紫藤根及含紫藤根经验方的初步药效研究

目的:探讨紫藤根及含紫藤根经验方的抗炎、镇痛作用及其药效动力学规律。方法:通过小鼠棉球肉芽肿炎症实验研究紫藤根及含紫藤根经验方的慢性增生性抗炎作用,同时通过小鼠扭体实验探索紫藤根及含紫藤根习用经验方的镇痛作用。结果:紫藤根及含紫藤根经验方3个剂量组均能不同程度地抑制肉芽的生长,对于棉球肉芽肿所引起的慢性炎症有抑制作用;同时,此方各剂量组均有极显著的镇痛作用。结论:验证了紫藤根及含紫藤根经验方的抗炎、镇痛效果,同时诠释了其经验方所占配伍比例偏少会使整个经验方的抗炎、镇痛效果更好,此研究能为紫藤根的质量标准与临床应用提供参考。

川乌配伍地榆的毒性研究

目的:研究贵州黔东南苗族民间川乌配伍地榆验方的减毒作用,揭示川乌配伍减毒作用机制,为指导安全有效使用乌头提供新的思路。方法:采用目测概率单位法计算川乌及其与地榆配伍小鼠的LD_(50)值。结果:川乌配伍地榆药液在4 h和24 h内的LD_(50)值分别为1.2863 g/kg、0.9967 g/kg,95%的置信区间分别为0.9398~1.7605 g/kg和0.7897~1.2581 g/kg;生川乌药液在4 h和24 h内的LD_(50)值分别为0.5561 g/kg、0.5175 g/kg,95%的置信区间分别为0.4529~0.6827 g/kg和0.3672~0.7294 g/kg。单味川乌的毒性大于川乌配伍地榆的毒性。结论:川乌配伍地榆有显著的减毒作用。本研究内容为后续深入川乌与地榆配伍的药效学研究提供了实验研究基础。

苗药紫藤根化学成分的研究

对紫藤(Wisteria sinensis(Sims)Sweet.)根的化学成分进行分离,通过硅胶、ODS、凝胶柱色谱及HPLC制备色谱等分离方法对紫藤根的乙酸乙酯部位及水部位进行了化学成分分离,通过HPLC、1HNMR(600MHz,DMSO-d6)、13CNMR(150MHz,DMSO-d6)等方法确认所得单体化学结构,分离得到6个化合物单体,分别为鸢尾苷(1)、鸢尾黄素7-O-β-D-(6”-O-乙酰基)-葡萄糖苷、芒柄花苷、紫藤苷、biochaninA7-O-glucoside、7-O-(6”-O-acetyl-β-D-glucopyranosyl)-6,4’-dimethoxy-5-hydroxyflavone。其中化合物6为首次从紫藤药材中分离得到。

苦皮藤薄层色谱鉴别方法的建立

为建立苦皮藤二氯甲烷部位的薄层色谱鉴别方法,该研究以雷公藤醌F(Triptoquinone F)和Epikatonic acid为对照品,考察供试品溶液制备方法、展开剂、点样量、展距、显色剂对薄层色谱分析的影响,确定苦皮藤的最佳薄层色谱条件。结果显示:采用薄层色谱GF254硅胶板,以二氯甲烷为萃取溶剂制备供试品溶液,甲苯-乙酸乙酯-冰醋酸=7:2:0.2为展开剂展开,喷以5%磷钼酸乙醇溶液,热风吹干显色,于日光底部灯下进行检视,所得苦皮藤层色谱分离效果和显色效果较佳,斑点清晰且特征性好。该方法安全、易操作、专属性强,可作为苦皮藤二氯甲烷部位的薄层鉴别方法。

苦皮藤根化学成分及其提取物体外抗炎活性研究

对苦皮藤(CelastrusangulatusMaxim.)根的化学成分进行分离鉴定,并评价乙醇提取物、二氯甲烷、正丁醇萃取部位和单体化合物的体外抗炎活性。采用MCI柱色谱、硅胶柱色谱、凝胶柱色谱、高效液相色谱(HPLC)等多种分离技术对苦皮藤根正丁醇萃取部位进行分离纯化,结合核磁共振波谱(NMR)以及质谱(MS)等结构鉴定手段确定所得单体成分结构,分离得到5个化合物,分别鉴定为(+)-4’-O-methylcatechin5-O-β-D-glucopyranoside(1)、(-)-儿茶素(2)、表儿茶素(3)、3,4-dimethoxyphenyl-β-Dglucopyranoside(4)、3,4,5-trimethoxyphyenyl-β-D-glucopyranoside(5),其中化合物1、4、5是首次从苦皮藤中分离得到的,并利用ELISA法测定了苦皮藤的乙醇提取物、二氯甲烷萃取部位、正丁醇萃取部位及分离得到的单体化合物对巨噬细胞(RAW264.7)肿瘤坏死因子(TNF-α)的分泌表达。结果显示乙醇提取物、正丁醇萃取部位在50μg/mL和20μg/mL浓度下均能显著降低LPS刺激RAW264.7细胞所释放的TNF-α的含量,同时化合物1、2、3、4、5均对巨噬细胞活化后TNF-α的表达有不同程度的抑制作用,提示正丁醇萃取部位可能是苦皮藤的主要抗炎部位,化合物1、2、3、4、5具有潜在的抗炎活性。

苦皮藤薄层鉴别方法优化

目的:对苗药苦皮藤药材正丁醇部位的薄层色谱条件进行提升优化。方法:择优筛选薄层板类型、展开系统、点样量、展距、显色剂,对苦皮藤药材正丁醇部位的儿茶素成分进行薄层色谱定性鉴别。结果:建立了以儿茶素为对照品,硅胶H板为展开板,点样量为2μL,苯:三氯甲烷:乙酸乙酯:正丁醇:甲酸(5:4:4:1:0.5)为展开剂,展距为8cm,显色剂为5%磷钼酸溶液的薄层色谱鉴定方法。试验得出贵州11批不同产地苦皮藤药材斑点清晰、分离度较好的薄层色谱图。结论:研究所建立的方法操作简便,专属性强、耐用性好、稳定性好,可用于苦皮藤药材正丁醇部位的鉴别。