从设计一堂好课开始参与职业教育课程教学改革

从职业教学改革的微观层面,结合近年来所从事的专业建设和实践教学工作经验,以怎样设计一堂适合职业教育的课程为主线,与同处于职业教育一线的教师一起探讨职业教育教学改革的一些基本原则,以期抛砖引玉,唤起广大一线教师参与职业教育课程教学改革的热情。

荧光光谱法测定硫酸庆大霉素注射液的含量

本文报告了以乙酰丙酮、甲醛为荧光衍生试剂，建立了测定硫酸庆大霉素注射液含量的荧光光谱法。激发波长４２２ｎｍ，荧光波长４８２ｎｍ。硫酸庆大霉素浓度在０～６ＩＵ／ｍｌ范围内与荧光强度成线性关系（ｒ＝０．９９９７），平均回收率为１０１．１～１０２．０％，ＲＳＤ在１．５％以下。本法操作简便、灵敏，试剂价廉易得，适用于硫酸庆大霉素注射液的含量测定。

TRIM8基因在小鼠组织和早期胚胎中的表达及其功能初探

【目的】研究TRIM8基因在小鼠组织和早期胚胎中的表达情况及其沉默后对早期胚胎体外发育的影响。【方法】采用RT-PCR、免疫印迹分别检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织(心、肝、脾、肺、肾、胃、肠、肌肉、子宫、卵巢和睾丸)中的表达情况,采用免疫组化技术对TRIM8在卵巢中进行定位。利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)、免疫印迹法检测TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠早期胚胎(1-细胞胚胎、2-细胞胚胎、4-细胞胚胎、8-细胞胚胎、桑葚胚和囊胚)中的表达规律,用免疫荧光结合激光共聚焦显微镜技术对TRIM8在早期胚胎中进行定位。利用RNA干扰技术沉默TRIM8基因,研究该基因沉默对小鼠早期胚胎体外发育的影响。【结果】TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠不同组织中均表达,但在子宫、卵巢和睾丸中表达水平相对较高。在卵巢中,TRIM8蛋白主要定位在不同发育阶段的卵母细胞中。TRIM8基因及其编码的蛋白在早期胚胎中均有表达,但其mRNA表达水平在1-细胞到4-细胞期胚胎中的表达水平显著高于8-细胞到囊胚期胚胎。TRIM8蛋白主要定位在不同时期胚胎的胞质中。TRIM8基因沉默组的囊胚率显著低于对照组(P<0.05)。【结论】TRIM8基因及其编码的蛋白在小鼠各组织及早期胚胎中均有表达,主要定位在早期胚胎的胞质中;沉默TRIM8基因会显著降低囊胚发育率。TRIM8可能参与调控小鼠早期胚胎的发育进程。

褪黑素在动物机体中的多重作用

褪黑素是一种由脊椎动物的松果体合成和分泌的内源性吲哚类激素,该激素可以淡化生成黑色素细胞的颜色,由此被命名褪黑素。随着研究发现动物机体中除松果体外还有许多器官也可分泌褪黑素,因此展开了对褪黑素在动物机体各个系统的研究。在所有的组织中褪黑素都是由色氨酸为原料合成的,褪黑素主要通过依赖受体介导和非受体介导途径在体内发挥作用。此外,最新研究发现褪黑素可作为调控因子通过表观遗传修饰发挥作用。本文主要综述了褪黑素在动物体内的生物合成和代谢、调节昼夜节律、抗氧化、促生殖、调节免疫和消化系统、以及在表观遗传和其他方面的功能,以期为深入研究褪黑素的多重功能和潜在的分子机制提供参考和借鉴。

YWHA蛋白在哺乳动物生殖中的作用研究进展

酪氨酸3-单加氧酶/色氨酸5-单加氧酶激活蛋白(Tyrosine 3-Monooxygenase/Tryptophan 5-Monooxy genase Activation Protein,YWHA)家族具有多种生理功能,主要通过调控靶蛋白活性参与调节细胞周期、信号转导、细胞凋亡和细胞代谢等重要生命活动。YWHA家族蛋白高度保守,广泛表达于从植物到动物的各种真核生物中。哺乳动物中存在7种YWHA亚型,分别由不同的基因编码。本文综述了YWHA蛋白结构、在哺乳动物生殖方面以及生殖系统疾病中的功能,为阐明YWHA蛋白在哺乳动物配子发生和生殖过程中的功能提供参考和借鉴。

YWHAZ在小鼠早期胚胎发育过程中的作用

为了探究YWHAZ蛋白在小鼠早期胚胎发育过程中的表达、定位和作用,本试验利用RT-PCR和Western blot方法检测Ywhaz基因及其编码蛋白在小鼠早期胚胎发育中的表达;利用免疫荧光技术检测YWHAZ蛋白在小鼠早期胚胎发育过程中的定位;使用特异性的siRNA沉默合子中的Ywhaz,在胚胎发育的1.5,2.5,3.0,3.5,4.5,5.0 dpc分别观察2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚的发育率,阐明在合子中沉默Ywhaz基因对小鼠早期胚胎发育的影响。结果显示,Ywhaz mRNA及其编码蛋白在小鼠1-细胞、2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚中均有表达,YWHAZ蛋白定位在小鼠早期胚胎的细胞质和细胞核中。Ywhaz沉默组的2-细胞、4-细胞、8-细胞、桑葚胚和囊胚的发育率均极显著低于对照组(P<0.01),沉默组5.0 dpc囊胚率显著高于其4.5 dpc囊胚率(P<0.05)。结果表明,Ywhaz mRNA及其编码的蛋白在小鼠早期胚胎中有表达,其蛋白主要定位在早期胚胎的细胞核和细胞质中;在合子中沉默Ywhaz基因可导致小鼠早期胚胎发育率降低且存在明显的胚胎发育延迟现象。

猪睾丸组织的形态学观察、细胞凋亡和巴豆酰化修饰

制作睾丸组织切片,运用HE染色和细胞TUNEL染色分别观察不同发育阶段猪睾丸的形态学和细胞凋亡;提取睾丸组织蛋白,利用免疫印迹检测不同发育阶段猪睾丸蛋白的Kcr修饰水平;最后利用免疫荧光技术检测Kcr蛋白在猪睾丸组织中的定位。结果显示,随着月龄的增长,猪睾丸精细管管腔直径增加,睾丸组织在4月龄时精细胞开始分裂,凋亡细胞开始显著增加;睾丸细胞中有大量蛋白发生Kcr修饰,大部分蛋白的Kcr修饰水平会随着月龄的增加而减少;免疫荧光结果显示在猪睾丸间质细胞、足细胞和生精细胞中都能检测到Kcr蛋白定位。试验表明,在猪睾丸发育过程中,4月龄时精细胞开始分裂,凋亡细胞显著增加,大部分蛋白Kcr修饰水平有下降趋势且主要定位在睾丸体细胞和生精细胞中。