工程教育认证背景下“乳品化学”课程教学改革探索

“乳品化学”是乳品工程专业的基础核心课程,在工程教育专业认证背景下,秉持“学生为中心、成果导向(OBE)、持续改进”的教育理念,按照由教向学转变,由分数向能力转变,反向设计,正向施工,以评促改,提升质量的认证的核心理念实施方式,从修订教学大纲、丰富课程内容、改进教学方法、构建线上线下混合教学模式和完善考核评价体系等多维度进行改革探索,满足工程教育认证,推动专业人才培养质量的提升。以期为工程教育专业认证的课程教学改革提供参考。

鸡堆形艾美球虫3-1E基因真核表达质粒的构建及其抗球虫免疫保护作用

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从堆形艾美球虫SH株子孢子中扩增3-1E基因片段,将其克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,构建重组表达质粒pcDNA3.1(+)-3-1E。质粒纯化后体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光技术和免疫组织化学技术检测3-1E蛋白在转染细胞中的表达情况。将构建的重组质粒以及空载体质粒分别于14、21日龄分2次经腿部肌肉注射免疫SPF雏鸡,28日龄除非免疫非感染对照组外各组攻击性感染5×104个堆形艾美球虫孢子化卵囊,观察真核表达质粒对球虫感染鸡的免疫保护作用并探讨其免疫保护机理。结果显示,与载体对照组相比,质粒pcDNA3.1(+)-3-1E 2次免疫后可显著提高脾CD8+T淋巴细胞亚型数量,并具有一定的抗球虫免疫保护作用,可显著减少每克粪便的卵囊排出量,降低十二指肠病变记分,减少增重下降等。

鸡传染性支气管炎病毒HN株5a 5b及N基因的遗传变异分析

从河南省某鸡场中疑似鸡传染性支气管炎(IB)的雏鸡病料中分离到1 株鸡传染性支气管炎病毒(IBV),暂命名为HN,鉴定为IBV。从接种HN毒株的鸡胚尿囊液中提取单股RNA后应用反转录聚合酶链反应(RT PCR)技术扩增得到包含IBV HN株5a、5b蛋白及N蛋白基因的约1 600 bp片段;将克隆测序的5a、5b及N基因分别与GenBank中11 株国内外参考毒株相应基因进行序列比较与遗传变异分析,发现IBV HN株变异独特,明显不同于国内外参考毒株。

鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达

应用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)技术从ConA刺激20h的白莱航鸡脾脏T淋巴细胞中扩增出鸡白细胞介素15(ChIL-15)全基因片段。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18-T-ChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将ChIL-15亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-ChIL-15。阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了ChIL-15蛋白在293T细胞中的表达。

鸡传染性支气管炎病毒HH06分离株的鉴定及其S1基因的分子特征

从黑龙江省哈尔滨市某鸡场疑似鸡传染性支气管炎的发病蛋鸡肾组织病料中分离到1株病毒,命名为HH06。该分离毒株经SPF鸡胚传代、血凝试验、负染电镜检查以及动物回归试验,证实为IBV。用RT-PCR扩增得到了HH06株S1基因片段,经测序,并与国内外IBV参考毒株的相应基因进行序列比较分析。结果表明,HH06株S1基因由1 620个核苷酸组成,推导的多肽由540个氨基酸残基组成,推导的氨基酸裂解位点序列为5个连续碱性氨基酸HRRRR。HH06株S1基因序列与除LX4外的其他参考株相应基因的核苷酸及氨基酸序列同源性均较低,亲缘关系均较远。初步证实HH06株为不同于IBV疫苗株的一个新毒株。

3-1E/mChIL-15融合基因构建及在真核细胞中的表达

将鸡堆形艾美尔球虫（E.acervulina）子孢子和裂殖子表面抗原3-1E基因片段与鸡白细胞介素15成熟蛋白基因片段（mChIL15）通过四个柔性氨基酸SPGS连接,构建并鉴定真核表达质粒pcDNA3.1/3-1E-linker-mChIL-15。表达质粒纯化后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光和免疫组织化学方法对重组质粒的体外瞬时表达进行检测。结果表明,成功构建了融合基因3-1E-linker-mChIL-15,转染后30h可检测到融合基因编码的融合蛋白在293T细胞中的瞬时表达。研究为鸡艾美尔球虫基因工程疫苗进一步研制及应用奠定了基础。

PBL教学模式在兽医病理解剖教学中的应用

PBL(problem based learning)已经成为一种国际流行的教学模式。该教学模式的运用可以有效提高学生自主学习能力、独立思考能力以及分析和解决实际问题能力。文章就PBL教学模式在兽医病理解剖学教学中的应用及需要注意的几个问题进行了论述,旨在为提高兽医病理解剖学教学效果提供参考。

鸡传染性支气管炎组织嗜性的研究进展

鸡传染性支气管炎(AvianInfectiousBronchitis,IB)是由鸡传染性支气管炎病毒(InfectiousBronchitisvirus,IBV)引起的鸡的一种急性、高度接触性呼吸道疾病。自1982年邝荣禄报告了肾型IB以来,国内IB的发生已经遍布华北、华南、西北、西南和东北等大部分省、市和自治区。IBV抗原性异常复杂,不同毒株的结构是不均的,在毒力、致病性和组织嗜性上存在着很大差异。本文对目前国际公认的由IBV所致疾病的致病型(主要包括呼吸型、肾型、产蛋下降型及肠型,腺胃型)进行了综述,并从基因水平探讨了决定IBV组织嗜性的因素。

白细胞介素15的研究进展

白细胞介素 15 (interleukin 15IL - 15 )是近年发现的一种在分子结构及生物学性质方面与白细胞介素 2 (inter leukin 2IL - 2 )相似的细胞因子。自 1994年发现以来 ,由于其在医学及兽医学上重要的生物学作用而受到研究者们的重视。现对IL - 15及其在兽医学上具潜在应用价值的鸡IL - 15近年来取得的研究进展作一综述。

新型鸡白细胞介素15真核表达质粒构建及其体外表达

应用重叠扩增PCR(SOEPCR)技术将鸡白细胞介素15(ChIL-15)的冗长信号肽序列替换为较短的鸡白细胞介素2(ChIL-2)信号肽序列,构建了一种新型ChIL-15融合基因(NChIL-15)。将其连接到克隆载体pMD18-T中得到重组克隆质粒pMD18T-NChIL-15。阳性克隆质粒经鉴定正确后将NChIL-15基因亚克隆入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,得到重组阳性表达质粒pcDNA3.1(+)-NChIL-15。阳性表达质粒经鉴定正确后应用磷酸钙法体外转染293T细胞,通过间接免疫荧光试验(IFA)检测到了NChIL-15蛋白在293T细胞中的表达。本研究为NChIL-15佐剂作用的深入研究奠定了基础。

问题讨论教学法在兽医尸体剖检诊断教学中的运用

问题讨论教学法即PBL（Problem Based Learning）教学法已经成为一种国际流行的教学模式。该教学模式的运用可以有效提高学生自主学习能力，独立思考能力以及分析和解决实际问题能力。文中就PBL教学模式在兽医尸体剖检诊断教学中的应用及应用中需要注意的几个问题进行了论述，旨在为提高兽医尸体剖检诊断教学效果提供重要参考。

白细胞介素-15研究进展

白细胞介素-15(interleukin 15 IL-15)是近年发现的一种在分子结构及生物学性质方面与白细 胞介素-2(interleukin2IL-2)相似的细胞因子。自从1994年发现以来,由于其在医学及兽医学上的重要 的生物学作用而受到研究者们的重视,在各个方面的深入研究已取得了一定的进展。本文对IL-15 及其在兽医学上具有潜在应用价值的鸡IL-15(chicken interleukin 15 ChIL-15)近年来取得的研究进展作 一综述,内容涉及IL-15的结构及受体、产生及基因表达、生物学作用。

牛白细胞介素2基因原核表达及多克隆抗体制备

根据GenBank发表的牛白细胞介素2(BoIL-2)基因序列,设计1对特异性引物,应用RT-PCR技术扩增出重组牛白细胞介素2(rBoIL-2)基因。将克隆片段与pMD18-T载体连接,并经过酶切及PCR鉴定,测序结果显示,克隆的BoIL-2基因与GenBank发表的BoIL-2基因序列同源性为98.7%。将测序正确的克隆片段与pET30a(+)载体连接,构建重组表达质粒pET30a(+-)rBoIL-2,通过双酶切及PCR鉴定阳性的重组质粒进行序列测定后在大肠杆菌的表达,分子质量约为23.49ku;表达产物主要分布在包涵体中。Western blotting证实所得到的重组蛋白为BoIL-2重组蛋白。用镍离子亲和树脂对所得的BoIL-2重组蛋白进行纯化,并免疫新西兰兔成功制备兔抗rBoIL-2多克隆抗体,为下阶段的研究提供了重要的试验材料。

产肠毒素大肠杆菌STa突变体、LTB和STb融合蛋白在乳酸菌中组成型分泌表达及其免疫原性分析

为获得产肠毒素大肠杆菌(ETEC)抗原STa突变体(mSTa)、LTb和STb融合蛋白在乳酸菌表达系统中组成型分泌表达,本研究将mSTa、LTb、STb三价抗原融合基因,克隆于p23启动子-USP45分泌信号肽之后,插入到乳酸乳球菌表达载体pTX8048中,构建了重组表达载体pTX-sls,将其电转化到宿主菌乳酸乳球菌L.lactisNZ9000中进行表达,应用westernblot、ELISA方法鉴定蛋白表达情况。将重组乳酸乳球菌pTX-sls/NZ9000口服免疫BALB/c小鼠,分别测定了免疫后不同时间血清中特异性IgG、粪便中特异性的sIgA水平以及血清的中和活性;采用MTT法检测免疫小鼠脾淋巴细胞增殖情况,流式细胞术检测Th细胞免疫类型。结果显示,目的蛋白mSTa-LTB-STb以分泌形式组成型表达,可被阳性血清所识别。在免疫小鼠血清和粪便中均可检测到特异性IgG、sIgA,血清抗体具有一定的中和毒素作用。结果表明,该重组乳酸乳球菌具有作为口服疫苗的潜在应用价值,本研究为研制ETEC乳酸菌活载体口服疫苗奠定了基础。

现代教育技术在兽医病理解剖学教学中的应用

兽医病理解剖学传统的教学模式存在诸多弊端,其教学改革已成为必然。现代教育技术的迅速发展,为兽医病理解剖学传统教学模式的改变提供了条件。将计算机多媒体、CAI课件及网络通讯技术充分应用于兽医病理解剖学教学,可提高其教学质量和教学效率。同时,现代教育技术手段的应用也有利于教师自身素质的提高。

鸡氨肽酶N蛋白多克隆抗体制备及其生物学功能研究

试验参考Gen Bank上鸡氨肽酶N(g APN)基因序列(登录号为NM_204861.1)设计多对特异性引物,利用RT-PCR分段克隆g APN基因各段克隆产物并利用SOE-PCR将其进行连接,得到大小为2 906 bp的全长基因。利用原核表达载体p ET-30a(+)构建重组质粒p ET-g APN并转化E.coli Rosetta,经诱导表达得到大小为113 ku目的条带。以纯化g APN重组蛋白为免疫原制备兔抗g APN多克隆抗体,间接Elisa方法检测多抗血清效价为215。Western Blot试验证明,此多克隆抗体可以与原核表达的蛋白产生特异性条带,同时与18日龄鸡肾组织中获得的天然g APN蛋白样品有良好的反应性。间接免疫荧光试验显示,多克隆抗体可检测到pc DNA-g APN转染HELA细胞所表达的g APN蛋白。上述结果可为g APN蛋白的深入研究奠定基础。

一例疑似犬苯中毒的诊治

近年来,随着人们生活水平的不断提高,新房的购置和对房屋进行高档装潢的人在不断增加.因此也出现了一些问题,如一些装潢材料对人体有害,其中装饰材料中苯和甲醛对人体的危害较大.犬、猫等动物做为人类最为喜爱的宠物伴侣,通常和主人生活在一起,因此以前很少发生在宠物身上的疾病,近年来也有发生.近日在临床工作中遇到1例疑似犬苯中毒的病例,现将该病例的诊疗过程报道如下.