工农业生产包括经济社会发展都造成了严重影响。

热点十：2009年度热点人物

2009热点人物的评选主办单位：新华社（新华网） 投票参评者：广大网民 2009年度热点人物评选结果：

嫦娥奔月，韵舞华夏——走近“嫦娥二号”

几千年前．中国人用瑰丽的想象在月亮上建立了广寒宫，并且把美丽迷人的嫦娥姑娘“送到”了那里生活。几千后，

“老师,我只想要公平”

几年前，学校安排我教九年级语文。上课不满一月，小W就在课堂上故意制造不和谐声音，跟我唱反调。我瞪他，他毫不在意，还用胜利的微笑看着我，好像在说：“你能拿我怎么样？”之后，类似挑衅事件在小W身上如家常便饭，我瞪他、批评他甚至跟班主任反映都于事无补。

学生失控,老师不能失控

新接班不到两个星期，小H和小Q就在班里闹起来了，搅得整个班级乌烟瘴气。我带他俩去办公室询问。小Q有条有理地讲述了事情的经过，大致是因为她不小心让桌子出了界，小H说她故意挤他，就推倒了她的桌椅。我有些生气地把目光转向小H，示意他解释。没想到，一直没出声的小H一下子激动起来，大口大口地喘着粗气，强忍着泪水，指着小Q说：“她……她……我……”