人乳寡糖的结构及其分离分析

母乳中存在的人乳寡糖(HMOs)是一类结构高度复杂的低聚糖,对婴儿的肠道菌群、免疫屏障、大脑发育发挥积极作用。由于母乳中基质复杂,寡糖的种类繁多,丰度跨度大,存在众多异构体,这都使得检测面临诸多挑战。现已有多种技术用于HMOs的分析,发现了200多种HMOs,液相色谱和毛细管电泳在分离HMOs方面效果显著,核磁共振、质谱、红外多光子解离光谱推动了对HMOs结构的全面解析。本文回顾了对HMOs实现高灵敏度和高特异性分析的多种技术方法,比较了不同技术的优缺点,还重点介绍了质谱以及不同技术联用在推动HMOs解析和测定方面的突破,为探究寡糖的结构-功能关系、深入理解HMOs的生物学功能提供了全面的技术支持。

基于5G通信的车联网自动驾驶关键技术

随着时代的进步,5G技术与车联网技术逐渐融合,推动了传统自动驾驶技术创新发展。基于DSRC的车联网技术因传输距离有限,在实际应用中需要对路边设施进行大规模改造,在国内未得到广泛应用。该文对基于5G通信的车联网自动驾驶关键技术进行研究,从感知和决策层面分析5G技术在车联网自动驾驶中的应用,阐述5G车联网对自动驾驶技术发展的影响,以期推动汽车产业朝智能化、自动化、绿色化方向发展。

Toll样受体4在A型流感病毒诱导的小鼠肺部炎症中的作用机制

目的:通过研究A型流感病毒(influenza A virus,IAV)诱导的野生型(wild-type,WT)和Toll样受体4(Toll-like receptor 4,TLR4)敲除型(TLR4del)C57BL/6小鼠肺部炎症差异,探讨TLR4在IAV诱导的肺部炎症中的作用机制。方法:设立WT组和TLR4del组,用IAV滴鼻感染WT小鼠和TLR4del小鼠以构建小鼠肺炎模型,每组各48只。分别在感染0、1、3、5、7和9 d处理动物。常规法检测小鼠体质量,计算肺指数、脾指数和胸腺指数。使用苏木精-伊红(hematoxylin-eosin,HE)染色法检测不同时间点各组小鼠肺组织病理变化。ELISA实验检测小鼠支气管肺泡灌洗液中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和IL-8的含量,探讨不同时间点各组小鼠炎症因子的分泌情况。RT-qPCR、免疫组化和Western blot检测肺组织中TLR4、髓样分化因子88(myeloid differentiation factor 88,MyD88)和肿瘤坏死因子受体相关因子6(tumor necrosis factor recep⁃tor-associated factor 6,TRAF6)的mRNA和蛋白表达情况,进一步探讨TLR4在IAV感染诱导的小鼠肺炎模型中的作用机理。结果:与WT组小鼠相比,TLR4del组小鼠在感染3 d后的体质量、脾指数和胸腺指数显著上升(P<0.05),肺指数显著下降(P<0.05)。感染3 d后,与WT组小鼠相比,TLR4del组小鼠支气管肺泡灌洗液中TNF-α、IL-1β、IL-6和IL-8含量显著下降(P<0.05)。HE染色结果显示,敲除TLR4能减轻IAV感染的小鼠肺组织病理损伤。RT-qPCR、免疫组化和Western blot结果显示,与WT组相比,感染3 d后,TLR4del组小鼠肺组织MyD88和TRAF6的mRNA和蛋白表达水平显著下降(P<0.05)。结论:IAV感染诱导小鼠肺部炎症的损伤机制可能与TLR4介导的TLR4-MyD88-TRAF6信号通路有关。

基于VEGF/PI3K/Akt/eNOS信号通路探讨木犀草素干预A型流感病毒的作用机制

目的探讨木犀草素对A型流感病毒(influenza A virus,IAV)感染的小鼠肺上皮细胞损伤模型的作用机制。方法将小鼠肺上皮MLE-12细胞分为正常组、模型组、奥司他韦组、高剂量组和低剂量组,除正常组外,其余4组均使用IAV感染,正常组加入等量病毒稀释液;2 h后弃病毒工作液,正常组和模型组加入病毒维持液,药物组加入用病毒维持液稀释的药物工作液,干预8 h后收集细胞。使用CCK-8检测细胞增殖情况;ELISA实验检测细胞上清液中肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)和白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的表达;免疫荧光检测细胞内血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)蛋白表达情况;RT-qPCR技术检测细胞内VEGF、蛋白激酶B(protein kinase B,Akt)、3-磷酸肌醇激酶(phosphoinositide 3-kinase,PI3K)和内皮型一氧化氮合酶(endothelial nitric oxide synthase,eNOS)mRNA表达情况;Western blot法检测细胞内VEGF、Akt、PI3K和eNOS蛋白表达情况。结果CCK-8结果显示,不同浓度的木犀草素均能降低IAV感染所致的细胞损伤(P<0.01),其EC50值为7.204μmol/L,因此,将后续实验中的木犀草素药物浓度定为5μmol/L和2.5μmol/L。与正常组相比,模型组细胞上清液中TNF-α和IL-6升高(P<0.01),细胞内VEGF的荧光蛋白强度增强(P<0.01),细胞内VEGF、Akt、PI3K和eNOS的mRNA和蛋白的表达升高(P<0.01);与模型组相比,高剂量组和低剂量组细胞上清液中TNF-α和IL-6降低(P<0.01),细胞内VEGF的荧光蛋白强度减弱(P<0.01),细胞内VEGF、Akt、PI3K和eNOS的mRNA和蛋白的表达降低(P<0.01)。结论木犀草素能抑制炎性细胞因子的分泌,缓解IAV感染所致的细胞损伤,其过程可能与VEGF/PI3K/Akt/eNOS信号通路密切相关。

CD4^(+)T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴及急性肺损伤中的研究进展

CD4^(+)T细胞作为细胞免疫的主要武器,在控制和清除感染方面起着至关重要的作用,是机体抵抗感染性疾病的重要屏障。流感病毒感染引起的呼吸道感染性疾病具有极高的传染性、发病率及病死率,其感染机制较为复杂,尚未得到全面阐述。机体在流感病毒感染后诱发的旺盛免疫反应被称为“细胞因子风暴”,与过激的促炎细胞因子和广泛的组织损伤有关,最终可能导致急性肺损伤。因此,本文总结目前研究进展,重点阐述了CD4^(+)T细胞在流感病毒感染诱发细胞因子风暴的作用机制及急性肺损伤中的影响,为后续研究提供相关思路及理论指导,以期为流感病毒引起的疾病带来新的有效诊疗方法。

基于STM32和GPS的车载定位仪设计

随着社会的进步,出现了越来越多的代步工具,其中以各种车辆为主流,但是交通拥堵、交通事故、车辆丢失等问题在一定程度上影响了人们的生活,如何完善车辆防盗、监控、管理系统,是当前不容忽视的问题。近年来,嵌入式系统飞速发展,车载定位仪逐渐走入人们的视野,其以功能强、体积小的优势广泛影响人们的生活。该文基于STM32和GPS模块设计了车载定位仪,阐述系统设计原理,并分别探讨具体的硬件系统设计和软件系统设计,最后对该车载定位仪进行测试,结果显示,其性能稳定,可准确对车辆进行定位。

流感病毒诱导的小鼠肺上皮细胞损伤及外泌体miRNA差异表达谱研究

目的:通过研究甲型流感病毒刺激后小鼠肺上皮细胞源性外泌体的微小RNA(miRNA)差异表达谱,探讨流感病毒诱导肺上皮细胞损伤的机制。方法:采用甲型流感病毒(MOI=0.2)诱导小鼠肺上皮MLE-12细胞,同时设空白对照组,通过CCK-8法检测不同诱导时间下的细胞活力,明确甲型流感病毒诱导细胞损伤的最佳条件。通过流式细胞术检测细胞凋亡水平,RT-qPCR和Western blot检测炎症反应相关因子的表达水平。采用超速离心法提取甲型流感病毒诱导的MLE-12细胞上清液中的外泌体,并通过透射电镜、纳米颗粒跟踪分析、Western blot及高通量单细胞测序检测外泌体形态、粒径、浓度、膜标志蛋白表达及其miRNA差异表达谱。结果:CCK-8实验结果显示,MOI=0.2的甲型流感病毒干预8 h的MLE-12细胞活力抑制率最为符合本研究需要。以该条件干预细胞,凋亡率(24.11%±0.17%)显著升高;甲型流感病毒核蛋白(NP)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和白细胞介素6(IL-6)的mRNA和蛋白表达水平均显著升高。透射电镜观察到提取的外泌体为圆形的囊泡状;纳米颗粒跟踪分析检测到甲型流感病毒感染的细胞上清液中外泌体的粒径分布发生明显改变;Western blot检测到外泌体膜标志蛋白(CD63、CD81和TSG101)的表达。细胞测序结果共检测出154个差异表达的miRNAs,其中82个呈上调趋势,72个呈下调趋势;挑选出10个进行RT-qPCR验证,有6个与测序结果一致。结论:流感病毒诱导小鼠肺上皮细胞损伤的机制可能与外泌体特异性miRNA有关。

一位伐木工人的日记

1982年8月4日晴转小雨 今年我终于完成任务了。这几个月每天都是完不成任务，被老板批评真不是什么好滋味，现在可以睡一个安稳觉了。唉，这鬼天气怎么又下起雨来了!

制造业单项冠军企业的品牌指标体系构建

通过梳理制造业单项冠军企业相关资料,并对陕西、浙江、福建等地13家单项冠军企业进行实地调研与深度访谈,深入探索制造业单项冠军企业的特点,在此基础上初步提出影响制造业单项冠军企业品牌建设的关键因素包括研发管理能力、质量管理能力、品牌管理能力与外部市场环境。基于相关理论进行深入分析,将确立的4个一级指标分别进一步细分为3个二级指标,从而构建了制造业单项冠军企业品牌建设评价指标体系。

浅析《罗森格兰兹和吉尔登斯吞已死》——论后现代社会对《哈姆雷特》的全新解读

《哈姆雷特》在人物设置,叙述方式、戏班的作用三个角度进行比较来阐释两者的不同之处,并诠释斯托帕德在影片中反映的荒诞的命运观,同时也借机窥视彻底反传统的后现代社会对《哈姆雷特》这部经典作品的全新解读。

从荒诞主题到荒诞世界——加缪《局外人》析

默尔索被定义为"局外人",理由在于他对生活抱着一种无所谓的态度,他抛弃了普世的道德伦理规范,否定了西方的基督教神学传统。无论是从作者的意图还是小说后来产生的效果来看,《局外人》都是一部关于荒诞的作品。对默尔索的审判不仅展示了他和社会之间的鸿沟,还促使他试图跨越它。而在失败之后默尔索终于意识到社会的不可理解性。在默尔索的死刑上观众的期盼不是对世界的妥协,而是认识到世界的荒谬之后的积极的反抗:他不再试图逃避死亡,反而迎接死亡的到来,并且希望无意义的死亡能够在人们仇恨的叫喊声中找寻意义。

简析苔丝悲剧形象塑造的三重原型

以苔丝形象的三重原型根源为切入点,可以看出苔丝的悲剧与古希腊命运悲剧有着相似性。德伯家的先祖的影子一直萦绕苔丝的四周引领她走向毁灭,《圣经》中夏娃、亚当和毒蛇的隐喻则让我们看到了苔丝经历的神话原型,而民谣中不断重复的失贞与杀手的故事则成为苔丝经历的一种社会上的映照。它们使苔丝的悲剧不再仅仅局限于对当时社会的批判,同时也关注人存在的无限偶然,丰富了小说的意义和价值。

传播仪式观下关于超话社区粉丝集体行动的探索

饭圈文化依赖“互联网”的发展创生出了诸多新表征,粉丝的集体行动也伴随着技术红利从线下转移到了线上。其中,微博超话社区作为最大的粉丝聚集地,为粉丝集体行动提供了超越时间和空间的活动场域。粉丝们在超话中相互交流、分享经验、抒发情感、组织行动,形成了独特的粉丝文化。本文主要从传播仪式观的理论视角出发,根据超话中粉丝的表现,总结粉丝集体行动具有的独特仪式性特点和积极、消极影响,并为规范超话中粉丝的集体行动提出合理建议。

基于“扶正祛邪”治则的中医药抗病毒性肺炎作用机制的研究进展

病毒性肺炎是一种由不同病毒感染引起的急性呼吸道疾病,起病多急骤,临床上以发热、头痛、咳嗽、全身酸痛等为主症,易继发细菌性感染。目前,抗病毒药物是治疗病毒性肺炎的主要药物,但存在易产生耐药性、副作用多、疗效差等缺点。中医药治疗疾病临床经验丰富,疗效显著,其重要理论“扶正祛邪”在中国古代瘟疫类传染病的防治中发挥着重要作用,“扶正气”作用能够调节机体的免疫功能,增强机体抗击病毒的能力,即“正气存内,邪不可干”。本文通过大量文献分析,从“扶正”和“祛邪”的中医理论出发,阐述中医药抗病毒性肺炎的作用机制,为临床中医药治疗病毒性肺炎提供理论依据,以期更好为临床服务。

被拒斥的“真空”——论埃科《波多里诺》中的虚构与真实

本文从叙述结构和故事内容两个方面对翁贝托·埃科的第四本小说《波多里诺》进行阐释。在叙述结构上,两名叙述者的存在使得故事被分为两重叙述时空,在第一重叙述时空中从叙述者A到尼塞塔再到波多里诺的三重视角转换使得读者的怀疑被悬置,而第二重时空中波多里诺叙事主体这一身份的被剥夺则使得这一时空从自述变成加工过的“虚构”。而在内容处理上,夹在理性世界和“空白”世界之间的“真空”地带的存在使得真实与虚构之间的界限被混淆。这独特的“真空”结构打破了读者与作品之间的“契约”,破坏了读者在小说中寻求真实的努力,而这正是这本小说独特的文学性之所在。

新型振动规律智能演示仪

本期点评专家谭迪熬中国发明协会院士专家咨询工作委员会首任专家,中国发明协会中小学创造教育分会会长,科技创新教育特级教师,教育部国培计划专家库专家。简谐运动和阻尼运动是高中物理的重点,也是难点,现在高中物理新教材采用水平弹簧振子替代以前的砂摆演示简谐运动的图像,但目前实验室的简谐运动演示仪有诸多不足,比如,描绘图像的笔不稳定、用笔描图时摩擦力较大、画出的图像不规范、实验效果差等。

参观一校科技馆有感

今天老师说要带我们去一校参观科技馆,我的心情无比得激动。我们来到了一校,进了一校大门往操场一走,首先映入眼帘的是用冰雪雕塑的小房子,今年按照教育局里的要求各个学校都做了雪雕,看到一校用雪做的艺术特别的新颖和温馨,真想在进那所小房子里去看一看,坐一坐。

女性文学中的男性标准——以严歌苓小说《一个女人的史诗》为例

在女权主义高涨的今天,女性主张独立自由,可是却忽视了女性价值标准中隐含的男性价值,本文以《一个女人的史诗》为例探讨女性书写中的男性标准,并指出这种价值标准应该被清算。

A型流感病毒通过激活HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路诱导肺上皮细胞铁死亡的机制

【背景】已发现A型流感病毒(influenza A virus,IAV)可激活多种程序性细胞死亡途径,这些途径在宿主细胞防御系统中起着重要作用。铁死亡是一种新型的非凋亡细胞死亡,主要由铁依赖性脂质过氧化介导。【目的】探讨HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路在IAV感染诱导的细胞铁死亡中的作用机制。【方法】使用IAV感染小鼠肺上皮细胞(MLE-12)构建细胞损伤模型后检测细胞病毒滴度和炎性因子分泌;使用荧光探针法和比色法检测细胞活性氧(reactive oxygen species,ROS)、超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)、总铁离子和亚铁离子;透射电镜观察细胞超微结构;检测细胞铁死亡标志物mRNA和蛋白表达;生物信息学预测流感病毒诱导铁死亡潜在作用机制;激光共聚焦观察IAV对细胞缺氧诱导因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)表达影响,并检测其信号通路相关元件mRNA和蛋白表达;构建HIF-1α敲低模型,探讨HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路在IAV诱导细胞铁死亡中的作用。【结果】铁死亡抑制剂能降低IAV感染细胞的病毒载量和炎性因子的分泌,并能抑制细胞ROS、总铁离子和亚铁离子含量,促进细胞SOD活性,修复细胞线粒体损伤,逆转铁死亡标志物mRNA和蛋白表达;生物信息学预测发现HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路在IAV诱导的铁死亡中具有重要的相关性;试验验证IAV感染能促进细胞HIF-1α的激活和易位入核,并激活HIF-1α、血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)的mRNA和蛋白表达。【结论】IAV感染可以诱导细胞发生铁死亡,其作用机制可能是通过激活HIF-1α/iNOS/VEGF信号通路发挥作用。

麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向SLC4A1抑制流感病毒细胞级联损伤效应研究

目的探究麻杏石甘汤通过外泌体miR-1249-5p靶向溶质载体家族4成员A1(solute carrier family 4 member 1,SLC4A1)抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤-巨噬细胞极化的级联损伤效应的作用机制。方法以肺上皮细胞为研究对象,采用CCK-8检测麻杏石甘汤含药血清的安全剂量和对流感病毒刺激肺上皮细胞治疗剂量,NanoSight鉴定肺上皮细胞源外泌体的粒径和浓度,qRT-PCR检测外泌体中miR-1249-5p基因表达。以与肺上皮细胞源外泌体共培养的巨噬细胞为研究对象,采用qRT-PCR检测巨噬细胞中miR-1249-5p、SLC4A1和核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)通路相关基因表达;Western blotting检测巨噬细胞中SLC4A1和NF-κB通路相关蛋白表达;流式细胞术和qRT-PCR检测巨噬细胞M1/M2极化表型。结果CCK-8结果显示,10%和20%的麻杏石甘汤含药血清对肺上皮细胞无细胞毒性,显著抑制流感病毒诱导的肺上皮细胞损伤(P<0.05、0.01);NanoSight检测各组肺上皮细胞源外泌体大小无明显变化,外泌体浓度有所改变;qRT-PCR结果显示流感病毒刺激的肺上皮源外泌体miR-1249-5p基因表达明显降低(P<0.01),各给药组miR-1249-5p基因表达显著升高(P<0.05、0.001)。肺上皮源外泌体共培养后的巨噬细胞中miR-1249-5p基因表达与外泌体相一致(P<0.05、0.001);qRTPCR和Western blotting结果显示,模型组巨噬细胞SLC4A1和NF-κB通路基因和蛋白表达显著升高(P<0.01、0.001),各给药组SLC4A1和NF-κB通路基因和蛋白表达显著下降(P<0.05、0.01);流式细胞术结果显示模型组巨噬细胞CD86+比例明显增高(P<0.01),各给药组巨噬细胞CD86+比例显著降低(P<0.05);qRT-PCR结果显示共培养后模型组巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)和IL-1β的表达显著升高(P<0.01、0.001),IL-10和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的表达显著下降(P<0.05、0.01),各给药组以上因子表达趋势与之相反(P<0.05、0.01、0.001)。结论麻杏石甘汤可能通过肺上皮细胞源外泌体递送miR-1249-5p到巨噬细胞中,并靶向巨噬细胞中SLC4A1调控NF-κB信号通路,抑制流感病毒的细胞级联损伤效应的作用机制。