芦丁对高糖、高脂饮食致小鼠肾脏损害的保护作用

目的:研究芦丁对高糖高脂饮食导致的小鼠肾脏损害的保护作用。方法:40只雄性ICR小鼠随机分成5组,正常饮食组(ND组)、高脂饮食组(HFD组)、芦丁保护高脂饮食组(RHFD组)、高糖饮食组(HSD组)、芦丁保护高糖饮食组(RHSD组),每组各8只。连续喂养120 d后取肾脏组织测定脂代谢生化指标TC、TG含量,检测氧化应激生化指标SOD、GSH-Px和MDA水平,HE染色观察肾脏组织基本形态结构,PAS染色观察肾脏组织基底膜变化。结果:芦丁能够明显减轻高糖、高脂饮食小鼠的体质量(P<0.05),提高肾脏组织抗氧化酶GSH-Px活性(P<0.05),并降低脂质过氧化产物MDA水平(P<0.05),以减轻氧化应激,改善肾小球上皮细胞和系膜增生,鲍曼囊壁层增厚,肾小管基膜增厚及空泡变性。结论:芦丁可以有效改善高糖高脂饮食导致的小鼠肾脏损害,对高糖高脂饮食造成的小鼠肾脏损害具有一定的保护作用。

芦丁对全氟辛酸所致的小鼠脂代谢紊乱及肾脏损伤的改善作用

目的 探讨芦丁对全氟辛酸(PFOA)所致小鼠脂代谢紊乱及肾脏损伤的改善作用。方法 将15只雄性小鼠随机分为对照组、PFOA组、PFOA+芦丁组,每组5只。PFOA组给予灌胃PFOA溶液20 mg/(kg·d),PFOA+芦丁组给予灌胃PFOA溶液20 mg/(kg·d)及芦丁溶液20 mg/(kg·d),对照组给予灌胃ddH_(2)O,连续干预14 d。每天记录小鼠体重,干预14 d后处死小鼠,采用HE染色及基底膜过碘酸六胺银(PASM)染色观察小鼠肾脏组织病理变化,并检测小鼠血清三酰甘油、总胆固醇、HDL-C、LDL-C、尿素、肌酐水平及乳酸脱氢酶(LDH)活性。结果 (1)从干预第6天开始,PFOA组和PFOA+芦丁组小鼠的体重均低于对照组(均P<0.05),而PFOA组与PFOA+芦丁组比较差异无统计学意义(均P>0.05)。(2)HE染色和PASM染色结果显示,与对照组相比,PFOA组小鼠肾脏出现明显的结构性损伤,肾小球体积增大,系膜细胞和内皮细胞增生,肾小管上皮细胞水肿、脱落及轻度空泡样变性,肾小球系膜增厚,肾小管基底膜增厚、皱缩,近端小管刷状缘消失;而与PFOA组相比,PFOA+芦丁组小鼠的肾脏组织损伤明显减轻。(3)PFOA组的血清总胆固醇、LDL-C、尿素水平均高于对照组,血清肌酐水平低于对照组;PFOA+芦丁组的血清总胆固醇、LDL-C、尿素水平均低于PFOA组,血清肌酐水平高于PFOA组(均P<0.05);3组小鼠的血清三酰甘油、HDL-C水平及LDH活性比较,差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 芦丁可改善PFOA造成的小鼠肾脏病理学变化及肾功能损伤,对小鼠肾脏具有一定保护作用,并有助于调节其脂质代谢。

芦丁对高脂高糖饮食造成的小鼠脑损伤的保护作用

目的探讨芦丁(rutin)对高脂高糖饮食诱导的小鼠脑内氧化损伤的保护作用及可能机制。方法40只SPF级小鼠适应性喂养1周后,随机分为如下5组:正常组、高脂组、高糖组、芦丁+高脂组和芦丁+高糖组,每组8只。每周称重一次,喂养120 d后,采血,处死。同时,苏木精-伊红染色和尼氏染色观察分析脑组织形态学、神经元分布及病理变化。测定血清甘油三酯(TG)、总胆固醇(TC)含量,脑组织匀浆中超氧化物歧化酶(SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性及丙二醛(MDA)含量。结果高脂组和高糖组小鼠体质量明显高于正常组,芦丁+高脂组和芦丁+高糖组的体质量分别低于高脂组和高糖组。高脂组血清中的TG、TC含量,MDA含量均显著高于正常组(P<0.05),芦丁+高脂组血清中的TG、TC含量,MDA含量明显低于高脂组(P<0.05);高糖组MDA含量较正常组显著增加(P<0.05),而芦丁+高糖组血清中MDA含量与高糖组相比有下降趋势。与正常组相比,高脂组和高糖组脑神经细胞出现部分不规则稀疏排列,胞质中Nissl小体减少,芦丁+高脂组和芦丁+高糖组均有明显改善。结论芦丁可通过降低血脂水平、抗氧化减轻高脂高糖膳食所诱导的肥胖小鼠脑内氧化应激损伤。

全氟辛酸对SD大鼠肝脂质代谢紊乱及脂肪酸代谢相关蛋白表达的影响

目的:全氟辛酸(perfluorooctanoic acid,PFOA)能引起动物体脂代谢紊乱,影响脂肪酸的分解与合成,过氧化物酶体增殖剂激活受体(peroxisome proliferators-activated receptor,Ppar)在此过程中发挥极其重要的作用。本研究旨在探讨PFOA对Sprague Dawley(SD)大鼠肝脂质代谢紊乱及其相关蛋白表达的影响。方法:将40只雄性SD大鼠随机分成对照组(注射双蒸水)、低剂量组[PFOA剂量为1.25 mg/(kg·d)]、中剂量组[PFOA剂量为5.00 mg/(kg·d)],高剂量组[PFOA剂量为20.00 mg/(kg·d)],每组10只。正常饮食,采用PFOA经口灌胃14 d,每日观察、称重、记录。经口灌胃后,采血、处死大鼠、迅速剥离其肝脏。取部分肝组织固定于4%多聚甲醛后进行糖原过碘酸希夫(periodic acid-schiff,PAS)染色;检测血清以及肝组织中HDLC、LDLC、TG、TC的含量及相关酶的活性;蛋白质印迹法检测环磷腺苷效应元件结合蛋白(cyclic adenosine monophosphate-response element binding protein,Cbp)、类氨基酸合成酵母同源物通用调控蛋白2(general control of amino acid synthesis 5-like 2,Gcn5L2)、Ppar γ、沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,Sirt1)和人类视黄醇X受体α2(retinoid X receptor alpha 2,Rxrα2)的表达水平。结果:PFOA暴露14 d后,与对照组相比,中、高剂量组的SD大鼠肝细胞的胞质及胞核内PAS染色阳性颗粒明显减少。与对照组相比,低、中剂量组血清中LDLC、TC含量显著降低(均P<0.05),高剂量组中LDLC、TC含量升高,但差异无统计学意义(均P>0.05),HDLC、TG差异均无统计学意义(均P>0.05);低、中、高剂量组血清中碱性磷酸酶(alkaline phosphatase,AKP)、谷丙转氨酶(alanine aminotransferase,ALT)的活性显著升高(均P<0.05);高剂量组中ALT/谷草转氨酶(aspartate aminotransferase,AST)比值显著升高(P<0.05);LDH、TG差异均无统计学意义(均P<0.05)。与对照组相比,高剂量组肝组织中的HDLC含量明显降低(P<0.05);低、中、高剂量组肝组织中的TC含量明显升高(均P<0.05),LDLC、TG差异均无统计学意义(均P<0.05);中、高剂量组肝组织中的AKP活性明显升高(均P<0.05),LDH、ALT、ALT/AST比值差异均无统计学意义(均P>0.05)。与对照组相比,高剂量组肝组织中Pparγ、Cbp、Rxrα2的蛋白质表达水平均明显下调(均P<0.05);Sirt1的蛋白质表达则明显上调(均P<0.05)。结论:PFOA暴露可导致SD大鼠肝脂质代谢紊乱以及糖原减少,这可能与PFOA激活Sirt1的表达、抑制Pparγ的表达,从而影响脂肪酸正常代谢及促进糖酵解有关。

芦丁对全氟辛酸造成的小鼠脑氧化损伤及相关蛋白表达的影响

目的探讨芦丁对全氟辛酸(PFOA)造成的小鼠大脑损伤的保护作用。方法 24只SPF级雄性ICR小鼠随机分为对照组(Ctrl)、PFOA组(PFOA 20 mg/kg·d)、芦丁干预组(PFOA 20 mg/kg·d+芦丁20 mg/kg·d),每组8只。连续灌胃暴露14 d后处死小鼠,4%多聚甲醛溶液固定部分脑组织用于病理切片制备。生化检测试剂盒测定总超氧化物歧化酶(T-SOD)和谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)活性、丙二醛(MDA)含量以及总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量。蛋白质印迹技术检测Caspase3蛋白表达水平。结果灌胃14 d后,对照组小鼠大脑组织切片HE染色和尼氏染色结果未见异常,PFOA组与对照组相比,尼氏小体崩解,数量减少(P<0.05),神经元胞体皱缩;而芦丁干预组与PFOA组相比,尼氏小体崩解减少,数量增多(P<0.05),神经元形态较好。PFOA组小鼠大脑组织中T-SOD和GSH-Px活性低于对照组(P<0.05);芦丁干预组小鼠大脑组织中T-SOD活性高于PFOA处理组,MDA含量低于PFOA组(P<0.05)。PFOA组小鼠大脑组织中TG含量高于对照组(P<0.05);芦丁干预组大脑组织中TG含量低于PFOA组(P<0.05),TC含量无明显变化。PFOA组大脑组织中的Caspase3蛋白表达含量较对照组增加;而芦丁干预组大脑组织中的Caspase3蛋白表达含量较PFOA组降低。结论 PFOA暴露可造成小鼠大脑组织损伤产生氧化应激,芦丁干预可减轻PFOA暴露引起的大脑组织损伤。

芦丁对高脂饮食造成的小鼠心肌损伤的保护作用

目的:探讨芦丁对高脂饮食引起的小鼠心肌损伤的保护作用。方法:24只ICR小鼠随机分为如下3组:正常对照组(CTRL组)喂养普通饲料,高脂饮食组(HFD组)喂养高脂饲料,芦丁干预高脂饮食组(RHFD组)喂养高脂饲料+芦丁干预。每周称重1次,观察行为,喂养15周后,收集血液样本,处死小鼠。采集心脏组织,HE染色进行分析心肌组织形态学,观察其病理变化。检测血清丙谷转氨酶(GPT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性以及总胆固醇(TC)和甘油三酯(TG)含量。结果:饲喂15周后,与HFD组比较,CTRL组和RHFD组体重增长缓慢;与CTRL组相比,HFD组GPT、LDH活性和TC、TG含量均显著升高(P<0.05);与HFD组比较,RHFD组的GPT、LDH活性和TC、TG含量降低,尤其是LDH活性和TG含量减少明显(P<0.05)。心肌组织HE染色显示HFD组心肌纤维发生断裂现象,心肌间质增宽,排列紊乱,可见少量心肌细胞变形、坏死,局部产生炎细胞浸润,产生肌浆溶解和空泡样病变,出现炎性浸润水肿。RHFD组可见心肌细胞排列非常整齐,心肌纤维无明显增粗肥大,无明显水肿,较高脂饮食组有明显改善。结论:芦丁对高脂饮食造成的肥胖引起的心肌损伤有良好的保护作用。

全氟辛酸对大鼠肝细胞BRL-3A脂质蓄积的影响

目的探讨全氟辛酸(perfluorooctanoic acid, PFOA)对大鼠肝细胞BRL-3A细胞活力及对转录因子核因子E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2,Nrf2)和精氨酸琥珀酸合酶(arginosuccinate synthase 1,Ass1)表达的影响。方法培养大鼠肝细胞BRL-3A,分为对照组(0μmol/L PFOA)、低剂量组(6.25μmol/L PFOA)、中剂量组(25μmol/L PFOA)和高剂量组(100μmol/L PFOA)。分别于染毒48 h后,用噻唑蓝比色法检测细胞活力,自由基指示剂2′,7′-二氯氢化荧光素乙二酯检测活性氧簇(reactive oxygen species, ROS)含量;试剂盒检测氧化应激相关酶活性;荧光免疫细胞化学、Western blot检测Nrf2、Ass1蛋白表达水平。结果与对照组比较,随着PFOA染毒浓度的增高,中、高剂量组的细胞活力有下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);细胞内的ROS含量升高,中、高剂量组增高显著(P<0.05),平均荧光强度分别为(5417.66±161.09)和(5725.50±166.83)。与对照组相比,低、中剂量组细胞内甘油三酯(triglyceride, TG)、总胆固醇(total cholesterol, TC)和丙二醛(malondialdehyde, MDA)含量无明显变化,高剂量组TG、TC和MDA含量显著升高(P<0.05),分别为(0.21±0.05)mmol/L、(14.5±6.07)mmol/L和(1.23±0.33)nmol/mL。荧光免疫细胞化学检测法、Western blot结果显示,Nrf2蛋白的表达水平在高剂量组显著增高(P<0.05),Ass1蛋白的表达水平在低剂量组显著增高(P<0.05)。结论 PFOA染毒可以导致BRL-3A细胞内ROS的积累,Nrf2和Ass1在PFOA导致的大鼠肝脏细胞氧化损伤刺激下通过增加表达发挥清除ROS和氨解毒作用。