医学大学生创新性实验项目的实践与思考

大学生创新训练计划是培养大学生创新能力、创新思维、创新精神、科研能力等综合能力的重要途径。越来越多的师生热衷于大学生创新训练计划项目,但是全国还未形成一套标准的培养方案。该团队拥有多年指导医学大学生创新训练计划项目的经验,从大学生创新训练计划项目的宣传、团队组建、课题来源、标书的撰写、培训、项目开展与汇报以及结题与后续支持等方面总结了经验和不足,并提出一套完整的大学生创新训练计划培养方案,为医药高校团队或教师指导医学大学生创新性实验提供参考。

RPRD1B对三阴性乳腺癌细胞生物学功能及上皮间质转化的影响

目的探讨核前mRNA结构域调节因子1B(RPRD1B)对三阴性乳腺癌(TNBC)细胞增殖、凋亡、侵袭、迁移及上皮间质转化(EMT)的影响。方法免疫组化检测RPRD1B在三阴性乳腺癌组织和癌旁组织的表达水平,Western blot检测三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和HCC-1937中RPRD1B的表达水平。三阴性乳腺癌细胞系MDA-MB-231和HCC-1937分别用sh-RPRD1B慢病毒(sh-RPRD1B组)和sh-NC慢病毒(sh-NC组)感染,然后检测下调效率;CCK-8法检测细胞增殖能力,流式细胞术检测细胞凋亡水平,Transwell实验检测细胞侵袭能力,划痕实验检测细胞迁移能力,Western blot和qRT-PCR法检测敲低RPRD1B对三阴性乳腺癌细胞中上皮间质转化标志性蛋白E-cadherin和N-cadherin的影响。结果RPRD1B在三阴性乳腺癌组织和三阴性乳腺癌MDA-MB-231细胞系和HCC-1937细胞系中均表达。CCK-8结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组MDA-MB-231和HCC-1937细胞增殖能力显著降低(P<0.01)。流式细胞术结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞凋亡率显著上升(P<0.01)。Transwell结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞侵袭能力显著降低(P<0.01)。划痕实验结果显示,与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞迁移能力显著降低(P<0.01)。与sh-NC组比较,sh-RPRD1B组细胞上皮间质转化标志分子E-cadherin表达水平升高,N-cadherin表达水平降低。结论敲除RPRD1B表达使三阴性乳腺癌细胞的凋亡能力增强而增殖能力减弱,其侵袭和迁移能力的减弱可能与上皮间质转化过程相关。

三阴性乳腺癌术后骨转移与血清PRL、IL-1β以及BSP表达之间的关联探索

为了分析三阴性乳腺癌切除术后骨转移与血清泌乳素(PRL)、白细胞介素(IL)-1β及骨唾液酸蛋白(BSP)关系,回顾分析三阴性乳腺癌患者的病例。结果显示,术后,发生骨转移患者的血清PRL、IL-1β及BSP水平均显著升高,血清PRL、IL-1β及BSP水平在不同年龄骨转移患者中存在显著差异,且PRL与IL-1β,IL-1β与BSP,PRL与BSP水平间均呈正相关。结果说明,三阴性乳腺癌切除后发生骨转移与年龄因素有关,血清PRL、IL-1β及BSP与三阴性乳腺癌切除后骨转移呈正相关。

Slit-Robo信号对口腔癌Tb细胞增殖作用的影响

目的:探讨SlitRobo信号对人舌鳞状上皮癌细胞系Tb细胞生长与增殖的影响及其作用机制。方法:采用Westernblot免疫印迹法检测Tb细胞中Slit和Robo蛋白的表达;在Robo1受体胞外区的单克隆抗体R5作用下,以MTT比色法与平板克隆形成实验观察Tb细胞生长变化及用免疫组化检测增殖相关蛋白PCNA的表达。结果:Tb细胞表达Slit和Robo蛋白;在R5抗体的作用下,Tb细胞体外生长能力受到抑制,增殖能力明显减弱,PCNA蛋白表达水平下降。结论:SlitRobo信号能够调控Tb细胞的生长增殖能力,对肿瘤细胞内的PCNA有正调控作用,提示该信号可能参与了口腔肿瘤的发生、发展过程。

5-氟脲嘧啶对口腔癌Tb细胞增殖活性及钾通道功能的影响

目的:观察5-氟脲嘧啶(5-FU)对口腔癌Tb细胞增殖活性以及钾离子通道功能的影响,进一步揭示5-FU的抗肿瘤机理,并初步探讨钾离子通道与肿瘤细胞增殖的关系。方法:以5-FU作用Tb细胞24h后,应用MTT比色法与平板克隆形成实验观察Tb细胞的增殖活性,同时以全细胞膜片钳技术检测Tb细胞膜电位与跨膜钾电流的改变。结果:与空白对照组相比,5-FU能明显抑制Tb细胞的增殖活性,并且可使细胞膜电位发生去极化改变,跨膜钾电流显著降低。结论:5-FU在抑制Tb细胞增殖的同时钾通道功能也显著降低,提示钾离子通道可能参与调控5-FU抑制Tb细胞增殖的过程。

lncRNA NNT-AS1和miR-424在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义

目的分析长链非编码RNA烟酰胺核苷酸转氢酶反义RNA1(lncRNA NNT-AS1)、微小RNA-424(miR-424)在子宫内膜癌组织中的表达及其临床意义。方法收集60例子宫内膜癌患者的子宫内膜癌组织和40例正常子宫内膜组织,检测lncRNA NNT-AS1、miR-424的相对表达水平,分析二者的相对表达水平与患者临床病理特征及预后的关系,以及二者的相关性。结果lncRNA NNT-AS1在子宫内膜癌组织中高表达,并与国际妇产科联盟(FIGO)分期、脉管浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。miR-424在子宫内膜癌组织中低表达,与FIGO分期、肌层浸润程度、脉管浸润和淋巴结转移相关(P<0.05)。lncRNA NNT-AS1高表达、miR-424低表达的患者5年生存率较低(P<0.05)。lncRNA NNT-AS1高表达和miR-424低表达是患者预后不良的影响因素。lncRNA NNT-AS1相对表达水平与miR-424呈负相关(r=-0.368,P<0.05)。结论lncRNA NNT-AS1和miR-424在子宫内膜癌中均异常表达,且与子宫内膜癌患者不良病理特征和预后相关。

CXCR4单克隆抗体对新生血管形成的影响

目的:探讨CXC趋化因子受体4(CXC chemokine receptor4,CXCR4)单克隆抗体(CXCR4mAb)对新生血管形成的影响及其作用机制。方法:以鸡胚绒毛尿囊膜(chorioallantoic membrane,CAM)血管抑制实验检测CXCR4单克隆抗体对新生血管形成的影响,Western Blot免疫印迹法检测血管内皮细胞SDF-1蛋白的表达。结果:CXCR4单克隆抗体可明显抑制新生血管的形成,并且使培养的血管内皮细胞SDF-1蛋白表达明显降低。结论:CXCR4mAb可通过SDF-1/CXCR4生物轴抑制新生血管的形成。

膀胱移行细胞癌组织中沉默信息调节因子2相关酶1和E钙黏附素的表达及其相关性

目的探讨膀胱移行细胞癌组织中沉默信息调节因子2相关酶1(SIRT-1)及E钙黏附素(E-cadherin)的定性表达情况及其相关性。方法选取2015年1月至2019年8月于西安交通大学第二附属医院行手术治疗的膀胱移行细胞癌患者81例,取手术切除的膀胱移行细胞癌组织和癌旁正常组织,免疫组织化学法检测SIRT-1及E-cadherin蛋白的表达,比较癌组织与癌旁正常组织中SIRT-1和E-cadherin阳性表达率,以及不同临床病理特征膀胱移行细胞癌患者癌组织中SIRT-1和E-cadherin的阳性表达率,分析SIRT-1与E-cadherin表达的相关性。结果SIRT-1阳性染色主要位于细胞核及细胞质,E-cadherin阳性染色主要位于细胞膜及细胞质。膀胱移行细胞癌组织中SIRT-1阳性表达率明显高于癌旁正常组织[92.6%(75/81)比13.6%(11/81)],而E-cadherin阳性表达率明显低于癌旁正常组织[25.9%(21/81)比93.8%(76/81)],差异均有统计学意义(χ^2=101.523、77.724,均P<0.001)。肿瘤分期Ⅲ~Ⅳ期和伴淋巴结转移患者的癌组织中SIRT-1阳性表达率分别高于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移患者,E-cadherin表达水平分别低于肿瘤分期Ⅰ~Ⅱ期和无淋巴结转移患者(均P<0.05)。经Spearman秩相关分析,膀胱移行细胞癌组织中SIRT-1与E-cadherin的表达呈负相关(ρ=-0.371,P=0.001)。结论膀胱移行细胞癌组织中SIRT-1阳性表达率增高,而E-cadherin阳性表达率降低,二者表达均与肿瘤分期、淋巴结转移有关且二者表达呈负相关。

肿瘤学临床教学实践中循证医学的应用研究

目的探讨肿瘤学临床教学实践中循证医学的应用研究。方法选取我院2016年1月—2017年1月在我院肿瘤科实习的60名实习生作为研究对象。将其随机分为两组,对照组采用传统教学模式,观察组采用循证医学教学模式,比较两组实习生的教学效果、自我评价及教学满意度。结果观察组肿瘤科理论知识、临床技能评分高于对照组,组间对比,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组学习效率提升、对重点内容的掌握、学习兴趣激发、自学能力的提高、理论联系实际能力的提高、医患沟通能力的提高均优于对照组,组间对比,差异具有统计学意义(P<0.05);观察组教学满意度高于对照组,组间对比,差异具有统计学意义(P<0.05)。结论肿瘤学临床教学实践中循证医学的应用效果良好,利于实习生提升学习效果,提高临床实践能力,学会主动学习及解决问题,具有积极的临床意义。

二甲双胍联合compound C对小鼠4T1乳腺癌细胞增殖和细胞周期蛋白D1表达的影响

目的 探讨二甲双胍及单磷酸腺苷活化蛋白激酶抑制剂（compound C）对小鼠乳腺癌4T1细胞增殖及细胞周期蛋白D1（cyclin D1）表达的影响。方法 选取小鼠乳腺癌4T1细胞体外培养,分别以完全培养基为空白组,4T1细胞为对照组,在细胞培养中分别加入浓度为2.5、5、10、20、40 mmol/L的二甲双胍为实验组1-5,以10 mmol/L的二甲双胍联合20μmol/Lcompound C的为实验组6,20μmol/L compound C的为实验组7。检测各组细胞株增殖情况及细胞内cyclin D1的表达。结果 二甲双胍作用24、48 h时,实验组1与对照组存活率无显著差异（P〉0.05）,实验组2-5细胞存活率显著低于对照组（P〈0.05）;72 h时,实验组1-5存活率均显著低于对照组（P〈0.05）;实验组3、4、5在24、48、72 h时,各组cyclin D1的相对表达量均显著低于对照组（P〈0.05）;各组48 h时cyclin D1的相对表达量显著低于24 h时（P〈0.05）;72 h时cyclin D1的相对表达量显著低于各组48 h时（P〈0.05）;实验组3 cyclin D1的相对表达量显著低于对照组（P〈0.05）,实验组6、7在各时间点与对照组比较无显著差异（P〉0.05）。结论 二甲双胍能抑制小鼠乳腺癌4T1细胞的增殖,而compound C对其有拮抗作用;二甲双胍对小鼠乳腺癌4T1细胞cyclin D1蛋白表达有下调作用。

斜拉桥前支点挂篮结构空间受力数值分析

以某斜拉桥施工为例,利用数值模拟方法分析采用前支点挂篮施工时各关键点的支反力、应力及挂篮结构位移。结果表明,挂篮的变形和应力水平均保持在允许范围内,采用前支点挂篮满足设计和使用要求,且具有相对足够的应力和变形储备能力;分次对斜拉索进行张拉对改善挂篮变形和受力效果明显;随着工序的推进,挂篮的最大变形和应力发生阶段不同,施工期间应布置测点进行实时监控,尤其是加强对斜拉索张拉前后挂篮关键构件的监控。

三角形挂篮结构设计及受力分析研究

以某桥梁建设为例,分析了采用三角形挂篮施工时的结构受力和变形情况,结果表明:工况1和工况2时整个新浇混凝土的作用中心偏向后横梁方向,其荷载的力臂最小,反力由6个双拼28b工钢扁担梁承受,且3种工况下的反力均满足要求;各工况的构件最大组合应力均位于底板后锚点的精轧螺纹钢上;最大的剪应力分别位于下后横梁的后锚点、主梁的后锚点和后上横梁吊杆连接位置,且各工况下构件组合应力和剪应力均满足要求;各工况挂篮的承力骨架为三角桁片,其前节点的挠度分别为23.7、26.4、3.9mm,小于允许值29.9mm,满足刚度要求。

预应力连续刚构桥病害特征及防治对策研究

桥梁作为公路的咽喉设施,由于交通荷载及外界自然的影响,出现各类病害与缺陷,严重影响了桥梁的使用寿命。本研究以某预应力混凝土连续刚构桥为依托,通过实地调研,分析并总结预应力混凝土连续刚构桥病害特征,基于此进一步提出相应防治对策,对连续刚构桥养护与维修具有指导意义。调查结果表明:该连续刚构桥主桥上部结构主要病害为纵向裂缝;而下部结构病害主要集中在桥墩的竖向裂缝;桥面铺装坑槽、纵向裂缝较为明显;裂缝产生的主要原因有材料、施工及环境外力。

乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及与预后的关系

目的:探讨乳腺癌中GRP78、Survivin表达的相关性及其与乳腺癌患者预后的关系。方法:采用免疫组化Envision法检测169例乳腺癌石蜡标本中GRP78、Survivin的表达状况,并对其表达的相关性以及与乳腺癌患者预后的关系进行了统计分析。结果:在169例乳腺癌标本中,GRP78强表达为68例(40.2%),弱表达为101例(59.8%);Survivin强表达为96例(56.8%),弱表达为73例(43.2%)。对二者相关性的分析表明二者表达的吻合度具有统计学意义,但吻合程度较弱。单因素生存分析结果表明GRP78(+)Survivin(+)组(1组)、GRP78(-)Survivin(+)组(2组)、GRP78(+)Survivin(-)(3组)之间的无病生存时间差异无显著性(P>0.05),但与GRP78(-)Survivin(-)组(4组)相比,其无病生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05);1、2、3组间的总生存时间差异无显著性(P>0.05),但与4组相比,其总生存时间均较差,差异有显著性(P<0.05)。多因素Cox回归分析表明GRP78、Survivin的表达状况是影响乳腺癌患者无病生存时间的独立预后因素(P<0.05),但不是总生存时间的独立预后因素(P>0.05)。结论:乳腺癌中GRP78与Survivn存在着相关性,GRP78和/或Survivn强表达提示患者预后不良,GRP78、Survivin的表达状况对判断乳腺癌患者的预后具有一定的参考价值。

化疗联合安罗替尼治疗晚期三阴性乳腺癌的疗效和安全性

目的:探讨化疗联合安罗替尼治疗晚期三阴性乳腺癌的疗效和安全性。方法:选取2018年6月至2018年12月我院肿瘤科收治的30例晚期乳腺癌患者为研究对象,根据入组标准和排除标准进行随机分组,对照组给予化疗联合安慰剂治疗6周期,实验组给予化疗联合安罗替尼胶囊(12 mg,qd)治疗6周期,比较两组的临床疗效和安全性。结果:实验组和对照组患者的ORR分别为66.7%和46.7%(P=0.043),并且中位PFS分别为7.5月和3月(P=0.073)。常见不良反应为乏力、中性粒细胞减少症、高血压症、手足综合征、高甘油三酯血症。其中实验组III-IV级不良反应主要为中心粒细胞减少症(26.7%)和高血压症(13.3%),调整剂量后患者耐受性好。结论:化疗联合安罗替尼治疗晚期三阴性乳腺癌可明显提高患者的客观缓解率,且安全性较好,值得临床推荐。

CXCR4/SDF-1对乳腺癌细胞MCF-7增殖作用的影响

目的:探讨CXCR4/SDF-1生物学轴对人乳腺癌细胞MCF-7生长与增殖的影响.方法:采用WesternBlot免疫印迹法检测MCF-7细胞CXCR4蛋白的表达.以CXCR4单克隆抗体(CXCR4mAb)作用MCF-7细胞,通过MTT比色法、软琼脂克隆形成实验和细胞周期检测观察MCF-7细胞的生长情况;通过流式细胞仪检测MCF-7细胞的增殖细胞核抗原(PC-NA)表达.结果:MCF-7细胞表达CXCR4蛋白;CXCR4mAb作用后,MCF-7细胞生长能力明显降低,并且PCNA蛋白含量由对照组的(91.6±5.3)%降为(78.1±3.6)%(P<0.05).结论:CXCR4mAb可明显抑制MCF-7细胞的增殖.

Slit蛋白在地鼠颊囊癌变过程中的意义及与血管形成的关系

目的：探讨Slit蛋白在地鼠颊囊癌发展过程中的表达变化及与肿瘤新生血管之问的关系。方法：采用6～8周龄叙利亚金黄地鼠60只，建立DMBA诱发的颊囊癌模型。免疫组化法检测在颊囊癌癌变过程中Slit蛋白、血管内皮生长因子（VEGF）、范德华因子（v-WF）的动态表达，计数新生血管微血管密度（microvascular dense，MVD）的变化。结果：Slit蛋白在原位癌和鳞癌中高表达，与癌前病变和正常黏膜相比有显著性差异（P〈0．05），VEGF阳性表达率及微血管密度（MVD）与Slit蛋白的表达呈一致性。结论：Slit蛋白在地鼠颊囊癌的发展中起重要作用，其机制可能是通过促进肿瘤新生血管的形成而发挥促癌作用的。

挂篮施工形式对斜拉桥应力影响及施工优化分析

以某跨河斜拉桥挂篮施工为例,对前支点和后锚点挂篮施工方式对比分析,并对预应力钢束的后锚点挂篮施工方案进行了改进.结果表明:采用前支点挂篮施工,斜拉桥0#块主梁均处于受压状态;采用后锚点挂篮施工,0#块主梁0～5节段均受拉应力,且最大值远超过设计标准值;在原有设计基础上对预应力钢束的数量和位置进行相关优化,优化后的改进方案结构不产生拉应力,满足结构安全要求.

沙利度胺联合含铂方案治疗三阴性乳腺癌肝转移

目的:探讨沙利度胺联合化疗在肝转移三阴性乳腺癌中的临床疗效及安全性。方法:将48例符合入组条件的三阴性肝转移乳腺癌患者随机分为两组,其中实验组24例,至少接受含铂方案治疗2周期联合沙利度胺持续服6周后观察疗效及毒副反应。对照组24例,至少接受含铂方案治疗2周期后观察疗效及毒副反应。结果:实验组有效率优于对照组(P<0.05);毒副反应,实验组消化道反应发生率较对照组明显下降(P<0.05),骨髓抑制两组无明显差异。实验组治疗后Karnofsky评分情况优于对照组(P<0.05)。结论:沙利度胺联合化疗对三阴性乳腺癌肝转移的疗效优于单一化疗组,且可明显减轻患者化疗胃肠毒副反应,提高患者生活质量。