基于宏基因组技术探究不同剂量榄香烯对大鼠粪便病毒的影响

目的:探讨不同剂量的榄香烯乳状注射液(EEI)对大鼠粪便病毒的影响。方法:清洁级健康雄性斯泼累格·多雷(SD)大鼠18只,随机分为低剂量榄香烯乳状注射液组[L-EEI,20 mg/(kg·d)]、高剂量榄香烯乳状注射液组[H-EEI,40 mg/(kg·d)]和对照组(等量生理盐水),每组6只。连续给药14 d取新鲜粪便进行宏基因组测序,之后对所测得的病毒进行生信分析。结果:维恩图分析表明对照组、L-EEI和H-EEI组所独有的病毒种类数目分别是6种、6种和10种,在种水平上,3组所共有的病毒数目为77种;PCA表明,L-EEI组的数据与其他组明显分开(属水平P=0.036,种水平P=0.012);NMDS分析表明,L-EEI与H-EEI组的数据聚集程度更高(属水平Stress=0.093,种水平Stress=0.129);多组间比较结果显示共有10种病毒存在极其显著的差异,不同剂量EEI对病毒的影响大致可分为3类:1)病毒丰度与EEI的剂量正相关或者负相关;2)与对照组比较,L-EEI导致病毒丰度升高而H-EEI对病毒丰度无显著影响;3)与对照组比较,L-EEI导致病毒丰度降低而H-EEI对病毒丰度无显著影响;结论:不同剂量的EEI会导致大鼠粪便中病毒组成和结构的改变,不同病毒对不同剂量的EEI敏感性也不同。

黄芪对病毒性心肌炎的作用综述

分别从对心脏的保护作用、免疫调节、强心、抗病毒等方面对黄芪被用于治疗病毒性心肌炎进行较为详细的介绍和总结。提示黄芪作用显著,对治疗病毒性心肌炎有较好的疗效。

益气活血方对肝星状细胞LX-2增殖和凋亡的影响

目的探讨中药"复方益气活血方"(Yiqihuoxue prescription)对肝星状细胞LX-2增殖和凋亡的影响。方法体外培养肝星状细胞LX-2,浓度分别为1.125,2.228,3.31,4.37,5.41 mg/ml益气活血方作用于LX-2细胞24 h,48 h,然后用MTT比色法检测细胞的增殖情况,选取合适的益气活血药物浓度(1.125,2.228,6.432 mg/ml)用流式细胞术检测益气活血药作用24 h后对LX-2细胞凋亡的影响。结果 1MTT检测结果显示,不同浓度的益气活血方用于LX-2细胞24 h和48 h后,能够抑制LX-2细胞增殖(P<0.05),24 h抑制率随药物浓度的增加而提高。48 h时,当药物浓度达到3.31 mg/ml后,其抑制作用不随药物浓度的增加而增强(P>0.05)。2流式细胞术检测显示,益气活血方(浓度分别为1.125,2.228,6.432 mg/ml),可明显促进LX-2细胞凋亡。结论益气活血方能抑制LX-2细胞的增殖,促进LX-2细胞凋亡,其抑制作用呈时间-剂量依赖性。

β-榄香烯联合顺铂对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨β-榄香烯联合顺铂对宫颈癌SiHa细胞生长的影响。方法:体外培养宫颈癌SiHa细胞,分别将β-榄香烯(浓度梯度为25、50、100、150、200μg/ml),顺铂(浓度梯度为1.5、3、6、9、12μg/ml),单独作用于宫颈癌SiHa细胞,加药24h、48h后用CCK-8法检测细胞增殖情况。用流式细胞术检测β-榄香烯组细胞24h凋亡率。选取合适的药物浓度(β-榄香烯125μg/ml,顺铂3μg/ml),进行联合用药,加药24h、48h用CCK-8法检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测24h细胞凋亡率。结果:CCK-8法检测显示β-榄香烯和顺铂单独用药24h、48h后,除顺铂1.5μg/ml外,其它实验组对宫颈癌SiHa细胞的抑制率均高于对照组(P<0.05),在一定程度上呈浓度和时间依赖性。联合用药时,细胞的抑制率和凋亡率要显著高于单独用药(P<0.01)。结论:β-榄香烯、顺铂单独或联合作用均能抑制SiHa细胞的增殖,促进其凋亡,且β-榄香烯联合顺铂的作用要显著高于单独用药,β-榄香烯和顺铂可协同(CDI<1)促进SiHa细胞凋亡。

放射性肺损伤的研究进展

放射性肺损伤(radiation-induced lung injury,RILI)是胸部肿瘤放疗后常见的严重并发症之一。其早期主要表现为放射性肺炎,部分患者在后期可表现为肺纤维化,严重影响患者的生活质量,缩短了生存期。本文主要从放射性肺损伤的发病机制、影像学变化、病理学改变及中西医治疗几个方面加以综述。

β-榄香烯联合顺铂对乳腺癌MCF-7细胞增殖和凋亡的影响

目的:探讨β-榄香烯联合顺铂对乳腺癌MCF-7细胞生长的影响。方法:体外培养乳腺癌MCF-7细胞,将β-榄香烯(浓度梯度为25、50、100、150、200μg/ml),单独作用于乳腺癌MCF-7细胞,加药24h、48h后用噻唑蓝(MTT法)法检测细胞增殖情况。用流式细胞术检测用药24h后对MCF-7细胞凋亡和细胞增殖周期的影响,选取合适的药物浓度(β-榄香烯125μg/ml),与顺铂(3μg/ml)进行联合用药。加药24h、48h用MTT法检测细胞增殖情况,用流式细胞术检测24h后药物组对MCF-7细胞凋亡和细胞增殖周期的影响。结果:MTT法结果显示β-榄香烯单独用药24h、48h后,与对照组相比,实验组乳腺癌MCF-7细胞的抑制率高于对照组(P<0.05),并且在一定程度上呈浓度和时间依赖性。联合用药时,细胞的抑制率和凋亡率要显著高于单独用药(P<0.01)。与对照组相比,榄香烯能够使MCF-7细胞产生明显的G0/G1期阻滞(P<0.01)。结论:β-榄香烯单独或与顺铂联合作用均能抑制MCF-7细胞的增殖,促进其凋亡,且β-榄香烯联合顺铂的作用要显著高于单独用药组,β-榄香烯和顺铂可协同(CDI<1)促进MCF-7细胞凋亡,其机制可能与G0/G1期阻滞有关。

奈达铂联合β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响

目的探讨奈达铂(nedaplatin,NDP)联合β-榄香烯(β-elemene)对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,分别将奈达铂(浓度为7.5,15,30,45,60μg/ml),β-榄香烯(浓度为25,50,100,150,200μg/ml),单独作用于HeLa细胞后24 h、48 h用MTT比色法检测细胞的增殖情况,并选取合适的药物浓度(奈达铂15μg/ml,β-榄香烯150μg/ml),进行联合用药,加药24 h、48 h后用MTT法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测24 h细胞的凋亡率。结果①MTT法显示不同浓度β-榄香烯作用HeLa细胞24 h、48 h后,其增殖抑制率均明显高于正常对照组(P<0.05)。奈达铂组除24 h时7.5μg/ml和15μg/ml无显著差异外,其余各组增殖抑制率均明显高于相应正常对照组(P<0.05)。②联合用药(奈达铂15μg/ml,β-榄香烯150μg/ml)时,对HeLa细胞的抑制作用显著高于单独用药(P<0.01)。结论奈达铂、β-榄香烯单独或二者联合作用均能抑制HeLa细胞的增殖,且联合应用的作用显著高于单独用药,可协同促进HeLa细胞的凋亡。

S100A6基因过表达慢病毒载体的构建、转染及鉴定

目的构建S100A6基因重组慢病毒质粒,经293T细胞包装为重组慢病毒颗粒,并感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达。方法 PCR扩增S100A6基因序列,将目的基因与酶切线性化载体p Len O-DCE定向连接,转化E.Coli DH5α感受态细胞,对阳性重组子进行DNA测序及比对。将构建成功的目的质粒和辅助包装质粒共转染293T细胞生产病毒液,荧光显微镜观察报告基因在293T细胞中的荧光表达,判断重组慢病毒的感染效率。用得到的病毒液转染人肺腺癌A549细胞,real-time PCR和Western blot检测转染A549细胞后S100A6蛋白和S100A6 mRNA的表达。结果测序提示重组慢病毒质粒构建成功;荧光显微镜观察显示在包装细胞中获得较高的转染效率。real-time PCR检测显示A549细胞中有S100A6 mRNA表达;Western blot显示S100A6蛋白在A549细胞中稳定表达。结论成功构建S100A6基因慢病毒表达载体,并成功感染A549细胞,实现在细胞中高效、稳定表达,为S100A6基因功能及特性的研究和探索提供了实验基础。

西医院校中医药学教学改革的思考

在我国西医院校中,中医药学教学的实际效果并不理想,其原因是多种多样的,但其中最重要的原因是教学理念和学生学习思路没有转变,而是延续西医的教学思路和学习方法造成的。针对目前中医药教学过程中存在的问题,可以从转变教学思路,加强学生对中医理论的认知及培养中医思路等方面入手,改善西医院校中医药学教学的方法,提高教学效果。本文就西医院校中医药学教学的改革进行了探索及创新。

NDRG2通过影响CD24调控肝癌细胞黏附能力的机制研究

目的阐明NDRG2(N-Myc downstream-regulated gene 2)在肝癌细胞中对CD24的调控及其对肝癌细胞黏附能力的影响。方法 real-time PCR检测低转移性的肝癌细胞系Huh7、高转移性肝癌细胞系MHCC97H及人正常肝细胞系L-02中NDRG2和CD24的表达;通过腺病毒上调MHCC97H细胞中NDRG2的表达,或利用siRNA下调Huh7细胞中NDRG2的表达,检测CD24基因变化。黏附实验检测改变NDRG2表达水平后对MHCC97H及Huh7细胞黏附能力的影响。结果 MH-CC97H细胞中NDRG2基因表达水平低于Huh7细胞,而CD24的表达水平高于Huh7细胞;在MHCC97H细胞中通过腺病毒载体上调NDRG2可以抑制CD24的表达并抑制其黏附能力,而在Huh7细胞中利用siRNA下调NDRG2的表达可以提高CD24的水平及细胞的黏附能力。结论 NDRG2通过影响CD24参与调控肝癌细胞的黏附能力。

中药提取物榄香烯在镇痛作用中的研究进展

榄香烯(Elemene)是从我国传统中草药莪术中提出来的倍半萜烯类化合物,其不仅具有较强的抗肿瘤活性,并且对各种疾病导致的疼痛均显示出较好的治疗效果。研究表明,榄香烯镇痛效果明显,不良反应较少,相较于非甾体抗炎药(NSAIDs)易引发的胃肠道出血、过敏以及阿片类药物易导致成瘾的问题优势明显,因而具有很高的临床应用价值。近年来的研究结果显示,榄香烯镇痛的机制是多方面的,包括多途径、多通路、多靶点,镇痛效果显著。另外,将榄香烯与其他药物或者镇痛方式联合使用可以有效缓解各类疼痛给患者带来的痛苦,显著提高患者的生命质量。因此,通过对榄香烯既往的镇痛研究进行总结回顾,在与传统镇痛药物疗效和不良反应对比的同时,凸显出榄香烯在治疗慢性疼痛中的巨大潜力,并希望推动其进一步研究,为临床镇痛药物的合理选择提供参考。

培美曲塞联合β-榄香烯对宫颈癌 HeLa 细胞增殖和凋亡的影响

目的培美曲塞和β-榄香烯均可抑制肿瘤细胞的生长。文中探讨培美曲塞联合β-榄香烯对宫颈癌HeLa细胞增殖和凋亡的影响。方法体外培养宫颈癌HeLa细胞,将培美曲塞(浓度为38、76、152、228、304μg/m L)单独作用于HeLa细胞后24、48 h用MTT比色法检测细胞的增殖情况,实验分β-榄香烯组(125μg/m L)、培美曲塞组(76μg/m L)、联合用药组(培美曲塞76μg/m L,β-榄香烯125μg/m L)及空白对照组(0μg/m L),24 h后用MTT法检测细胞的增殖情况,用流式细胞术检测24 h细胞的凋亡率。结果 MTT法显示,培美曲塞浓度在38、76、152、228、304μg/m L梯度范围内对HeLa细胞有抑制作用,随浓度增加,抑制率增强。38、76、152、228、304μg/m L的培美曲塞作用24后,增殖抑制率分别为(7.24±3.78)%、(7.94±4.37)%、(11.10±2.86)%、(15.88±3.38)%、(16.52±2.54)%;其中38、76、152、228μg/m L培美曲塞抑制率两两比较的差异有统计学意义(P<0.05)。联合用药组24 h抑制率[(49.95±5.76)%]高于β-榄香烯组[(24.36±5.59)%]和培美曲塞组[(10.69±1.37)%],差异有统计学意义(P<0.01)。结论培美曲塞与β-榄香烯联合应用可抑制HeLa细胞的增殖,协同促进HeLa细胞的凋亡。

凉血活血方对宫颈癌SiHa细胞抑制作用的研究

目的:探讨不同浓度的凉血活血方对宫颈癌SiHa细胞增殖和凋亡的影响。方法:体外培养宫颈癌SiHa细胞,选取合适的细胞数进行铺板,将凉血活血方(浓度为1.125、2.228、3.31、4.37、5.41 mg/ml)作用于SiHa细胞24 h、48 h,MTT及CCK-8法检测细胞的增殖情况;流式细胞仪检测药物作用24 h细胞的凋亡率,并用光镜观察此时的细胞状态;蛋白免疫印迹法(Western-blot)检测药物(浓度为1.125、2.228、3.31 mg/ml)作用24 h后Bcl-2及Bax的表达情况。结果:MTT及CCK-8结果显示:药物作用24 h,除1.125 mg/ml外,其余浓度的增殖抑制率均明显高于空白对照组(P<0.05),并随药物浓度的增加而升高(P<0.05);药物作用48 h,除MTT中1.125 mg/ml外,其余各浓度的抑制率均明显高于空白对照组(P<0.05)。光镜下观察显示:除1.125 mg/ml外,其余组可见细胞的体积变小、变形,皱缩、变圆等凋亡形态。细胞凋亡结果显示:各浓度的凉血活血方均可促进SiHa细胞凋亡。Western-blot结果显示:除1.125 mg/ml外,其余浓度可使Bcl-2/Bax的比值下调。结论:一定浓度的凉血活血方能抑制宫颈癌SiHa细胞增殖,并促进其凋亡,其机制可能与Bcl-2/Bax的比值下调有关。

基于转录组测序技术研究慢性避水应激对大鼠腰膨大脊髓背角中基因表达的影响

目的探讨慢性避水应激对大鼠腰膨大处脊髓背角中基因表达的影响。方法24只SPF级健康雄性SD大鼠随机分成两组:对照组和慢性避水应激组(CWAS组),每组12只。造模结束后,利用旷场实验(OFT)评价大鼠焦虑行为,并使用腹壁撤退反射(AWR)分别在20,40,60,80 mmHg四个压力等级处观察大鼠行为学反应评价其内脏敏感性。最后,安乐死大鼠并取腰膨大处的脊髓背角,进行真核转录组RNA建库及测序。结果①OFT结果表明,CWAS组的中央区路程百分比和中央区活动时间百分比均显著低于对照组(P<0.01)。②与对照组相比,CWAS组在20,40,60,80 mmHg压力下的AWR评分显著增加(P<0.05)。③转录组学测序显示,与对照组相比,CWAS组有11个基因发生了上调,分别是Retsat、Sgk1、Zbtb16、Cdkn1a、Nfkbia、Capg、Apold1、Gpd1、Pdk4、Ctgf和Tnfrsf11a;KEGG富集分析表明,CWAS组的PI3K-Akt、FoxO、NF-κB和破骨细胞分化相关信号通路被激活。结论慢性避水应激能促使大鼠产生焦虑样行为改变,可显著增加内脏敏感性并引起脊髓背角中基因表达和信号通路的改变。

凉血活血与益气活血中药对放射性肺损伤大鼠模型不同部位血流情况的影响

目的研究凉血活血方与益气活血方对不同时期放射性肺损伤大鼠不同部位血流情况的影响及两方剂所含成分分析。方法80只SD大鼠,随机分成4组:照射组、照射+凉血活血组、照射+益气活血组和空白对照组,每组20只。除空白组外,其余各组大鼠以6 MV-X线经背部照射右肺,单次3 Gy,每周照射2次,连续照射5周,最高累积剂量30 Gy,建立放射性肺损伤模型;于照射开始时,凉血活血组和益气活血组同步灌胃给药,每日一次;模型组和空白组给予同等体积生理盐水;分别于照射开始后第12周、第26周对大鼠各部位(耳背、背侧胸部、腹侧胸部及腹部)的血流情况进行采集。通过液质联用技术对凉血活血和益气活血方药中所含成分进行解析鉴定。结果与空白对照组比较,在放射性肺损伤急性期,模型组大鼠背侧胸部及腹侧胸部血流量均显著升高(P<0.01)。在背侧胸部,与模型组相比,凉血活血组和益气活血组急性期大鼠的血流量均显著降低(P<0.01),且凉血活血组效果优于益气活血组(P<0.01);在腹侧胸部,与模型组相比,凉血活血组急性期大鼠腹侧胸部血流量显著降低(P<0.01),耳背部和腹侧腹部各组间无明显统计学差异。液质联用技术鉴定表明,在mzCloud数据库中,凉血活血方共匹配到564个化合物,254个化合物综合评分大于70;益气活血方共匹配到188个化合物,139个化合物综合评分大于70。在两方中,评分大于92分且共有的成分是汉黄芩素、18-β-甘草次酸、洋川芎内酯H、麦芽四糖、齐墩果酸等成分。结论凉血活血方和益气活血方均可改善急性放射性肺损伤大鼠背侧胸部的血流变化,且凉血活血方更具有一定优势;通过液质联用技术可进一步分析鉴定两方药所含成分的区别,为临床运用及进一步研究提供参考。

中医药治疗骨转移癌痛的进展

疼痛是肿瘤骨转移患者难以忍受的症状之一,具有顽固性、持续性、进行性加重等特点,发病机理尚不明确。西医治疗方案以三阶梯止痛药为主,联合放化疗等个性化治疗;中医治疗包括中药口服、中药外敷、针灸、穴位贴敷、中药注射、埋线等多种方式,起到活血化瘀止痛等功效。且中医治疗价廉惠民、无成瘾性、操作便捷、毒副反应少,因此成为骨转移癌痛治疗的研究热点。中西医联合用药可增强止痛效果,实现优势互补,且作用持久,明显提升患者生活质量。本文综述了骨转移癌痛的中医治疗进展,为后续研究提供参考。

凉血活血方对卵巢癌SKOV3细胞的凋亡作用及机制

目的探讨凉血活血方对卵巢癌SKOV3细胞的凋亡作用及其机制。方法将凉血活血方药液(浓度为1.125,2.228,3.31,4.37,5.41 mg·m L^(-1))作用于体外培养的SKOV3细胞,采用MTT法观察24 h及48 h细胞增殖的情况。流式细胞术观察凉血活血方对SKOV3细胞凋亡的影响;应用Western bolt法检测细胞中凋亡蛋白caspase-3的表达情况。结果 1MTT结果表明不同浓度药物作用于细胞24 h,48 h后实验组对细胞的抑制率均高于空白对照组(P<0.05);2凋亡结果显示2.228,4.37,5.41 mg·m L-1实验组凋亡率均高于空白对照组(P<0.05);3Western bolt显示各实验组蛋白样品中caspase-3的表达高于空白对照组(P<0.05)。结论一定浓度的凉血活血方能够抑制SKOV3细胞的增殖,促进其凋亡,其机制是通过上调caspase-3的表达实现的。

丹参川芎嗪联合生脉注射液对肝星形细胞LX-2增殖和凋亡的影响

目的观察丹参川芎嗪注射液联合生脉注射液对肝星形细胞LX-2增殖和凋亡的影响。方法取对数生长期的LX-2细胞,接种于96孔板(1. 0×10~5/ml),分为实验组和空白对照组。实验组分别设置5个药物浓度梯度:丹参川芎嗪注射液(浓度为1,2,4,8,16μl/ml)和生脉注射液(浓度为0. 6,1. 2,2. 4,4. 8,6μl/ml)。药物作用24 h和48 h,用CCK-8法检测细胞增殖情况。选择丹参川芎嗪注射液1μl/ml和生脉注射液4. 8μl/ml联合作用于LX-2细胞24 h和48 h,用CCK-8法检测细胞增殖情况,用流式细胞仪检测用药24 h的细胞凋亡情况。结果丹参川芎嗪注射液作用24 h,除1,2μl/ml外,其余浓度对LX-2细胞的抑制率高于对照组(P <0. 05),抑制率分别为13. 21%,25. 74%,31. 86%。丹参川芎嗪作用48 h,除1μl/ml,其余浓度对LX-2细胞的抑制率高于对照组(P <0. 05),抑制率分别为16. 40%,28. 50%,31. 82%,37. 20%。生脉注射液作用LX-2细胞24 h,除0. 6,1. 2μl/ml外,其余浓度对LX-2细胞的抑制率高于对照组(P <0. 05),抑制率分别为14. 87%,20. 30%,31. 16%;药物作用48 h,除0. 6,1. 2μl/ml外,其余浓度对LX-2细胞的抑制率高于对照组(P <0. 05),抑制率分别为14. 08%,34. 13%,77. 82%。联合用药24 h,联合用药组和生脉注射液(SMI)组对LX-2细胞的抑制率高于空白对照组(P <0. 05),且联合用药的效果要好于丹参川芎嗪和生脉注射液单独用药(P <0. 05);联合用药48 h,联合用药组,生脉注射液(SMI)组和丹参川芎嗪(SML)组对LX-2细胞的抑制率高于空白对照组(P <0. 05),且联合用药的抑制率要高于丹参川芎嗪单独用药(P <0. 05)。结论一定浓度的丹参川芎嗪注射液和生脉注射液均能抑制LX-2细胞的增殖,联合用药24 h,其对LX-2细胞的抑制率高于丹参川芎嗪注射液和生脉注射液单独用药。

院方制剂新法蛋珍油中所含成分的液质联用解析鉴定

目的:通过液质联用技术对新法蛋珍油中所含成分进行解析鉴定。方法:利用乙醇和石油醚3∶1的比例萃取干燥蛋黄粉制得蛋黄油,并按照原方蛋黄油与珍珠粉10∶0.5配比,制得新法蛋珍油。运用液质联用技术对新法蛋珍油中所含成分进行解析鉴定,并在mzCloud、mzVault等数据库中进行检索比对。结果:新法蛋珍油在mzCloud中共匹配到126个化合物,mzVault中共匹配到81个化合物,其中mzCloud中67个化合物综合评分大于70分。结论:该方法操作简便,可为临床运用及进一步研究提供参考。

多学科协同护理对阿尔茨海默病患者干预效果的Meta分析

目的评价多学科协同护理对阿尔茨海默病(AD)患者干预的效果。方法检索Pubmed、EMbase、Cochrane Library、中国知网(CNKI)、万方和维普等数据库中关于多学科协同护理对AD患者干预效果的随机对照研究,分析其对日常生活能力、智力状况、认知功能及神经精神评分的影响。采用Review Manager 5.4软件进行Meta分析,采用Stata 16.0软件进行敏感性分析。结果共纳入7篇文献,731例AD患者,其中常规护理组353例,多学科协同护理组378例。Meta分析结果显示:多学科协同护理干预6个月后可显著改善AD患者的日常生活能力[SMD=2.64,95%CI(0.68,4.60),P=0.008],但只有当干预时间达到12个月才能显著改善AD患者的智力状况[SMD=1.08,95%CI(0.23,1.94),P=0.01];对于认知功能,所纳入的2篇文献均提示多学科协同护理可显著提高AD患者的认知功能[SMD=1.98,95%CI(-3.13,-0.83),P=0.0007]。在神经精神方面,所纳入的2篇文献干预时间均为12个月,结果显示:多学科协同护理并不能显著改善患者的神经精神评分[SMD=-0.27,95%CI(-0.74,0.20),P=0.26]。结论多学科协同护理可有效改善AD患者的日常生活能力和认知功能。