基于Nrf2/HO-1信号通路探讨黄芩汤对氟尿嘧啶致小鼠化疗性肠黏膜炎的保护作用及机制

目的探讨黄芩汤对氟尿嘧啶(5-FU)诱导的小鼠化疗性肠黏膜炎(CIM)的保护作用及机制。方法将72只雄性Balb/c小鼠随机分为6组:正常对照组、模型组、阳性药组(洛派丁胺,3 mg·kg^(-1))和黄芩汤低、中、高剂量组(2.275、4.550、9.100 g·kg^(-1)),每组12只。各组小鼠按剂量灌胃给予相应药物,每日1次,连续7 d。实验周期的前5 d,在给小鼠灌胃给药30 min后,腹腔注射5-FU(60 mg·kg^(-1))诱导建立CIM小鼠模型。每日监测小鼠进食量、体质量及腹泻评分;采用HE染色法观察回肠组织的病理变化;检测小鼠血清中超氧化物歧化酶(SOD)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-PX)的活性及丙二醛(MDA)含量;采用Western Blot法检测小肠组织中Keap1、细胞质Nrf2、细胞核Nrf2、Histone H3蛋白表达;qRT-PCR法检测小肠组织中HO-1、NQO1、COX-2 mRNA表达;ELISA法检测小肠中肿瘤坏死因子α(TNF-α)的含量;免疫组织化学法检测回肠组织中NF-κB p65的表达情况。结果与正常对照组比较,模型组小鼠的体质量、进食量显著下降(P<0.01),腹泻评分显著升高(P<0.01);回肠组织损伤严重;血清中的GSH-PX、CAT、SOD活性显著减弱(P<0.01),而MDA水平显著升高(P<0.01);小肠组织中的Keap1和细胞质Nrf2蛋白表达水平显著上升(P<0.01),细胞核Nrf2蛋白表达水平显著降低(P<0.01),NQO1、HO-1 mRNA表达明显下调(P<0.05,P<0.01),COX-2 mRNA表达显著上调(P<0.01),TNF-α含量显著上升(P<0.01);回肠组织中的NF-κB p65表达量显著增加(P<0.01)。与模型组比较,黄芩汤给药组小鼠的体质量、进食量显著增加(P<0.01),腹泻评分显著降低(P<0.01);回肠组织的病理损伤得到明显改善;血清GSH-PX、CAT、SOD活性显著增强(P<0.01),而MDA水平明显降低(P<0.05,P<0.01);小肠组织中的Keap1和细胞质Nrf2蛋白表达水平明显降低(P<0.05,P<0.01),细胞核Nrf2蛋白表达水平显著上升(P<0.01),NQO1、HO-1 mRNA表达明显上调(P<0.05,P<0.01),COX-2 mRNA表达显著下调(P<0.01),TNF-α含量显著下降(P<0.01);回肠组织中的NF-κB p65表达量明显降低(P<0.05,P<0.01)。结论黄芩汤对5-FU诱导的CIM小鼠肠黏膜具有明显保护作用,可能与其激活Nrf2/HO-1信号通路发挥抗氧化应激及抗炎作用有关。