补阳还五汤治疗大鼠气虚血瘀型脑缺血的代谢组学研究

目的:探讨补阳还五汤对气虚血瘀型脑缺血大鼠生物代谢途径的影响。方法:将30只大鼠随机分为假手术组、模型组和补阳还五汤组(3.49 g/kg)。模型组和补阳还五汤组采用荧光微球诱导多发性脑梗死合并睡眠剥夺,建立气虚血瘀型脑缺血动物模型,并分别给予蒸馏水或补阳还五汤灌胃。假手术组给予蒸馏水灌胃,不睡眠剥夺和微球注射。记录各组大鼠的体质量。实验结束后,处死大鼠,采血分析。酶联免疫吸附试验法检测大鼠血清中血栓素B 2(TXB 2)和6-酮基-前列环素1α(6-keto-PGF 1α)水平。采用液质联用的代谢组学方法检测血清样品。结果:与假手术组比较,模型组大鼠平均体质量明显降低,TXB 2/6-keto-PGF 1α比值升高(均P<0.05);与模型组比较,补阳还五汤组大鼠平均体质量升高,药物干预可降低TXB 2/6-keto-PGF 1α比值(P<0.05)。代谢组学结果显示,假手术组与模型组比较,差异有统计学意义(P<0.05),补阳还五汤组部分逆转模型组的变化,指标向假手术组回调的趋势明显。结论:模型大鼠体内的生物代谢途径受到明显干扰,补阳还五汤可以对异常生物代谢途径进行明显的调整,其调整的代谢途径包括:精氨酸的生物合成、精氨酸和脯氨酸代谢、谷胱甘肽代谢、赖氨酸的生物合成。

醒脾养儿颗粒对正常大鼠排尿功能的影响

目的 探索醒脾养儿颗粒对正常大鼠膀胱尿动力学及尿道外括约肌活动性的影响。方法 雄性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、醒脾养儿颗粒9.2、4.6、2.3 g/kg组及奥昔布宁组,每组12只。各给药组灌胃给药,正常对照组给予等体积纯水,连续7 d,末次灌胃后分别于深麻醉和浅麻醉状态下测定大鼠排尿时膀胱内压和尿道外括约肌电活动。苏木素-伊红(HE)染色观察大鼠膀胱组织形态学变化。结果 醒脾养儿颗粒各剂量组能明显降低深麻醉及浅麻醉下大鼠基础膀胱压,醒脾养儿颗粒大剂量组能显著增加膀胱最大容量;醒脾养儿颗粒大剂量组明显增加浅麻醉下大鼠排尿P_(2)期波峰数及膀胱顺应性;各组膀胱组织形态未见明显差异。结论 醒脾养儿颗粒可显著降低基础膀胱压,增加膀胱最大容量和膀胱顺应性,促进膀胱持续有力的排尿,其作用可能与松弛膀胱平滑肌改善膀胱功能状态相关。

不同缺血时间对中国小型猪心肌缺血再灌注损伤的影响研究

目的探讨不同缺血时间对中国小型猪急性心肌缺血再灌注损伤的影响,为建立适合的小型猪心肌缺血再灌注模型提供依据。方法中国小型猪29只,随机分为假手术组(6只)、缺血30 min组(7只)、缺血60 min组(7只)及缺血90 min组(9只)。各组戊巴比妥钠麻醉后行左冠状动脉造影,后将球囊经导丝交换入冠脉左前降支中部,术中连续心电监护记录ST段改变情况、室颤及除颤次数,再灌注3 h后处死。于缺血前、再灌即刻、再灌后1 h、2 h及3 h采集超声心动图,描记心脏收缩功能左心室射血分数(left ventricular ejection fraction,EF)及左心室短轴缩短率(left ventricular fractional shortening,FS);检测血清肌酸激酶同工酶(creatine kinase isoenzyme,CKMB)、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)及超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性,丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量。TTC/伊文思蓝双重染色观察心肌梗死面积,硫磺素S染色法观察再灌后无复流面积。结果缺血90 min组动物死亡率较缺血30 min组、缺血60 min组高;随缺血时间增长,室颤及除颤次数明显增加(P<0.05,P<0.01);缺血90 min组再灌注3 h时EF值、FS值较其他组明显降低(P<0.05,P<0.01);模型组动物在心电图缺血性改变、心肌梗死及无复流面积、心肌组织染色及血清CK-MB、LDH、SOD、MDA含量方面无显著性差异。结论心肌缺血90 min再灌注小型猪模型的恶性心律失常及死亡率高,缺血30 min再灌注3 h条件建立的模型能复制临床疾病的特征性病变且死亡率低,适合于发病机制及药物作用研究。

高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠模型的建立和评价

目的采用高蛋氨酸喂养和5/6肾摘除建立高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠模型并对该模型进行评价。方法大鼠随机分为4组:假手术组、高蛋氨酸组、单纯肾摘组、复合模型组。分别采用高蛋氨酸饲料喂养建立高同型半胱氨酸血症模型、5/6肾摘除建立慢性肾病模型以及复合两种方法建立高同型半胱氨酸血症慢性肾病模型,测定大鼠动脉血压、超声心动图、血清生化指标水平;观察离体胸主动脉血管环的张力变化和p-p85、p-Akt及p-eNOS(Ser1177)蛋白表达的差异;HE染色观察肾组织、心肌组织和主动脉组织的病理改变。结果与假手术组比较,三组模型动脉血压均能够持续性显著升高(P<0.01),复合模型组的血压明显高于高蛋氨酸组和单纯肾摘组(P<0.05);与假手术组比较,三组模型心动超声指标LVEDd、LVEDV、LVESV、SV差异显著(P<0.05);与假手术组比较,高蛋氨酸组和复合模型组动物血清同型半胱氨酸、蛋氨酸明显升高(P<0.01),而单纯肾摘组和复合模型组动物血清肌酐、尿素氮、总胆固醇、高密度脂蛋白明显升高(P<0.05),甘油三脂明显降低(P<0.05);与假手术组比较,三组模型由血管舒张剂诱导的血管环舒张作用曲线均发生右移,而且复合模型组由乙酰胆碱和硝普钠诱导的Emax和EC50较单纯模型组差异显著(P<0.05);与假手术组比较,复合模型组主动脉组织中p-Akt及p-eNOS的表达有统计学意义(P<0.05);三种模型动物肾组织、心肌组织和主动脉组织皆出现病理改变,复合模型病理改变更严重。结论采用高蛋氨酸喂养和5/6肾摘除可以建立高同型半胱氨酸血症慢性肾病大鼠模型,与单纯模型比较功能和形态学指标差异显著,可应用于高同型半胱氨酸血症慢性肾病的基础研究。

冠心病痰瘀互结证小型猪血浆代谢组学研究

目的基于液相色谱-质谱联用技术对冠心病痰瘀互结证小型猪血浆除磷脂外的代谢物进行代谢组学分析。方法将小型猪分为对照组和模型组,采用高脂饲料喂养结合冠状动脉内皮损伤法建立冠心病痰瘀互结证小型猪模型。HE和Masson染色观察心肌组织病理变化;血浆样本用96孔SPE板进行除蛋白和去磷脂处理,采用超高效液相色谱-四级杆飞行时间质谱(UPLC-QTOF-MS)对样本进行检测,偏最小二乘判别分析(PLS-DA)进行数据分析,通过HMDB数据库和二级质谱裂解规律比对,对内源性成分进行定性分析,筛选差异代谢物,通过MetaboAnalyst 5.0结合HMDB、KEGG数据库对差异代谢物进行代谢通路分析。结果HE和Masson染色显示,模型组心肌细胞肥大,部分心肌细胞融合,心肌间质水肿,大量胶原纤维增生;PLS-DA结果显示,模型组和对照组血浆代谢物差异明显,筛选出7a,12a-二羟基-3-氧代-4-胆氨酸、3b,12a-二羟基-5a-胆酸、脱氧胆酸甘氨酸结合物、别石胆酸、十六烷二酸、3-氧代十八烷酸、二十二碳六烯酸、丁烯肉碱、3-羟基-9-十六碳烯酰肉碱、3-羟基十六烷基肉碱、(9E)-10-硝基十八烷-9-烯酰肉碱等26个差异代谢物,涉及肉碱穿梭代谢、花生四烯酸代谢、胆汁酸生物合成、胆碱代谢、丙酮酸代谢等途径。结论内源性非磷脂类成分如胆酸类、脂肪酸类、氨基酸类、酰基肉碱类及其生物代谢途径参与冠心病痰瘀互结证发病过程。本研究可为了解冠心病痰瘀互结证病程进展提供实验依据。

冠状动脉微血管疾病气虚血瘀证大鼠模型的建立及评价

目的冠状动脉微血管疾病(coronary microvascular disease,CMVD)发病率逐年增高,中医认为CMVD属中医学“络脉”的范畴,气虚血瘀证是CMVD主要证型,然而目前尚无气虚血瘀证CMVD动物模型的报道,因此本研究探索建立冠状动脉微血管疾病气虚血瘀证大鼠模型并进行评价。方法雄性SD大鼠45只,随机分为假手术组、冠脉微血管疾病组和冠脉微血管疾病气虚血瘀证组,每组15只。冠脉微血管疾病气虚血瘀证组动物每天随机14~16 h睡眠剥夺,持续6周,复制气虚证大鼠模型;假手术组及冠脉微血管疾病组动物正常饲养6周。实验6周后,冠脉微血管疾病组和冠脉微血管疾病气虚血瘀证组大鼠麻醉后开胸,向左心室内注射栓塞微球(40~120μm),假手术组动物行开胸手术但不注射栓塞微球。术后7 d,各组测定相关检测指标。结果冠脉微血管疾病组与假手术组相比,左室射血分数、左室缩短率明显降低,肌酸激酶MB同工酶(CK-MB)以及乳酸脱氢酶(LDH)活性明显增加。冠脉微血管疾病气虚血瘀证组与假手术组相比,心功能下降、心肌损伤标志物活性显著升高、血浆及全血粘度明显升高。结论睡眠剥夺复合心室内注射栓塞微球可成功建立冠脉微血管疾病气虚血瘀证大鼠模型,比较符合临床发病特征适合于发病与中药作用机制研究。

基于IL-6/STAT3通路探讨参芪复方对缺血性心力衰竭大鼠Th17/Treg平衡的影响

目的观察参芪复方对缺血性心力衰竭(IHF)大鼠的治疗作用并探究其可能的作用机制。方法选取SD大鼠60只,其中50只采用结扎冠状动脉左前降支建立IHF模型后随机分为模型组、参芪复方低、中、高剂量组、福辛普利组,每组10只,另10只设为假手术对照组,只穿线不结扎。治疗组分别按不同剂量灌胃给药,模型组与假手术组给予相同容积的生理盐水,连续灌胃5周。治疗结束后,行心脏超声检测心室结构及心功能变化;采用苏木素-伊红染色(HE)观察心肌组织病理学改变;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测IL-17A、IL-6、TNF-α、IL-10水平;流式细胞术检测外周血和脾脏Th17、Treg细胞含量;免疫组化(IHC)观察心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3表达;蛋白质免疫印记(Western blot)检测心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、Foxp3、RORγt表达。结果与假手术相比,模型组LVEF、LVFS、SV、CO明显下降,LVDs、LVDd、LVESV、LVEDV明显增加,并出现心肌细胞排列紊乱,伴炎性细胞浸润等病变,血清IL-17A、IL-6、TNF-α水平升高,IL-10水平下降,外周血与脾脏Th17细胞百分比增加,Treg细胞百分比下降,心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、RORγt蛋白表达增加,Foxp3蛋白表达下降;与模型组比较,参芪复方高剂量组心室结构与心功能指标得到改善,心肌损伤减轻,血清IL-17A、IL-6、TNF-α水平下降,IL-10水平升高,Th17细胞百分比下降,Treg细胞百分比升高,心肌组织IL-6、STAT3、p-STAT3、RORγt蛋白表达减少,Foxp3蛋白表达增加。结论参芪复方可改善IHF大鼠心功能,抑制炎症反应,其机制可能与抑制IL-6/STAT3信号通路,调节Th17/Treg细胞免疫平衡有关。

痰瘀互结证冠心病小型猪模型的建立

目的利用高脂喂养结合冠脉球囊损伤在小型猪体内建立病证结合冠心病痰瘀互结模型。方法12只小型猪随机分为对照组和模型组,每组6只,分别用普通饲料和高脂饲料喂养2周,采用介入技术球囊损伤左冠状动脉前降支(LAD),模型组继续高脂饲料喂养8周,制备小型猪冠心病模型。测定动物的体重指数(BMI)、血脂水平、高敏C-反应蛋白(hs-CRP)、体表心电图(BS-ECG)、冠状动脉造影及病理学指标,评价模型的建立和病理生理特点。结果模型组BMI、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、hs-CRP均明显升高,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);BS-ECG显示模型组心肌缺血程度(∑-ST)及心肌缺血范围(N-ST)均明显高于对照组(P<0.05,P<0.01);冠脉造影显示LAD管腔狭窄,管腔丧失明显,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01);弹力纤维EVG染色显示模型组管腔明显狭窄,内膜增生,与对照组比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论高脂饲料喂养结合冠脉球囊拉伤在小型猪体内可以成功建立病证结合的痰瘀互结证冠心病模型。

双参宁心胶囊对心导管介入血栓法制备小型猪心肌缺血模型的影响

目的研究自体血栓介入法中国实验小型猪心肌缺血模型的制备,并观察双参宁心胶囊抗心肌缺血作用。方法采用心导管介入技术,经颈总动脉在左冠状动脉前降支内置入导引导管,注入自体血栓,制备中国实验小型猪心肌缺血模型,观察双参宁心胶囊对冠状动脉栓塞、30点体表心电图、定量组织学等一系列综合评价心肌缺血模型指标的影响。结果造模6天后,模型动物冠状动脉前降支基本栓塞,体表心电图ST段抬高的幅度和点数均增加;给药6天后,双参宁心胶囊可明显使自体血栓造成的小型猪冠状动脉前降支栓塞再通,减轻心肌缺血程度和心肌缺血范围。结论本实验首次应用心导管介入血栓法成功制备中国实验小型猪心肌缺血模型,双参宁心胶囊具有抗心肌缺血作用。

小型猪冠心病模型痰瘀互结证候诊断与评分

目的：研究小型猪痰瘀互结证型冠心病心绞痛中医证候诊断及评分标准。方法：小型猪随机分为正常对照组和模型组，每组6只，分别用普通饲料和高脂饲料喂养10周，2周时采用介入技术球囊损伤左冠状动脉前降支（LAD），制备小型猪冠心病模型。测定30点体表心电图（BS-ECG）、体重指数（BMI）、模拟病理图像分析以及无创血流动力学指标，分别对胸痹心痛的主症、兼症、舌象及舌下脉络和脉象进行标准化评分，量化统计学处理。结果：痰瘀互结模型动物在主症、兼症、舌象及舌下脉络和脉象4个方面均有明显的改变，而且随着造模时间的延长而逐渐增加，6～10周时模型组评分均明显高于对照组（P〈0．05或P〈0．01）。结论：借助证候客观化评分方法，可有效模拟研究实验小型猪冠心病痰瘀互结中医证候四诊表现。

小型猪痰瘀互结证冠心病证侯诊断研究

目的:研究小型猪痰瘀互结证冠心病中医证侯诊断指标及方法。方法:小型猪随机分为正常对照组和模型对照组,分别用普通饲料和高脂饲料喂养14周,2周时采用介入技术球囊损伤左冠状动脉前降支,制备小型猪冠心病模型。测定30点体表心电图、体重指数、采集舌象以及无创血流动力学指标,采集股动脉脉搏图像,分别对胸痹心痛的主症、兼症、舌象及舌下脉络和脉象进行标准化评分,分析舌象RGB及HIS数值变化,对脉搏图进行分析。结果:与正常对照组比较,模型对照组动物的主症、兼症、舌象和脉象均有明显的改变,此评价方法具有较好的稳定性;模型组舌象图像R分量下降,红色饱和度降低;模型组动物在实验2周时表现出脉搏图h3/h1改变。结论:证候客观化评分方法在实验小型猪冠心病痰瘀互结证研究中有较好的稳定性,规范化的舌象图像采集有助于评价疾病变化,而脉搏图评价复合因素造模实验动物的脉象的方法还需探索。

益气活血方及其拆方对气虚血瘀型脑梗大鼠影响的比较研究

目的:探讨益气活血方、方中益气药和活血药对气虚血瘀模型大鼠气血的影响。方法:采用荧光微球致多发性脑梗复合睡眠剥夺法制备气虚血瘀型脑梗的病证结合模型,将大鼠随机分为假手术组、模型组、益气活血方组(3.49 g·kg^(-1))、益气药组(1.08 g·kg^(-1))、活血药组(2.408 g·kg^(-1)),脑梗术后复合睡眠剥夺4周,期间每日给药1次。给药4周后测定各组大鼠的负重力竭游泳时间和脉搏幅度,取血进行脑组织血液相关指标及病理切片分析。结果:相较假手术组,模型组动物负重力竭游泳时间明显缩短,脉搏幅度也明显下降(P<0.01);模型组在各切变率下的全血黏度和血浆黏度相比假手术组均显著升高(P<0.01),血清中ET-1、Ang-Ⅱ、IL-6、IL-1β和MDA水平均升高(P<0.05)。与模型组比较,益气活血方组能延长负重游泳时间,提高脉搏幅度(P<0.05);活血药能降低各切变率下的全血黏度,益气药和全方可降低血浆黏度(P<0.05);益气药能降低Ang-Ⅱ值,益气组与活血组对ET-1都有不同程度的降低(P<0.05),全方优于益气药和活血药组(P<0.01);各给药组IL-1β值相比模型组均有显著降低,活血药组IL-6也有明显降低(P<0.01);活血药和全方MDA水平低于模型组(P<0.05,P<0.01)。病理形态学观察表明,模型组海马组织结构异常,见坏死和炎性浸润,益气组见神经元增生,活血组未见坏死区,全方组病理改变最少,且见炎性组织中细胞恢复状态。结论:益气药与活血药存在协同作用,益气以助血行,改善气虚血瘀,同时活血化瘀进而减少炎症因子及氧化产物的堆积,使全方效果既优于益气药也优于活血药。

银杏蜜环口服溶液改善犬急性心肌缺血的研究

目的:观察银杏蜜环口服溶液对犬急性心肌缺血的保护作用。方法:36只犬随机分为6组,模型组,合心爽组(5.0 mg/kg);天麻蜜环粉组(100 mg/kg);银杏提取物组(3.0 mg/kg);银杏蜜环口服溶液高剂量组(206 mg/kg)和银杏蜜环口服溶液低剂量组(103 mg/kg)。通过结扎犬冠状动脉前降支的方法复制急性心肌缺血模型。观察心肌缺血后不同时间点冠状动脉血流量、血氧含量、心肌耗氧量及心肌氧利用度,心肌梗死范围的变化。结果:与模型组比较,银杏蜜环口服溶液大、小剂量组以及蜜环粉组和银杏提取物组心肌梗死范围明显下降(P<0.05);同时银杏蜜环口服溶液高剂量组在缺血后30 min静脉血氧含量明显下降(P<0.05),在缺血后15、30、60 min心肌耗氧量和心肌氧利用度明显增加(P<0.05),在缺血后60~180 min时冠状动脉血流量明显升高(P<0.05)。结论 :银杏蜜环口服溶液可在心肌急性缺血状态下短期内促进心肌氧供给和氧消耗;有效增加冠脉血流量,增加心肌的供血供氧,提高心肌氧利用度。药效作用优于银杏提取物和天麻蜜环粉。

芪龙胶囊对犬急性心肌缺血的影响

目的:观察芪龙胶囊对犬急性心肌缺血缺血、心肌梗死的保护作用。方法:采用犬冠脉前降支结扎的方法建立犬急性心肌缺血模型。36只犬随机分为6组,每组6只动物,分别为:模型对照组,合心爽组(0.5 mg/kg),复方丹参片(0.24片/kg)组,芪龙胶囊256、128及64 mg/kg剂量组;采用心外膜电图标测心肌缺血范围及程度,定量组织学(N-BT染色法)测定心肌梗死范围,超声多普勒血流计测定心脏冠脉血流量,血气分析仪测定心肌耗氧量,全自动生化分析仪测定血清肌酸激酶(CK)、乳酸脱氢酶(LDH)的变化。结果:芪龙胶囊经十二指肠给药可明显减少N-BT所示的犬心肌梗死面积/心室面积的比率;明显减轻由心外膜电图标测的心肌缺血程度(药后15 min^180 min),与模型组比较均有显著差异;可减小由心外膜电图标测的心肌缺血范围(药后15 min^180 min);增加冠脉流量(药后30 min^45 min);对心肌缺血及心肌梗死引起的血清CK、LDH活性升高有明显抑制作用,对急性心肌缺血后动脉、静脉血氧含量未见明显影响。结论:芪龙胶囊对犬急性心肌缺血模型表现出较好的心肌保护作用,可能与增加冠脉血流量,改善心肌供血有关。

两种造模方法建立大鼠冠脉微循环障碍模型比较研究

目的比较月桂酸钠损伤内皮法与微球栓塞法建立冠脉微循环障碍大鼠模型的差异,探索稳定、可用于疾病发病和药物研究的动物模型。方法雄性SD大鼠30只,随机分为假手术组、月桂酸钠组和微球栓塞组,每组10只。大鼠麻醉后开胸,向左心室内注射0.2 mL的月桂酸钠(1 g/L)或栓塞微球(40~120μm,1000个),假手术组注射等体积生理盐水,术后24 h再次麻醉动物测定相关指标处死取材。结果月桂酸钠组可见冠脉微血管血栓形成、心肌细胞损伤,心功能、血流动力学及心肌酶指标与假手术比较未见差异。微球栓塞组可见微球栓塞于冠脉微血管、心肌损伤,左室射血分数、左室缩短率明显降低,左室内压最大上升速率明显降低、肌酸激酶MB同工酶以及乳酸脱氢酶活性明显增加。结论两种造模方法均可以造成冠脉微循环障碍,对大鼠心脏功能有一定影响。微球栓塞法较月桂酸钠法建立的动物模型关键指标更加稳定,可广泛应用于冠脉微循环障碍的发病机制、药物治疗作用等研究。

基于X射线衍射增强成像的冠脉微循环障碍三维可视化及双参宁心胶囊作用研究

目的探索冠脉微血管三维可视化方法,观察双参宁心胶囊对大鼠冠状动脉微循环障碍(coronary microvascular dysfunction,CMD)冠脉微血管三维形态是否有改善。方法雄性健康SD大鼠随机分为三组:假手术组、模型组和双参宁心胶囊组,每组6只。双参宁心胶囊(90 mg/kg)组动物连续7 d灌胃给药剂量为1 mL/100 g,假手术和模型组灌胃等体积生理盐水,7 d后建立CMD模型,术后24 h处死取材。进行冠脉血管铸型及图像采集;开展心脏组织X射线衍射增强成像,将获得断层图像进行三维重建,观察冠脉微血管分布情况。结果使用自凝牙托材料可以快捷的制作大鼠冠脉血管铸型标本,可分辨的最小血管直径约为40μm;X射线衍射增强图像三维重建后得到冠脉微血管网的三维模型,最小可分辨直径10μm血管。血管铸型和X射线衍射增强成像均在一定程度上反应大鼠CMD时冠脉微血管空间分布改变,且可以观察到双参宁心胶囊干预对动物模型的冠脉微血管明显改善。结论X射线衍射增强成像方法能够在一定程度上构建出冠脉微血管网的三维可视化模型,可以观察到CMD大鼠冠脉微血管异常情况以及双参宁心胶囊具有增加冠脉微血管密度的作用。

舒血宁注射液新旧工艺对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用的比较

目的舒血宁注射液系银杏叶提取物制成的注射液,在国家中药标准化建设项目中制定了新工艺,本研究比较了舒血宁注射液新旧工艺对大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用,为工艺研究和今后的临床应用提供实验依据。方法实验分为8组:假手术组,模型组,金纳多组,舒血宁旧工艺20 mg·kg^-1组,舒血宁旧工艺10 mg·kg^-1组,舒血宁新工艺20 mg·kg^-1组,舒血宁新工艺10 mg·kg^-1组,合贝爽组。通过结扎冠状动脉左前降支后剪断结扎线造成大鼠心肌缺血再灌注损伤。经尾静脉注射给药,观察药物对心肌梗死范围、血清心肌损伤标记物及氧化应激相关指标的影响。结果经统计学计算,与模型组比较,金纳多组、合贝爽组、舒血宁新旧工艺均可缩小心肌梗死范围,降低血清CK,CK-MB及LDH水平,增加SOD活力,降低MDA水平。金纳多组也可缩小心肌梗死范围,降低MDA水平。新旧工艺同剂量下组间比较无显著性差异。结论新工艺与旧工艺在大鼠心肌缺血再灌注损伤保护作用强度类似,并未见明显差异。

胆固醇酯转运蛋白在家兔心脏肥大中表达的实验研究

目的复制异丙肾上腺素致家兔心脏肥大模型,考察胆固醇酯转运蛋白(CETP)的表达变化。方法将雄性新西兰兔随机分为正常组和模型组。模型组采用腹腔注射异丙肾上腺素15 mg/(kg·d)(分早晚2次进行)建立家兔心脏肥大模型,正常组腹腔注射等体积的生理盐水,连续14 d后,取血、心脏和肺脏,分离左、右心室,考察脏器指数;HE染色观察心肌组织形态学改变;RT-PCR法检测心脏肥大相关胚胎基因ANP、β-MHC mRNA表达;检测血清TG、TC、LDL-C及HDL-C的含量;检测左心室CETP的mRNA水平、蛋白表达及含量。结果与正常组比较,模型组家兔心脏质量指数(HW/BW)和左心室质量指数(LVW/BW)显著增加(P<0.05),右心室质量指数(RVW/BW)和肺脏质量指数(LW/BW)有增加的趋势,左心室心肌细胞体积明显增大,间质增宽,左心室ANP、β-MHC的mRNA表达显著上调(P<0.05)。与正常组比较,模型组家兔血清TG含量显著升高(P<0.05),TC、LDLC水平呈升高趋势,HDL-C水平呈下降趋势,模型组家兔左心室组织中CETP mRNA水平和蛋白表达均显著上调(P<0.05),CETP含量显著增加(P<0.05)。结论在异丙肾上腺素诱导的家兔心脏肥大模型中,CETP表达上调,但其是否与心脏肥大有关还有待进一步深入研究。本研究结果为后续研究CETP与心脏肥大的关系提供了理想动物模型。

中华跌打丸对大鼠急性软组织损伤的保护作用

目的:探讨中华跌打丸对大鼠急性软组织损伤的保护作用及机制。方法:采用重物高空垂直下落造成打击伤建立大鼠急性软组织损伤模型。180只大鼠随机分为正常对照组,模型组,阳性药组,中华跌打丸高、中、低(2、1、0.5 g/kg)剂量组,每组30只。灌胃给予相应药物,给药第1、3、5天各组分别随机处死10只大鼠取材,测定肿胀度、压痛阈值、局部组织中的肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素1β(IL-1β)、前列腺素E2(PGE2)水平和神经生长因子(NGF)含量,HE染色观察肌肉组织病理并进行评分。结果:与模型组比较,中华跌打丸各剂量组均可显著增加压痛阈值(给药第1、3、5天)(P<0.05,P<0.01),降低损伤局部肿胀度及TNF-α、IL-1β、PGE2水平,增加NGF含量(给药第3、5天)(P<0.01,P<0.05),降低肌肉病变总评分(给药第5天)(P<0.05);中华跌打丸中、高剂量组可显著降低肌肉病变总评分(给药第3天)(P<0.05);中华跌打丸高剂量组还可以显著抑制PEG2水平,降低肌肉病变总评分,提高NGF含量(给药第1天)(P<0.05,P<0.01)。结论:中华跌打丸对急性软组织损伤大鼠具有明显保护作用,其作用机制与降低损伤局部的TNF-α、IL-1β、PGE2水平和升高NGF含量有关。

基于蛋白质组学探讨注射用丹参多酚酸盐对心梗超急性期保护机制研究

心梗超急性期是指心梗发生后30 min内,症状不明显、诊断困难的一段时间,相关病理生理机制研究关注较少。本研究基于蛋白质组学探讨心梗超急性期蛋白质组改变并针对热休克蛋白B6(heat shock protein B6HSPB6)探讨注射用丹参多酚酸盐的干预作用与相关机制,为心梗超急性期病理机制及注射用丹参多酚酸盐的临床合理用药提供实验依据。采用基于质谱的非标记蛋白质组学对比评价大鼠心梗模型造模前后蛋白表达变化后,使用生物信息学方法分析共有表达蛋白及相关通路。接着运用分子对接技术评价注射用丹参多酚酸盐对共有差异蛋白HSPB6的结合作用,最后通过动物实验进行验证。本实验动物福利和实验过程均遵循中国中医科学院西苑医院实验动物伦理委员会的规定。本实验结果表明,非标记蛋白质组学结果共定量获得2166个蛋白质,其中有194个共有差异蛋白参与心梗超急性期心肌损伤和机体调节,主要涉及蛋白质同源二聚活性、氧气结合与运输、丝氨酸型内肽酶抑制剂活性等分子功能。其中,HSPB6蛋白参与心肌功能的调节作用。分子对接结果表明,注射用丹参多酚酸盐主成分丹参乙酸镁与HSPB6蛋白具有最低的结合能:-14.53 kcal·moL^(-1)。动物实验表明,与假手术组相比,模型组大鼠心功能损伤射血分数和短轴缩短率显著降低(P<0.001),心脏血流灌注明显下降(P<0.001),存在明显心肌纤维紊乱、心肌细胞水肿、间质内小血管充血等病理形态改变;给药组大鼠心功能损伤减弱,其中低剂量短轴缩短率明显改善(P<0.05),心肌组织病理性损伤明显减轻,HSPB6蛋白表达不同程度上调(P<0.01,P<0.001)。基于上述研究结果,发现注射用丹参多酚酸盐可一定程度改善大鼠心梗超急性期损伤心功能及病理形态,其作用机制可能与促进HSPB6表达有关。