细胞外基质对体外培养心肌细胞铺展作用的影响

本研究用分离的新生大鼠心肌细胞,观察不同的细胞外基质,在培养不同时间对心肌细胞铺展的影响。结果表明,不同的细胞外基质影响心肌细胞铺展,在培养8小时即出现差别,48小时差异明显,其中FN促进心肌细胞铺展,而FN的片段延缓心肌细胞的铺展。

机械性刺激对体外培养心肌细胞形态的影响

体外培养新生大鼠心肌细胞于硅胶片上,进行周期性、机械性刺激,观察物理刺激对心 肌细胞形态的影响。结果表明,当用10％幅度拉长、松弛硅胶片,10周期/分,进行72小时机械性运动后,心肌细胞发生形态改变,其细胞内肌动蛋白垂直于运动方向,说明机械性刺激能影响体外培养心肌细胞形态。

纤维连结蛋白与疾病

纤维连结蛋白(FN),为大分子糖蛋白。分血浆型FN(PFN)与细胞表面型FN(CFN)。可由多种细胞产生,广泛存在于基膜和疏松结缔组织中。在基质内,不仅对细胞起支架作用,而且还具有多种功能。如FN具有粘连、细胞外骨架、生长控制、细胞分化等作用。FN还具有促吞噬功能,在炎症申起修复作用。在纤维化的病理过程中,其作用也相当复杂。如在肾小球玻璃病变,类风湿性关节炎、克隆氏病、动脉硬化斑、硬皮病时FN增多。FN与肝病关系密切,慢性肝炎时升高,肝硬化及暴发性肝炎时下降,并影响巨噬细胞吞噬功能,易发生感染与内毒素血症。恶性肿瘤时FN消失,使肿瘤易于恶变与转移。

丹参防治实验性急性肝损伤机制的研究

给Ｗｉｓｔａｒ大鼠注射硫代乙酰胺，引发肠源性内毒素血症，血浆肿瘤坏死因子－α升高，进一步介导肝损伤。给丹参煎剂后，发现血浆肿瘤坏死因子－α下降，同时血浆ＡＬＴ和肝损伤面积减少，与肝损伤组相比有显著性差异。提示肿瘤坏死因子－α在肝损伤中起重要作用。丹参防治肝损伤的机理之一可能是通过减少肿瘤坏死因子－α的合成而发挥作用。

丹参在抗肝细胞坏死中的钙拮抗作用

本工作在大鼠口服CCL_4所致肝细胞坏死模型上,比较了丹参与钙拮抗剂异搏定和扩血管药酚妥拉明对肝坏死的保护作用。结果发现,CCl_4引起的肝组织坏死与肝组织钙含量呈正相关(r=0.887,P<0.01)。丹参和异搏定使肝组织坏死程度减轻,肝组织钙含量减少,血浆GPT活性下降,肝组织匀浆MDA含量降低,细胞色素P-450活性升高。酚妥拉明组与损伤对照组比较,各项指标无明显差异。上述结果提示,丹参的作用效果优于异搏定。丹参抗CCl_4所致的肝细胞坏死井非通过扩血管作用,而是发挥其钙拮抗作用实现的。

内毒素诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病的实验研究

目的：观察外源性内毒素诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病的可能性及可能机制。方法：采用腹腔内小剂量内毒素一次性注射（３００μｇ／１０ｇＢＷ）诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病。结果：小剂量内毒素腹腔内注射可以诱发肝硬化大鼠发生肝性脑病。内毒素注射后，动物一般行为状态及脑电图皆有明显变化，与其他肝性脑病模型或肝性脑病病人类似。同时，血氨和胰高血糖素水平显著升高。血浆内毒素含量与血氨、血胰高血糖素含量之间及血氨与血及脑匀浆谷氨酰胺含量之间皆存在明显的正相关。结论：内毒素血症可通过其本身的直接作用或通过胰高血糖素血症导致血氨水平的增高。高氨血症时，氨很可能通过其在脑内的代谢产物－谷氨酰胺而最终影响中枢神经系统的功能、导致脑病的发生。高氨血症是内毒素诱发肝性脑病发生的主要环节之一。

TNF-α在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治机制研究

目的：研究肿瘤坏死因子－α（ＴＮＦ－α）在肠源性内毒素血症中的作用及丹参防治肝损伤机制。方法：用硫代乙酰胺（ＴＡＡ）诱发大鼠急性肝损伤，检测血浆内毒素、ＴＮＦ－α及丙氨酸氨基转移酶（ＡＬＴ）水平变化，并与丹参治疗组进行比较。结果：ＴＡＡ诱发急性肝损伤大鼠血浆内毒素及ＴＮＦ－α含量升高，二者呈正相关；血浆ＡＬＴ亦升高，与ＴＮＦ－α亦呈正相关。丹参治疗组大鼠血浆ＴＮＦ－α及ＡＬＴ水平均低于肝损伤对照组。结论：ＴＡＡ引起肠源性内毒素血症，内毒素促进ＴＮＦ－α释放，ＴＮＦ－α进一步介导肝损伤。

酒精刺激对枯否细胞清除LPS功能的影响

目的和方法：应用免疫荧光及免疫电镜技术，对慢性酒精投与之实验大鼠及重症酒精性肝炎患者肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能进行了观察。结果：经门静脉注射ＬＰＳ１０ｍｉｎ后，Ｌｉｅｂｅｒ’ｓ酒精饮食投与６周之大鼠肝脏枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色低于正常大鼠，电镜下枯否细胞内抗ＬＰＳ阳性颗粒少见，而肝窦壁内皮细胞及肝细胞内抗ＬＰＳ阳性物增多。重症酒精性肝炎患者肝穿组织枯否细胞内抗ＬＰＳ荧光显色亦显著低于正常对照。结论：酒精刺激后肝脏枯否细胞对ＬＰＳ的清除功能降低。

暴发性肝衰竭血脑屏障通透性改变对肝性脑病发生发展的影响

采用硫代乙酰胺所致大鼠暴发性肝衰模型，以脑组织浸泡液中Ｅｖａｎｓ蓝含量为血脑屏障通透性指标。结果表明，在肝性脑病初期血脑屏障通透性就已增加，至脑病晚期则明显增加，并伴脑水肿发生，脑组织浸泡液中Ｅｖａｎｓ蓝含量与血浆内毒素呈正相关。以上结果提示，暴发性肝衰竭时，肝性脑病发生发展与内毒素所致血脑屏障通透性增加密切相关。

密度法测定脑组织含水量

脑组织含水量测定目前普遍采用干燥称重法。这种办法比较费时,且影响因素较多,精确性较差。国外学者应用高纯度煤油与溴苯制备密度梯度密度法测定脑组织含水量。

急性肝衰竭时肾功能障碍发生机理的探讨

本实验研究了半乳糖胺所致急性肝衰时内毒素血症和肾功能障碍的关系以及丹参的防治作用。实验结果表明、半乳糖胺所致肝衰的动物均伴有内毒素血症的发生、肾功能明显异常(Pcr,BUN升高,Ccr,UV,U_(Na)V降低,FE_(H2O),FE_(Na)增高)。经丹参治疗后内毒素血症明显减轻,肾功能也随之明显改善,从而提示内毒素血症和肾功能障碍密切相关。本实验结果证明,内毒素血症在肝肾综合征的发生,发展中是一个重要致病因素;丹参对肝肾综合征具有明显的防治作用。此外,半乳精胺所致肝衰竭模型同时也可用于肝肾综合征发病机理与防治的研究。

肝硬化时内皮素对肾功能的影响

目的：探讨肝硬化时肠源性内毒素血症（ＩＥＴＭ）和血浆内皮素（ＥＴ）在肾功能障碍中所起的作用。方法：采用鲎试剂基质显色法定量测定内毒素，用放射免疫法测定ＥＴ，常规生化法测定血肌酐，同时留２４小时尿液测定尿肌酐与尿钠。采用复合病因复制肝硬化模型。结果：肝硬化患者血浆内毒素水平随肝硬化病变加重而升高，内毒素水平在肝硬化伴功能性肾衰患者中（２０６±１５１ＥＵ／ｍＬ）明显高于肝硬化代偿期（０３２±０２０ＥＵ／ｍＬ）与失代偿期伴腹水（０７３±０２９ＥＵ／ｍＬ），并与肌酐清除率（ＣｒＣｌ），尿钠排泄呈负相关。肝硬化鼠血浆内毒素与肾组织ＥＴ含量（分别０２８±００４ＥＵ／ｍＬ，４６２±０７９ｎｇ／ｇ）明显高于对照组（分别０１４±００２ＥＵ／ｍＬ，２４８±１８８ｎｇ／ｇ），两者呈正相关。结论：ＩＥＴＭ在诱发象征肝功衰竭的ＦＲＦ中起重要作用；

一氧化氮在实验性肝损伤中的作用

目的：观察３ 种细胞因子对体外培养大鼠肝细胞产生一氧化氮（ ＮＯ） 的影响及ＮＯ 在实验性肝损伤中的作用。方法与结果：给大鼠注射内毒素后分离肝细胞，培养液中加入细胞因子（γ－ ＩＦＮ，ＩＬ－ ２ ，ＴＮＦ－ α） ，上清液中ＮＯ 含量增加，两种以上细胞因子联合应用，ＮＯ 含量增加更明显；大鼠注射内毒素及Ｌ－ 精氨酸，血清中ＮＯ 含量增加，肝损伤减轻；大鼠给硫代乙酰胺（ＴＡＡ） 灌胃，并注射ＮＯ 生成抑制剂Ｌ－ ＮＮＡ，动物出现嗜睡及肝昏迷脑电图，血浆ＬＤＨ、Ｃｒ升高。结论：内毒素及细胞因子促进ＮＯ 合成，ＮＯ 在内毒素诱发的肝损伤及ＴＡＡ 致肝功能不全中具有对抗作用。

暴发性肝损伤肝性脑病大鼠脑糖胺多糖含量的变化

本文应用硫代乙酰胺灌胃复制暴发性肝损伤肝性脑病大鼠模型,检测了实验大鼠大脑、脑干、小脑糖胺多糖含量的变化。结果表明肝性脑病发生时大脑、脑干糖胺多糖含量较正常大鼠显著降低,而小脑糖胺多糖含量并无变化。说明肝性脑病发生时大脑及脑干部位伴有糖胺多糖的变化,提示肝性脑病的发生与脑内神经细胞外基质成份糖胺多糖等的变化有关。

暴发性肝衰竭晚朝大鼠血液流变学变化与内毒素血症的研究

应用硫代乙酰胺灌胃复制暴发性肝衰竭大鼠模型，测定了肝衰竭晚期大鼠和正常大鼠血液流变学指标的变化及血浆内毒素含量。结果表明，暴发性肝衰竭晚期大鼠红细胞变形性与正常对照比较无明显差异，但红细胞的聚集指数、血浆粘度、全血粘度及血浆内毒素含量均显著高于正常对照组，且全血粘度的变化与血浆内毒素水平呈负相关。提示暴发性肝衰竭晚期伴有血液流变功能紊乱，且与内毒素血症相关。

绝经后妇女取环术联合米索前列醇片口服的临床治疗效果

目的研究绝经后妇女取环术联合口服米索前列醇片的临床疗效。方法选取2012年4月~2015年4月在我院行取环术的绝经妇女66例,随机分为对照组和观察组,每组33例。对照组直接行取环术,观察组在术前口服米索前列醇片。观察两组患者手术的时间、宫颈软化的程度以及取环的结果。结果观察组的手术时间短于对照组（P〈0.05）,宫颈软化率和取环成功率均高于对照组（P〈0.05）。结论绝经后妇女取环术联合口服米索前列醇片,缩短了手术时间,提高了宫颈软化率和取环成功率,效果显著。

丹参对实验性肝硬化细胞外基质含量的影响

采用复合病因复制肝硬化动物模型,经丹参治疗后,观察肝脏细胞外基质含量的变化。结果表明,丹参可降低血清透明质酸含量;免疫组化经图像分析仪定量测定表明丹参可降低肝内纤维连接蛋白与层连蛋白含量;同时可降低肝内胶原蛋白的含量,使肝纤维化程度明显减轻。

实验性急性肝衰竭时门脉高压发生机制的研究

目的：阐明急性肝衰竭时门脉高压的发生与肠源性内毒素血症和肝内微循环障碍的关系。方法：动态观察皮下注射硫代乙酰胺大鼠门脉血流动力学、血浆内毒素、内皮素－１、肿瘤坏死因子－α及台盼蓝肝脏原位灌流等。结果：随着给注射时间的延长，血浆内毒素水平、ＡＬＴ和ＬＤＨ明显升高，血浆及肝组织ＴＮＦ－α和ＥＴ－１显著增多，台盼蓝灌流时间明显延长。肝组织可见肝窦直径显著变窄，肝细胞肿胀变性坏死使肝窦被挤压。结论：肠源性内毒素血症及其引发的肝微循环障碍在急性门脉高压形成中具有重要作用。