内皮损伤与勃起功能障碍研究进展

内皮在维护血管稳态、调节血管紧张度及血流、预防血管内血栓形成等方面起重要作用。血管内皮是阴茎勃起过程中的重要角色,ED多数情况下存在不同程度的内皮功能障碍,内皮损伤是ED的重要病理基础。不良生活方式、心血管疾病、氧自由基、炎症因子等均可导致内皮损伤。血管内皮具有自我修复机制,内皮损伤是损伤因素与修复因素失衡的结果。本文就内皮损伤机制、内皮损伤后的修复、内皮损伤与ED关系等方面的进展作一综述。

ERβ对小鼠阴茎海绵体血管内皮保护作用的实验研究

目的:初步探讨雌激素受体β(ERβ)对小鼠阴茎血管内皮的保护作用。方法:随机选取ERβ基因敲除(ERβKO)雄性小鼠和相应野生型雄性小鼠各12只,随机分为4组:正常对照组、ERβKO组、野生型+TNFα处理组和ERβKO+TNFα处理组。ERβKO组及正常对照组腹腔注射生理盐水,野生型+TNFα处理组和ERβKO+TNFα处理组给予TNFα6μg/(kg.d)腹腔注射,连续14 d。观察阿朴吗啡诱导的自发勃起反应;制备阴茎组织切片,内皮细胞标志物CD34、vWF免疫组化染色观察海绵窦内皮细胞变化,TUNEL法检测海绵体组织细胞凋亡情况。结果:与正常对照组相比,ERβKO组勃起潜伏期延长(P<0.05),但勃起次数无显著差异;ERβKO+TNFα组与野生型+TNFα组潜伏期显著延长(P<0.05),勃起次数显著减少(P<0.05),以ERβKO+TNFα组变化更显著。免疫组化结果显示,与正常对照组(CD34:3.00±0.00,vWF:2.75±0.50)比较,海绵体组织CD34、vWF蛋白表达在ERβKO组(CD34:2.25±0.50,vWF:2.00±0.00)、ERβKO+TNFα组(CD34:0.25±0.50,vWF:0.33±0.58)、野生型+TNFα组(CD34:1.50±0.58,vWF:1.25±0.50)均显著减少(P<0.05),且ERβKO+TNFα组比野生型+TNFα组减少更显著(P<0.05)。仅在ERβKO+TNFα组海绵体发现凋亡细胞。结论:ERβ基因敲除后,尤其在内皮损伤因素TNFα作用下,小鼠阴茎血管内皮细胞减少,提示ERβ对阴茎海绵窦内皮具有保护效应。

L-肉碱对糖尿病大鼠生精细胞凋亡及附睾精子数量和活动率的影响

目的:探讨L-肉碱(LC)对糖尿病(DM)大鼠生精细胞凋亡及附睾精子数量和活动率的影响。方法:24只雄性SD大鼠随机均分为3组,一组作为对照组,剩余两组分别注射链脲佐菌素(STZ,65 mg/kg)建立DM模型。建模成功后,各组大鼠分别给予如下灌胃剂量:对照组:生理盐水;DM模型组:生理盐水;LC组:300 mg/kgLC溶液,连续灌胃6周。末次给药24 h后,麻醉处死所有大鼠,分别进行附睾精子计数并检测精子活动率,流式细胞术检测各组大鼠睾丸生精细胞凋亡情况。结果:用LC治疗后的大鼠附睾头、尾精子活动率(%)分别为53.7±1.8和60.3±1.6,显著高于DM模型大鼠(分别为32.2±2.0和40.5±1.4,P<0.05),但低于对照组大鼠精子活动率63.1±2.4和68.9±1.3。与对照组附睾尾精子相对计数[(37.8±1.1)×106/100 mg]相比,DM组显著减少[(25.5±1.1)×106/100 mg],且具有统计学差异(P<0.05);LC治疗后大鼠附睾尾精子相对计数[(32.0±1.5)×106/100 mg]比DM组显著增加(P<0.05),但仍低于对照组。与对照组生精细胞凋亡率[(3.7±1.3)%]相比,DM组生精细胞凋亡率[(52.5±4.4)%]显著上升(P<0.05);经LC治疗后,LC组大鼠生精细胞凋亡率为(35.3±3.5)%,比DM组显著降低(P<0.05),但仍显著高于对照组。结论:LC(300 mg/kg)灌胃DM大鼠6周,可以减少DM大鼠生精细胞凋亡,增加附睾精子数量,提高精子活动率。

配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染状况研究

目的:人类乳头瘤病毒(HPV)是女性发生宫颈癌的必要病因,也与男性阴茎癌、口咽癌、肛门癌等密切相关,但是目前对男性HPV的研究较少。本文研究配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染状况,为临床制定HPV相关性疾病的防治措施提供科学依据。方法:收集2016年8~12月因配偶宫颈HPV感染阳性,南京医科大学附属妇产医院泌尿男科门诊就诊男性的相关资料。尼龙棉签拭子在阴茎头、冠状沟、包皮内板、阴茎体等处取样,运用凯普生物HPV分型检测试剂盒,采用PCR和膜杂交的方法,检测不同型别HPV感染情况。结果:去除不合格病例,共纳入139例患者信息。139例配偶宫颈HPV感染男性外生殖器HPV感染率为83.5%。HPV感染类型以6,16,39,18,58,52型为主,分别占43.2%(60/139)、19.4%(27/139)、10.1%(14/139)、9.4%(13/139)、9.4%(13/139)、9.4%(13/139)。在配偶宫颈HPV感染阳性的男性中,包皮过长比率高达75.5%,但包皮正常和包皮过长男性HPV感染率没有显著差异(P>0.05)。结论:配偶宫颈HPV感染阳性的男性是HPV感染的高危人群,有必要对此类人群进行筛查和治疗,以降低男女双方的HPV感染。

腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术与腹式全子宫切除治疗子宫良性病变的效果及对盆底功能的影响比较

目的比较腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术与腹式全子宫切除治疗子宫良性病变的效果及对盆底功能的影响。方法选择2016年3月~2017年3月南京市妇幼保健院妇科收治的130例子宫良性病变患者,依据随机数字表法将其随机分为两组,每组65例。对照组患者采取腹式全子宫切除术,观察组患者采取腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术进行治疗。对两组患者手术情况、性生活质量、应激指标及盆底功能障碍发生率进行比较分析。结果观察组术中出血量较对照组明显减少(P<0.05);手术时间、排气时间及下床活动时间均较对照组明显缩短(P<0.05)。治疗后观察组女性性功能指数量表总分较对照组明显提高(P<0.05),焦虑自评量表评分较治疗前和对照组明显降低(P<0.05)。治疗后观察组白细胞计数和血清皮质醇、白介素-6、C反应蛋白水平均较对照组明显降低(P<0.05)。两组盆底功能障碍发生率比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论腹腔镜辅助下阴式全子宫切除术可明显减少子宫良性病变患者的术中出血量,缩短手术时间及下床活动时间,缓解焦虑情绪、应激反应。

精子DNA甲基化异常与早期自然流产的关系研究

目的:探索精子DNA甲基化水平异常与早期自然流产的关系。方法:随机选取98例符合纳入标准的配偶不明原因流产或胚停育男性为研究对象,另选取健康孕前体检男性46例作对照。行精液常规、精子形态分析,以改良精子染色质扩散法检测精子DNA碎片化指数。精子DNA甲基化水平检测采用甲基化定量试剂盒,运用比色法检测。结果:与对照组相比,早期不明原因流产组大晕环精子百分率[(45.50±26.27)%vs(36.49±23.06)%]显著降低(P=0.038),精子头部异常比例[(77.08±12.21)%vs(81.09±10.89)%]显著增高(P=0.049),精子DNA甲基化水平[(0.47±0.33)vs(0.36±0.26)ng/μl]显著降低(P=0.035);并且精子DNA甲基化水平与大晕环精子百分率呈正相关(r=0.546,P<0.01)。多因素回归分析显示,精子头部异常是早期自然流产/胚停育的独立危险因素(OR=1.032,P=0.049),而精子高甲基化水平是早期自然流产/胚停育的保护因素(OR=0.244,P=0.03)。结论:精子DNA甲基化水平异常可能是不明原因早期自然流产或胚停育的原因之一。

流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜完整性的研究

目的:应用荧光染料SYBR-14/PI双色标记法进行流式细胞术检测精索静脉曲张患者精子质膜的完整性并探讨其临床意义。方法:随机收集120例男性精液标本,其中90例左侧精索静脉曲张患者分为3组:VC1组(精索静脉曲张Ⅰ度,n=30)、VC2组(精索静脉曲张Ⅱ度,n=30)和VC3组(精索静脉曲张Ⅲ度,n=30),正常生育男性为正常对照组(n=30)。通过计算机辅助精液分析系统进行精液常规分析。精液标本经PBS洗涤处理后用荧光染料SYBR-14/碘化丙锭(PI)双染后上流式细胞仪分析,用发绿色荧光精子百分率(SYBR-14+/PI-%)表示质膜完整精子(PMI)的比例,检测精子质膜完整性,并预见精子的受精能力。结果:精索静脉曲张各组患者与正常对照组之间SYBR-14+/PI-%、SYBR-14-/PI+%均存在统计学差异(P<0.01)。精索静脉曲张患者(VC1、VC2、VC3)代表精子质膜完整性指标(SYBR-14+/PI-%)的百分率分别是:[(54.85±3.78)%]、[(45.37±4.12)%]、[(35.14±4.91)%],均显著低于正常对照组[(70.79±6.71)%],其活力顺序为VC3<VC2<VC1<对照组;120例精液标本的相关性分析表明:SYBR-14+/PI-%与精子活动率呈显著正相关(r=0.965,P<0.01),与(a+b)级精子百分率呈显著正相关(r=0.874,P<0.01),与d级精子百分率呈显著负相关(r=-0.965,P<0.01),而与pH、精液量和液化时间无显著性差异(P>0.05)。结论:应用流式细胞术SYBR-14/PI双染法能快速、准确地检测精子质膜完整性,精索静脉曲张引起精子质膜完整性下降,可能是导致男性不育的重要原因之一。

人工流产女性术前焦虑抑郁情绪调查及相关因素分析

目的:了解人工流产女性术前焦虑、抑郁状况及影响因素,为更好地开展心理干预提供参考依据。方法:选取2018年12月-2019年5月在本院计划生育门诊行人工流产术的早孕女性1108例,其中未婚组560人,已婚组548人。在术前采用健康问卷抑郁症状群量表(PHQ-9)和广泛性焦虑量表(GAD-7)问卷调查,对引起抑郁及焦虑的各因素进行分析。结果:抑郁总检出率为55.0%,未婚组检出率64.3%,已婚组检出率45.4%;焦虑总检出率为34.5%,未婚组检出率41.4%,已婚组检出率27.4%;两组抑郁、焦虑检出率有统计学差异(P<0.05)。多元logistic回归分析显示,流产对象年龄(<25岁)、户籍(外地)是抑郁、焦虑发生的危险因素。结论:人工流产女性焦虑、抑郁发生率较高,特别是未婚、年轻和外地户籍妇女;医务人员有必要给予心理干预,更好地保护人工流产妇女的身心健康。

精子的表观遗传学与胚胎发育关系的研究进展

表观遗传学是研究DNA序列未发生变化但表型发生可遗传改变的一门学科。精子在其发生和受精过程中表观遗传信息都发生了较大变化,而这些改变将直接影响受精后的胚胎发育,因此研究精子的表观遗传学与胚胎发育有重要的意义。本文从精子的DNA甲基化、组蛋白修饰、非编码RNA调控和基因印记4个方面对精子的表观遗传学改变及其对胚胎发育的影响作简要探讨。

pAdxsi-ERβ腺病毒转染对ERβKO小鼠阴茎海绵体血管内皮的影响

目的:探讨ERβ基因过表达对ERβKO小鼠阴茎血管内皮的影响及相关分子机制。方法:选取ERβKO雄性小鼠12只,随机分为两组:ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组和ERβKO+TNFα+空病毒组。ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组给予ERβ基因重组腺病毒转染处理14 d,ERβKO+TNFα+空病毒组转染空病毒作对照,同时两组均给予TNFα6μg/(kg·d)腹腔注射,连续14 d。采用APO法观察小鼠的阴茎勃起功能;免疫组化检测内皮标志物CD34、vWF的变化情况;RT-PCR、Western印迹和免疫组化检测eNOS-NO通路相关分子表达情况。结果:与ERβKO+TNFα+空病毒组相比,ERβKO+TNFα+pAdxsi-ERβ组小鼠的变化情况如下:①勃起次数增多(2.17±0.41 vs 0.50±0.55,P<0.05),勃起潜伏期缩短[(24.0±1.27)min vs(28.83±1.33)min,P<0.05];②内皮标志物CD34、vWF表达更丰富[(1.50±0.55;1.33±0.52)vs(0.67±0.52;0.50±0.55),P<0.05];③eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P均<0.05),RT-PCR与Western印迹结果相符合。结论:ERβ基因对阴茎血管内皮具有保护作用,eNOS-NO通路是其发挥作用的机制之一。

女性性功能障碍药物治疗研究进展

女性性功能障碍(female sexual dysfunction,FSD)是一种越来越受到重视的女性健康问题。随着社会进步和性医学的不断发展,FSD的治疗水平也不断提高。FSD的药物治疗分为激素类药物(如雌激素、鼻内睾酮、鼻内催产素等)和非激素类药物(如氟班色林、奥培米芬、布雷默浪丹)。虽然一些药物已被FDA批准或正在进行临床试验,但医生和患者都需要客观了解目前治疗方法的局限性。本文旨在对当前FSD药物治疗方法进行综述。同时,由于FSD病因的多维性和复杂性,强调女性性功能障碍的治疗应遵循综合性的治疗原则,以改善女性性功能障碍。

润滑障碍中的lncRNA-mRNA共表达网络的构建及功能预测

目的:通过构建阴道润滑障碍(lubrication disorder,LD)女性阴道上皮组织差异表达lncRNA-mRNA共表达网络,探索LD患者的潜在发病机制。方法:利用以|Log_(2)FC|≥2且校正后P值<0.05,鉴别LD和正常对照组之间的长链非编码RNA(long non-coding RNA,LncRNA)以及mRNA的表达谱,利用Cytoscape软件构建差异表达lncRNA及差异表达mRNA网络,采用Gene Ontology(GO)和KEGG Pathway分析共表达网络中mRNA的生物学功能。结果:通过下一代测序技术,根据|Log_(2)FC|≥2且校正后P值<0.05标准筛选出LD组和正常对照组中共计499条上调表达的lncRNA、337条下调表达的lncRNA,以及1582条上调表达mRNA、633条下调表达的mRNA。随后,通过其中100个lncRNA与311个mRNA构建了基于差异表达的lncRNA和mRNA的共表达网络。最后,共表达网络的功能富集分析表明mRNA主要与心肌相关的疾病和功能有关。结论:LD的发病机制可能与血液循环功能障碍、局部肌肉功能障碍以及cGMP通路等有关,需要相关研究来进一步证实。

润滑障碍女性阴道组织的差异表达miRNA表达谱分析

目的:阴道润滑障碍(LD)是女性性功能障碍(FSD)中最常见的一种,显著影响女性的生理健康与受孕。探明LD的发病机制,寻找治疗靶标,对于预防和治疗LD十分必要。方法:选取南京市妇幼保健院收治的符合筛选标准的健康对照组和LD组女性各3例,提取阴道上皮组织RNA进行高通量miRNA测序,筛选差异miRNA并进行聚类分析、靶基因预测、基因本体(GO)和京都基因与基因组百科全书通路(KEGG pathway)显著性富集分析。最后,通过实时荧光定量PCR对测序结果进行了验证。结果:本次高通量测序共测到1673个miRNA。并筛选到64个有望成为LD治疗靶标的miRNA,其中25个miRNA在LD患者较对照组上调4倍以上;39个miRNA在LD患者较对照组下调4倍以上。神经元投射形态发生和AMPK信号通路是最显著富集的GO词条(term)和KEGG pathway。结论:miRNA在LD患者中存在差异性表达,这些miRNA及靶基因可能与LD的发生有关,有望成为LD治疗靶标的miRNA,具有重要理论意义以及潜在应用价值。

阴道微环境相关因素对水通道蛋白2mRNA在阴道上皮细胞中表达的影响

目的明确阴道微环境对水通道蛋白2(AQP2)mRNA在阴道上皮细胞中表达的影响。方法选取2014年5月购自美国菌种保藏中心(ATCC)的VK2/E6E7细胞作为研究对象。体外培养VK2/E6E7细胞,分别予以不同浓度的雌二醇、睾酮、孕酮、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)及不同pH的培养基干预细胞,观察并收集干预24h及48h后的细胞,采用Real Time PCR技术,明确AQP2mRNA的表达水平。结果高浓度雌二醇可增加AQP2mRNA表达水平;较低浓度孕酮增加AQP2mRNA表达水平,高浓度孕酮降低AQP2mRNA表达水平;睾酮、炎症因子(IL-6、IL-8)及pH均对AQP2mRNA表达水平无显著影响规律,但不同pH会影响阴道上皮细胞的生存状态,进而影响阴道润滑。结论阴道微环境会影响AQP2mRNA在阴道上皮细胞中的表达,雌激素缺乏可能是女性阴道润滑障碍的致病因素。

ERβ基因敲除对小鼠阴茎海绵体eNOS-NO通路基因表达的影响

目的:探讨雌激素受体β(ERβ)基因敲除对小鼠阴茎海绵体eNOS-NO通路基因表达的影响。方法:选取ERβ基因敲除(ERβKO)雄性小鼠和相应野生型雄性小鼠各12只,随机分为4组:正常对照组(A组)、ERβKO组(B组)、野生型+肿瘤坏死因子-α(TNF-α)处理组(C组)和ERβKO+TNF-α处理组(D组)。C组和D组每日给予TNF-α6μg/kg腹腔注射,A组及B组则以等量生理盐水替代,连续14 d。采用RT-PCR技术检测小鼠阴茎组织通路相关分子:eNOS、小窝蛋白-1(caveolin-1)、钙调蛋白(Cam)mRNA表达情况;Western blotting检测小鼠阴茎组织eNOS-NO通路相关分子蛋白表达水平的变化情况。结果:RT-PCR结果与Western blotting结果相符:与A组相比,B组eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P<0.05);TNF-α给药后,与C组比较,D组的eNOS、Cam表达减少,小窝蛋白-1表达上调(P<0.05)。结论:ERβ基因敲除后,尤其在内皮损伤因素TNF-α作用下,eNOS-NO通路表达下调,提示ERβ对阴茎海绵窦内皮具有保护效应。

一项有关中国女性子宫动静脉畸形(AVM)危险因素的回顾性研究

目的研究中国女性子宫动静脉畸形(AVM)的相关危险因素,为临床诊断、处理子宫AVM提供依据。方法对本院治疗子宫AVM的28例患者进行分析,分析术后出血天数、流产次数及手术方式等因素与AVM的关系。结果年龄、手术方式、术后出血天数、手术医院、流产次数以及孕周与AVM在统计学上均显著相关。术后出血天数、流产次数及手术方式是AVM的独立危险因素。结论AVM的发生与术后出血天数、流产次数及手术方式等因素有关,可以通过分析相关风险因素,判断AVM发生的可能性,为临床诊断、处理子宫AVM提供理论与数据指导。

腹腔镜联合电动子宫肌瘤钻对子宫肌瘤患者疗效及术后妊娠的影响

目的探讨对子宫肌瘤患者实施腹腔镜联合电动子宫肌瘤钻的临床疗效及术后妊娠情况。方法选择2016年1月至9月112例子宫肌瘤患者,依据随机数字表法分为观察组和对照组,各56例。对照组患者采取开腹子宫肌瘤剔除术,观察组患者采取腹腔镜联合电动子宫肌瘤钻治疗,对两组患者治疗后的临床疗效、肌瘤残留率、术后妊娠率、血清疼痛指标[心肌细胞P物质(SP)、白细胞介素-6(IL-6)、前列腺素E2(PGE2)]及并发症发生率进行比较。结果观察组患者的手术时间、术中出血量少于对照组,胃肠功能恢复时间及住院时间均短于对照组(P<0.01,P<0.05)。两组患者术后肌瘤残留率和妊娠率比较均无统计学差异(P均>0.05)。治疗后,观察组患者IL-6、SP及PEG2水平均低于对照组(P均<0.05)。治疗后观察组患者并发症总发生率均低于对照组(5.36%vs 17.86%,P<0.05)。结论腹腔镜联合电动子宫肌瘤钻可明显降低子宫肌瘤患者的术中出血量,减少胃肠功能恢复时间及住院时间,降低疼痛感,减少并发症的发生率。

FGFR3基因突变导致软骨发育不全的产前分子诊断

目的本研究对FGFR3(fibroblast growth factor receptor 3,FGFR3)基因突变导致的软骨发育不全(ACH)家系的1例中期妊娠者进行产前分子诊断,以达到优生的目的。方法患者妻子于20孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水20ml,提取羊水细胞基因组DNA,对FGFR3基因外显子10进行PCR扩增并测序。结果该例胎儿FGFR3基因外显子10测序结果显示,胎儿带有与父亲一样的FGFR3基因突变(c.1138G>A),B超监测显示双顶径与孕周不相符,双顶径(PBD)值偏低,进一步证实了ACH,目前在医生的指导下已经顺利引产。结论软骨发育不全是一种少见的常染色体显性遗传病,对于有ACH风险的胎儿进行产前分子诊断非常重要,从而有效地避免患儿出生。

COL 2A1基因突变致SEDC的产前分子诊断

目的本研究对COL2A1基因(typeⅡcollagen gene)G504S突变导致的先天性脊柱骨骺发育不良(SEDC)家系的1例中期妊娠者进行产前分子诊断,从而预防SEDC的发生。方法患者妻于20孕周在B超下进行羊膜囊穿刺,抽取羊水10ml,提取羊水细胞基因组DNA。选择3个多态性STR位点,即D3S1358、D16S539和D21S11,排除母体细胞污染。在此基础上,对COL2A1基因外显子23进行扩增,PCR产物进行正、反向测序。结果该例胎儿COL2A1的外显子23测序结果显示,胎儿未带有与父亲同样的COL2A1基因突变。胎儿产前基因诊断结果与B超监测结果一致。结论对于有SEDC风险的胎儿进行产前分子诊断非常重要,可以在B超诊断前了解胎儿基因型并明确诊断。

妊娠期贫血对妊娠结局的影响

【目的】探讨妊娠期贫血患者的妊娠结局。【方法】选取南京医科大学附属南京市妇幼保健院2015年1月至2016年4月收治的225例妊娠期贫血患者为贫血组,按照贫血严重程度的不同分为轻度贫血组、中重度贫血组。选取同期收治的225例非贫血的正常的225例孕妇为非贫血组。比较两组孕妇的基本情况、妊娠合并症及妊娠结局,并分析血清铁蛋白与贫血的关系。【结果】贫血组的妊娠期高血压、产后贫血、产后出血、早产以及低体质量出生儿的比例高于非贫血组,差异有统计学意义(P<0.05)。中重度贫血组的妊娠期高血压、产后贫血、产后出血、早产以及低体质量出生儿的比例高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。血清铁蛋白正常的孕妇血红蛋白、红细胞计数高于血清铁蛋白较低组,差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】妊娠期贫血对孕妇的妊娠结局有不良影响,且贫血越严重,妊娠结局越差,应加强对妊娠期贫血的防治,孕期监测血清铁蛋白的水平,对于水平降低的产妇给予及时治疗。