15个STR基因座的种属特异性研究

目的研究15个STR基因座对常见9种动物的种属特异性,探讨其在法医学中的应用价值。方法对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增,ABI310遗传分析仪进行DNA分型,测定15个STR基因座的种属特异性。结果用15对STR基因座引物分别对9种常见动物肌肉组织的DNA进行PCR扩增检测CSF1PO,D8S1179,D19S433基因座时,9种动物均有PCR扩增产物;检测D21S11,D7S820,D13S317,D16S539,TPOX,D18S51,D5S818,FGA,D3S1358基因座时,部分动物有PCR扩增产物,其中TPOX,D21S11基因座扩增产物片段长度明显与人的不同。这9种动物在D2S1338、vWA、TH01基因座均没有扩增产物。结论在15个STR基因座中,3个基因座只对人DNA有扩增产物,有较好的种属特异性;9个基因座对人和部分动物均有扩增产物,但产物的片段大小与人不同,在进行个人识别时,可以用其分析DNA的种属来源;3个基因座对人和动物均有扩增产物,且片段长度相近,在进行个人识别时,应先作DNA种属来源检查。

DYS542在山西汉族人群中的多态性分布

目的对DYS542基因座的基因多态性和法医学应用进行研究。方法随机抽取102例山西汉族男性无关个体静脉血,进行聚合酶链反应(PCR)扩增,银染显色。对其筛选的等位基因测序,构建等位基因分型标准物;按照国际法医遗传学会DNA委员会(ISFG)原则命名各等位基因。结果山西地区汉族男性DYS542基因座观察到14,15,16,17,18共5个等位基因,基因频率分别为0.1068,0.4078,0.3495,0.1262,0.0097。该基因座核心重复单位是ATAG。结论Y染色体基因座DYS542具有较高的遗传多态性,在法医学及人类遗传学方面具有较高应用价值。

山西汉族Y-STR基因座DYS552遗传多态性调查

目的：调查Y染色体上的短串联重复序列DYS552基因座在山西汉族男性人群中的基因频率分布、多态性及群体分布情况，为法医学个体识别及亲子鉴定提供计算数据，对其在法医学上的应用进行可行性探讨。方法：随机抽取102例山西汉族男性无关个体静脉血500uL，用GDB中的引物进行PCR扩增，银染显色，对其选取的等位基因测序，构建等位基因分型标准物；按照ISFG原则命名各等位基因。结果：102例山西汉族人群DYS552基因座共检出7种不同的等位基因，分别为DYS552×23（0．0194）、DYS552×24（0．1105）、DYS552×25（0．3981）、DYS552×26（0．2427）、DYS552×27（0．1262）、DYS552×28（0．0874）、DYS552×29（0．0097），基因多样性为0．7523，其个人识别能力（DP）和非父排出率（PE）均为0．7523。结论：DYS552基因座具有较高的遗传多态性，在法医学及人类遗传学方面具有较高应用价值。

人CYP2D6诱导小鼠自身免疫性肝炎动物模型的建立

目的研究模拟抗原人细胞色素P450家族2亚家族D成员6(CYP2D6)和遗传背景差异的小鼠(C57BL/6和BALB/c)对自身免疫性肝炎(AIH)动物模型建立的影响。方法 C57BL/6和BALB/c小鼠尾静脉注射腺病毒及质粒p CYP2D6,用ELISA检测血清抗CYP2D6抗体和抗肝蛋白自身抗体水平; HE染色检测肝脏AIH炎症程度,天狼猩红染色检测肝纤维化的程度;微孔板法检测血清丙氨酸转氨酶(ALT)的水平。结果腺病毒促进人CYP2D6诱导C57BL/6小鼠产生抗肝蛋白自身抗体、并引起AIH和肝纤维化,而在BALB/c小鼠中,仅产生针对人CYP2D6的抗体,而无抗肝蛋白自身抗体、不产生AIH和肝纤维化。结论在腺病毒存在下,模拟抗原人CYP2D6在肝脏中的持续表达可以诱导C57BL/6小鼠产生AIH,但是无法诱导BALB/c小鼠产生AIH,不同品系小鼠的遗传背景可能影响着AIH的发生发展。

三种DNA提取法在接触性检材中的应用比较

目的:比较Chelex-100法、磁珠法、硅珠法三种DNA提取法在不同类型接触性检材中的检出量和检验效果。方法:从日常案例中收集不同类型的接触性检材各10例,同时用Chelex-100法、磁珠法、硅珠法提取DNA。结果:通过Chelex-100法、硅珠法提高模板DNA含量,磁珠法提高DNA纯度,减少DNA模板的浪费和抑制物的污染,从而使模板DNA浓度富集到检验标准。常量且污染轻、杂质少的常规检材三种提取方法DNA量无明显差异;污染严重、含抑制剂的微量检材磁珠法DNA提取量最高;污染不严重的微量检材硅珠法DNA提取量最高。结论:Chelex-100法适于常量且污染轻、杂质少的常规检材,磁珠法适于污染严重、含抑制剂的微量检材,硅珠法适于污染不严重的微量检材。根据不同类型的检材选取不同的提取方法,可有效提高微量检材提取的成功率,得到低抑制高纯度的DNA模板,使法医DNA检验技术更好地为案件侦破提供直接证据。

山西汉族群体DYS715 DYS722基因座的遗传多态性研究

目的:对DYS715、DYS722基因座的基因多态性进行研究,为本地区基因多态性数据库提供实验依据。方法:随机抽取1 000例山西汉族男性无关个体静脉血,进行聚合酶链反应(PCR)扩增,银染显色。结果:山西地区汉族男性DYS715基因座观察到7,8,9,10,11共5个等位基因,该基因座核心重复单位是TAGA。DYS722基因座观察到11,12,13,14,15共5个等位基因,该基因座核心重复单位是ATAG。结论:DYS715、DYS722基因座扩增产物片段小、易于操作,具有丰富的遗传多态性。

Identifiler^(TM)和GlobalFiler^(TM)试剂盒的比较研究

目的比较Identifiler^(TM)和Global Filer^(TM)试剂盒的各项性能指标。方法从灵敏度、耐受性、一致性、种属特异性、遗传多态性共五个方面对Identifiler^(TM)和Global Filer^(TM)试剂盒进行检测。结果 Global Filer T^(TM)试剂盒在灵敏性、耐受性、遗传多态性方面优于Identifiler^(TM)试剂盒,在一致性、种属特异性方面性能没有明显差异。结论 Global Filer^(TM)试剂盒在陈旧、污染、基因变异的检材进行个体识别、亲缘鉴定中有更为广泛的应用价值。

机械性暴力致颅脑损伤的法医学分析

目的：研究机械性暴力致颅脑损伤的类型、特点及其法医学鉴定。方法：对山西省长治市公安司法鉴定中心2006年以来150例颅脑损伤案例的有关资料进行回顾性分析，从性别、年龄、损伤原因、损伤类型等方面进行归类、统计。结果：男性伤者居多，其中以21-40岁年龄段所占比例居首，特点是多发伤高于任何单一部位损伤，其中以多发头皮损伤及颅骨损伤居多。结论：机械暴力致颅脑损伤常表现为多发性和复合性，形式复杂，类型多样，损伤严重，导致的病死率高，其并发症的诊断应掌握诊断标准，并注意与相关疾病鉴别。

四氢大麻酚对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎的保护作用

为研究大麻素成分[四氢大麻酚(tetrahydrocannabinol, THC)]对C57BL/6小鼠自身免疫性肝炎(autoimmune hepatitis, AIH)的影响,尾静脉注射质粒pCYP2D6和pcDNA3.1,腹腔重复注射四氯化碳(carbon tetrachloride, CCl4)和THC,ELISA检测自身免疫应答程度,微板法检测血清中谷丙转氨酶(alanine aminotransferase, ALT)活性,HE染色检测肝脏炎症反应程度,天狼猩红染色检测肝脏纤维化程度。结果显示,THC对由CCl4/CYP2D6引起的AIH造成的肝损伤有显著改善,而且对自身免疫应答有显著抑制作用,自身抗体和抗CYP2D6抗体水平显著降低,对于单独由CYP2D6引起的抗CYP2D6抗体能够完全抑制。THC对AIH和肝纤维化也有显著的抑制作用,且THC的抑制作用与其浓度有关。由此THC对由CCl4/CYP2D6引起的C57BL/6小鼠的AIH有显著抑制作用,并且呈剂量依赖性。由此大麻素类药物THC对AIH可能有保护作用。

AGCU-Y24-STR和Yfiler^(TM)-STR试剂盒的比较研究

比较AGCU-Y24-STR和Yfiler^(TM)-STR试剂盒的法医学应用价值。采用这两种试剂盒分别进行平行扩增,研究在遗传多态性、各种检材、亲子鉴定中的应用。AGCU-Y24-STR试剂盒基因座可单次检测24个Y-STR基因座,可大幅度提高多态性信息含量,其单倍型多样性和非父排除能力高于Yfiler^(TM)-STR试剂盒。两种试剂盒在各种检材检验中17个共有-Y-STR分型结果一致,AGCUY24-STR新增的7个基因座GD均大于0.5,适于山西汉族人群,在亲子鉴定中尤其是基因突变的样本检验有更高的应用价值。AGCU-Y24-STR大幅提高了多态性信息含量和个体识别能力,选择了在中国人群中突变率低的基因座,更适于男性家系调查及Y-STR数据库建设。

山西汉族人群17个Y-STR基因座遗传多态性研究

通过调查山西汉族人群17个Y-STR基因座遗传多态性分布情况,探讨其群体遗传学及法医学应用价值。采用AGCU-Y24-STR荧光复合直接扩增试剂盒和ABI 3130XL基因测序仪,检测山西汉族1500份无关男性个体血样,计算17个Y-STR基因座的等位基因频率及基因多样性值。在1500名无关男性个体样本中,17个Y-STR基因座等位基因频率分布在0.0067~0.6266之间,基因多样性值在0.3748~08777之间。通过实验得出17个Y-STR检测系统在山西汉族人群中具有丰富的遗传多态性的结论,在法医学应用中具有广泛的应用价值。