草鱼IFI58基因的鉴定及其表达分析

草鱼IFI58全长cDNA为1764 bp,其中ORF为1440 bp,编码1个479 aa的蛋白。草鱼IFI58包含有10个TPR 34肽结构域,并与哺乳类IFIT相对应。其中,TPR7被中间插入序列分为TPR7A和B,TPR4也有5个氨基酸插入,TPR3只有B部分而缺少A部分。鱼类IFI基因与哺乳类的同源性不高,系统进化树也显示它与哺乳类的同源物分别位于两大不同分支上。草鱼IFI58基因在被检测的心、肝、脾、肾、肌、鳃、脑和肠等8个组织中均有本底表达。Poly I:C诱导后,草鱼IFI58表达水平都有明显的上升,其中,在心和脑组织中,诱导后第4 d达到峰值,其余组织均在第3 d达到最高表达水平。总体来说,草鱼IFI58在心、肝、脾和肾组织中的表达量比肌、鳃、脑和肠要稍高些。

热休克、Poly I:C上调草鱼GRP78基因表达

葡萄糖调节蛋白78(GRP78)是细胞内一种应急蛋白,它通过对细胞内、外胁迫因子产生强烈的应答而调节内质网稳态.草鱼(Ctenopharyngodon idellus)GRP78克隆于草鱼肝肾cDNA文库,全长2490bp.其中,5'非编码区为155bp,含有7个热休克元件,3'非编码区为373bp,最大开放阅读框为1962bp,编码653个氨基酸.序列分析表明,草鱼GRP78的N端包含3个HSP70家族的签名序列,C末端为内质网蛋白滞留信号KDEL,草鱼GRP78与人及其它动物的同源性很高.适应性进化分析也显示GRP78非常保守,受到强烈的功能约束,说明该蛋白质在进化中非常重要.RT-PCR分析表明,相对于本底水平,34℃热激和Poly I:C诱导后,草鱼GRP78在肝、肾等组织中的表达明显上调.

草鱼CCL4基因的克隆及表达

草鱼CCL4基因全长854 bp,最大开放阅读框位于104~397 bp,编码97个氨基酸,其中32~73氨基酸为其保守的CC趋化因子家族结构域,N-端有1个由24个氨基酸组成的信号肽。草鱼CCL4与斑马鱼的同源性为69%,与其他鱼类和哺乳类的同源性在50%以下。系统进化分析也显示其与斑马鱼CCL4基因的亲缘关系最近。CCL4基因在草鱼各组织中都有表达,以脾脏表达量最高,心、肌、鳃、肝中次之,肠和肾中有少量表达,在脑中有痕量表达。经Poly I：C感染后,在肝脏、脾、肠、肾、鳃中,CCL4的表达水平有不同程度的增加,而在心、肌、脑中无明显变化。

草鱼eIF-5A的克隆、组织表达和进化分析

【目的】克隆和鉴定草鱼(Ctenopharyngodonidella)的eIF-5A基因,并分析其组织表达和适应性进化。【方法】在克隆草鱼eIF-5A全长cDNA的基础上,利用ORF finder、SMART等在线软件对草鱼eIF-5A的分子特征进行分析,并利用PAML 3.15软件包中的密码子替换模型检测eIF-5A的分子适应性进化;RT-PCR分析eIF-5A在草鱼心、脑、肌肉、鳃、脾、肝、肠、肾等组织中的本底表达和Poly I:C诱导表达。【结果】草鱼eIF-5A全长cDNA为2 249 bp,其中包含5′非编码区41 bp,3′非编码区1 743 bp;最大开放阅读框为465 bp,编码1个由155个氨基酸残基组成的蛋白质;草鱼eIF-5A分子质量为16.856 ku,等电点pI为5.18,N端含有eIF-5A家族共有的羧腐胺赖氨酸,C端包含一段富含亮氨酸的结构域。草鱼eIF-5A与人及其他动物具有较高的同源性,只有少数氨基酸残基发生替换;适应性进化分析也表明,eIF-5A不但具有结构的保守性,还具有功能的保守性;eIF-5A在草鱼心、脑、肌肉、鳃、脾、肝、肠、肾等组织中恒量表达,并且其表达不因Poly I:C的诱导而发生变化。【结论】eIF-5A是一类与细胞分裂和分化密切相关的蛋白质,在生物体中具有多种剪切体,提示eIF-5A对维持细胞生存非常重要;鉴定的草鱼eIF-5A为eIF-5A1,而非eIF-5A2。

草鱼Annexin A4基因克隆、表达特性及进化

草鱼(Ctenopharyngodon idellus)Annexin A4基因克隆于肝肾cDNA文库,该cDNA全长为1307bp,其中,5′非编码区为104bp,3′非编码区为237bp,开放阅读框为966bp,编码321个氨基酸。草鱼Annexin A4编码的蛋白质N端由15个氨基酸残基组成,C端具有4个重复序列,每个重复序列都有一个Ⅱ型钙结合位点,在第4个钙结合位点中包含一个"KGD"序列。Annexin A4在草鱼肝、肾、脾、心、鳃、肠中的表达量均较高,而肌肉和脑中不表达;PolyⅠ:C诱导后,其表达均有所下调。系统发育树显示,草鱼Annexin A4与斑马鱼(Danio rerio)的进化距离最近。适应性进化分析没有检测到正选择位点,表明Annexin A4非常保守,受到强烈的功能约束。

益肝饮治疗慢性乙型病毒性肝炎肝纤维化临床观察

目的:观察中药益肝饮治疗慢性乙型病毒性肝炎(CHB)肝纤维化的临床效果。方法:将110例患者随机分为治疗组66例、对照组44例。治疗组用益肝饮治疗,对照组用安络化纤丸治疗。观察治疗前后两组临床症状、体征、肝功能(ALT、AST、TBiL、ALB、PT)、血清肝纤维化指标(HA、PⅢP、LN、C-Ⅳ)等变化。结果:两组治疗后临床症状、体征、肝功能及血清肝纤维化指标均有不同程度改善,治疗组与对照组比较有显著差异(P<0.01,P<0.05)。结论:益肝饮对CHB及其肝纤维化有较好的临床疗效。

重组干扰素上调草鱼干扰素系统基因的表达

干扰素（Interferon，IFN）是机体细胞经病毒诱导而产生的一种重要的细胞因子，具有抗病毒、抗肿瘤和免疫调节等功能。干扰素系统是先天性免疫系统抵抗病毒感染的主要构成者，包括分泌合成干扰素的细胞系统以及接受干扰素作用的细胞系统，

Poly d(GC)在负超螺旋下形成的Z-DNA

为建立一个生理状态下的左旋DNA(Z-DNA)模型,本文以pMD18-T质粒为母本质粒,将含有d(GC)_6、d(GC)_8、d(GC)_(10)、d(GC)_(13)等poly d(GC)片段的特殊序列插入到pMD18-T质粒中,构建了poly d(GC)重组质粒。这些poly d(GC)重组质粒处于负超螺旋状态。甲基化抑制实验证实,这些插入到质粒中的poly d(GC)能够形成潜在的Z-DNA构象。同时,为进一步验证poly d(GC)重复的长度与形成Z-DNA效率的关系,原核表达并亲和层析纯化了鲫鱼PKZZα多肽(P★)。凝胶阻滞实验分析了d(GC)_6、d(GC)_8、d(GC)_(10)、d(GC)_(13)4种重组质粒与P_(Zα)的亲和性。结果显示,P_(Zα)对这4种重组质粒的迁移都能产生阻滞效应,并且随着GC的增多,阻滞效应越明显。说明d(GC)越多,poly d(GC)形成Z-DNA的能力越强。

小肠系膜包裹症(附三例报告)

小肠系膜茧状包裹症是一罕见病，为部分或全部小肠，甚至部分结肠被禁锢在异常纤维包膜内，本文3例结合文献复习综合报道如下。

对路桥工程中软土地基施工技术的探讨

目前我国广泛的分布的软土,其中一些地区一般又是经济发达的地区,对路桥需要急迫。在路桥工程施工中,让其根据软土地基的产生原因和地基的厚度及其所处的地理位置,可采用表层施工处理、粉喷桩加固、竖向排水等几种方法进行软土地基施工处理。

东昆仑肯德可克及外围钴多金属矿找矿突破的启示

作者根据肯德可克钴多金属矿的地质特征,认为该矿由火山喷流(改造)作用形成。基于这种成矿理论,对肯德可克外围矿点、异常检查发现多处钴矿化线索,结合以上提出东昆仑成矿带钴矿勘查的肤浅认识。

分形理论在地学中的应用

本文介绍了分形理论及地质变量分形关系,阐述了各种地质现象和过程的分形特征,指出其在地学领域中应用前景。

门源县松树南沟金矿地质特征及成矿初探

松树南淘金矿受火山构造洼地制约,成矿作用与火山岩有关。通过矿床特征、岩石化学、同位素等分析研究表明,该矿床成因与火山活动关系极其密切,依据矿床成矿特征建立了成矿模式,为该区寻找类似矿床具有一定的指导意义。

浅谈经方对中医临床的指导意义

张仲景在《伤寒杂病论》中创立了300余首君臣佐使配伍严谨、疗效确凿的方剂,并在因证立法、辨证加减等方面具有重要的临床指导意义,被尊为“诸方之祖”。经方适应病证多,应用领域广,是后世很多医方的组方基础,有效地指导着医疗实践,具有很强的生命力和发展前景。

分期静脉动脉化治疗下肢动脉闭塞症

下肢动脉闭塞症,是一种严重的下肢缺血性疾病,致残率高,甚至可造成死亡。虽然治疗方法很多,但尚无有效的方法。我院于1986年底开始实验研究,到目前为止,我们为7例9个下肢的患者施行了分期静脉动脉化手术,收到良好效果,现报告如下:

矿产资源资产及其评估方法

本文从矿产资源资产概念、分类入手，阐述矿产资源资产评估的方法及各种方法应用范围，并通过案例说明资产评估方法计算。

动纤毛轴丝的分子组装

纤毛/鞭毛是从细胞膜表面突出的真核细胞器,它能调节细胞运动及细胞周围液体流动,或者参与机体的感知功能,其异常会引发多种人类纤毛病。作为最早被发现的细胞器之一,纤毛一直是细胞生物学领域的重点研究对象,但是因结构大且复杂,其分子组装机制的揭示长期以来一直是个难题。近些年,随着冷冻电镜技术的发展,多个课题组先后报道了从衣藻到哺乳动物精子鞭毛的轴丝各部分高分辨率结构。该文综述了动纤毛的结构组成和最新的分子组装研究进展,重点描述了轴丝各个组成部分包括双联微管(DMT)、内外动力臂(IDA和ODA)、辐条结构(RS)、中央微管对(CP)和连接复合物(N-DRC)的蛋白组成和分布,为深入理解纤毛的组装过程和功能调节提供了科学依据。

草鱼胶原凝集素基因的克隆及其功能分析

从草鱼Ctenopharyngodon idella肝肾cDNA文库中克隆得到胶原凝集素基因。草鱼胶原凝集素全长cDNA为1128bp,其中5′非编码区229bp,3′非翻译区104bp,最大开放阅读框为795bp,编码264个氨基酸。系统进化分析表明草鱼胶原凝集素与斑马鱼的亲缘关系最近。根据草鱼胶原凝集素序列特征,克隆了包含糖基识别域(CRD)的cDNA,并进行原核表达、纯化获得其重组蛋白PCRD。进行PCRD与6种细菌的凝集和糖抑制实验,结果表明半乳糖、葡萄糖、甘露糖和麦芽糖4种糖都会使PCRD与嗜水气单胞菌的凝集明显下降甚至极大地干扰凝集;麦芽糖使金黄色葡萄球菌的凝集明显下降,而肽聚糖和甘露糖会使凝集受到抑制;此外,PCRD的凝集反应不依赖Ca2+。