土贝母苷甲诱导HeLa细胞周期阻滞和凋亡(英文)

目的 :研究土贝母苷甲 (下称苷甲 )抗肿瘤作用的机制 ,探索它对细胞周期和细胞凋亡的影响。方法 :采用MTT法检测苷甲对细胞生长的抑制作用 ;采用流式细胞术 ,光学、荧光和电子显微镜 ,以及DNA琼脂糖凝胶电泳检查和分析苷甲对细胞周期和细胞凋亡的影响 ;采用蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2和bax表达的变化。结果 :苷甲对HeLa细胞的生长有强抑制作用 ,其 2 4、4 8和 72h的IC50 值分别为 35 .7,2 3.6 ,17.4 μmol·L-1。在苷甲的作用下 ,细胞周期阻滞在G2 M期 ,细胞在形态学和生物化学上都出现了细胞凋亡的典型证据。蛋白免疫印迹结果揭示bcl 2下调 ,bax过表达。结论 :苷甲诱导的细胞周期阻滞和凋亡在苷甲的抗肿瘤效果中可能起着重要作用 ,而苷甲诱导的细胞凋亡与bcl 2的下调及bax的过表达密切相关。

土贝母甙甲抗肿瘤活性的研究

土贝母[bolbostemma paniculatum(Maxim)Franquet],是一种传统的中药.药用其块茎,原载于清代赵氏所编的本草纲目拾遗.在古代用它来治疗乳岩、乳痈、痰核和瘰疬等各种疾患,临床上显示明显的散结毒、消痈肿效果.我们用了8年时间才从其块茎中提取、分离出5种化合物,其中土贝母甙甲(以下简称甙甲)显示强抗肿瘤活性,并发现所得组分的纯度愈高,其抗瘤活性愈强,副作用愈弱.土贝母块茎购自陕西省药材公司,经鉴定后粉碎过筛用于实验.甙甲是一种巨环三萜皂甙,按照我们以前报告的方法分离。

γ-亚麻酸的抗癌活性

在体外γ－亚麻酸抑制人神经母细胞瘤细胞的生长，诱导其表型发生逆转，抑制人结肠癌，人胃癌和人胰癌细ＤＮＡ的合成，但却不抑制１２－０－十四酰佛波－１３－１乙酸酯（ＴＰＡ）增强细胞对己糖的摄入和＾３Ｈ掺入细胞磷脂的作用。在体内γ－亚麻酸抑制二甲基苯并蒽（ＤＭＢＡ）激发的、ＴＰＡ促进的小鼠皮肤乳头状瘤的发生。

γ-亚麻酸对人癌细胞蛋白质合成和脂质过氧化的影响

本文报告γ-亚麻酸对体外培养人癌细胞生长、蛋白质合成和脂质过氧化的影响。结果表明,γ-亚麻酸抑制人癌细胞生长和20、30kD蛋白质合成,并增强培养人结肠癌细胞的脂质过氧化,α-生育酚则部分抵消γ-亚麻酸的作用。上述结果提示,γ-亚麻酸的抗肿瘤效果可能是由于其对蛋白质合成的抑制作用,而蛋白质合成的抑制则可能是由增强的脂质过氧化所致。

三苯氧胺促进雌性小鼠移植性肉瘤180生长

三苯氧胺促进雌性小鼠移植性肉瘤１８０生长马润娣，于廷曦，张爱仙，于立坚陕西省中医药研究院生物化学研究室（西安市７１０００３）非类固醇抗雌激素药物三苯氧胺（Ｔａｍｏｘｉｆｅｎ）自１９７３年以来即被广泛地用于乳腺癌的姑息治疗。一般认为，三苯氧胺的抗乳腺癌...

可移植性小鼠肝癌的脂质过氧化及其对红细胞...

以BALB/C近交系小鼠和NIH小鼠(封闭群)为实验动物,可移植性小鼠肝癌(H_(22))作肿瘤模型,比较了肝癌和正常肝组织的脂质过氧化物含量,研究了肿瘤对其宿主紅细胞、肝、脾和心脏脂质过氧化的影响。结果表明,不仅肿瘤组织本身的脂质过氧化反应弱,脂质过氧化产物少,而且还影响其宿主的紅细胞、肝、脾和心脏的脂质过氧化反应,造成这些细胞或组织的脂质过氧化产物减少。此外,肿瘤这种对宿主脂质过氧化的影响还有明显的性别差异,即雄性宿主肿瘤外其他组织脂质过氧化反应减弱更为显著。

12-0-十四酰佛波-13-乙酸酯对培养细胞和小鼠皮肤脂质过氧化的影响

研究了促癌剂12—0—十四酰佛波—13—乙酸酯(TPA)对脂质过氧化的影响。经TPA处理的结肠癌细胞共脂质过氧化明显降低;经TPA处理的小鼠皮肤其脂质过氧初期升高,其后降低。γ—亚麻酸抵消TPA对小鼠皮肤脂质过氧化的影响。实验结果支持吞噬细胞,如中性粒细胞和巨噬细胞,对佛波酯的反应方式是产生超氧化物阴离子和氧自由基,但不表明氧自由基在促癌作用中起重要作用。推测促癌剂TPA引起脂质过氧化减弱的促癌过程。

食品、加热食品及粪便中的诱变物

诱变物是指能诱发细菌或哺乳动物细胞发生比自然突变频率高的突变的物质。1960年以前,一般认为化学物质的诱变性和致癌性之间的关系很薄弱。但是,自从发现许多这类物质必须经过多种代谢变化之后才有活性之后,人们一致认为。

多发性骨髓瘤病例尿中Bence Jones蛋白的定量研究

多发性骨髓瘤(multiple myeloma)是浆细胞异常增殖的恶性肿瘤。近年来发病逐渐增多。约50%的多发性骨髓瘤病人尿中可查出Bence Jones 蛋白,即抗体的轻链。临床化验检查多限于凝溶试验,一般不对Bence Jo-ucs 蛋白定量。这种病人尿中多含有其他蛋白,故尿蛋白的定量不能反映Bence Jones蛋白的量。我室采用先分离、纯化。

促癌作用和促癌剂

癌发生的二阶段学说是四十年前Beren-blum 根据下述实验事实提出的。首先在小鼠背部皮肤上涂布一次微量(不致于致癌的量)的致癌剂,比如10-100微克的二甲基苯并(α)蒽(7,12-dimethylbenz[α]anthracene,DMBA),然后再用巴豆油或其主要成分12-0-+四酰佛波-13-乙酸酯(12-0-tetrade-canoylphorbol-13-acetate,TPA)每周涂布二次,持续涂布,几乎所有小鼠都发生肿瘤。然而,无论是只微量涂布一次DMBA 或反复涂布巴豆油,还是先涂布巴豆油然后再涂布微量致癌剂都不会引起肿瘤发生。涂布一次致癌剂(如微量DMBA)

土贝母皂苷诱导人宫颈癌HeLa细胞周期阻滞和细胞凋亡

【摘要】背景和目的:土贝母皂苷是由传统中药土贝母块茎中分离得到的,由土贝母苷甲(79%)和土贝母苷乙(21%)组成。本研究旨在探讨土贝母皂苷抗肿瘤作用的机制。方法:MTT法检测土贝母皂苷对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化。结果:土贝母皂苷对人宫颈癌HeLa细胞的生长具有强抑制作用,且这种作用呈时间剂量依赖关系,处理24、48和72h的IC50值分别为20.0、18.8和8.8μmol/L。流式细胞术分析显示,15、30、35μmol/L土贝母皂苷处理5h,HeLa细胞G2/M期细胞数从9.80%分别增加到21.90%、25.92%和27.00%;处理12h,G2/M期细胞数增加更显著,从8.20%分别增加到21.40%、31.15%和34.55%。40μmol/L土贝母皂苷处理一定时间,形态学检查发现细胞核明显皱缩、核染色质凝集边聚等特征,流式细胞术检测发现凋亡峰,DNA琼脂糖凝胶电泳可见明显的梯形条带。结论:土贝母皂苷使细胞周期阻滞和诱导细胞凋亡可能在其抗肿瘤作用中具有重要意义。

从赤组织中分离到的福安肽的抗肿瘤活性的初步研究

目的研究从赤组织中分离到的福安肽(Fuantai,FAT)的抗肿瘤活性及对促血管生成因子表达的影响。方法MTT法检测FAT对体外培养的人癌细胞生长的影响;小鼠移植性肝癌(H22)模型用于检查FAT对肿瘤生长的影响;免疫组化法检查福安肽对癌组织促血管生成因子表达的影响。结果FAT对体外培养的人早幼粒白血病细胞(HL-60)、人子宫颈癌细胞(HeLa)和人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)的生长无明显影响;FAT无论腹腔注射还是灌胃都显著抑制小鼠移植性肝癌的生长,且对小鼠体重增长无明显影响。当FAT的用量为50.0 mg/(kg.d)(ip或ig)共21 d对H22的抑制率分别为67.5%和84.0%。免疫组化检测结果显示,FAT明显下调小鼠肝癌组织血管内皮细胞生长因子,碱性成纤维细胞因子和血小板衍生生长因子的表达。结论FAT的抗肿瘤活性可能与其抑制肿瘤血管生成有关。

赤魟组织粗提物的抗肿瘤作用

采用四甲基偶氮唑盐(MTT)微量酶反应比色法检查赤魟三种组织(皮肤、软组织和软骨)粗提物对体外培养的人癌细胞生长的影响,用腹腔注射或灌胃法检查赤魟三种组织粗提物对小鼠移植性肉瘤180(S180)和肝癌(H22)生长的影响。结果表明,赤魟组织粗提物对体外培养的人早幼粒白血病细胞(HL-60)、人子宫颈癌细胞(HeLa)和人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)的生长无明显影响,赤魟组织粗提物无论腹腔注射还是灌胃均显著抑制小鼠肉瘤和小鼠肝癌的生长,且对体重无明显影响;当三种组织粗提物以500mg/kg/d(相当生药量,下同)的剂量连续腹腔注射(ip)15d时,对S180的抑制率分别为63.9%、47.2%和80.3%;以3500mg/kg/d连续灌胃(ig)15d时,对S180的抑制率分别为66.9%、61.5%和66.9%;以500mg/kg/d连续腹腔注射15d时,对H22的抑制率分别为43.3%、43.3%和80.4%。

土贝母苷甲诱导人鼻咽癌细胞CNE-2Z凋亡

背景和目的:土贝母犤Bolbostemmapaniculatum(Maxim.)Franquet犦是一种传统中药,我们以前的研究结果已证实从中药土贝母块茎中分离得到的土贝母苷甲(下称苷甲)有强抗肿瘤效果。本研究旨在探讨苷甲对人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的影响。方法:MTT法检测苷甲对肿瘤细胞生长的抑制作用,流式细胞仪分析细胞周期,荧光显微镜和电子显微镜观察细胞形态,琼脂糖凝胶电泳检测DNA电泳图谱的变化,蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl-2和bax表达的变化。结果:苷甲抑制CNE-2Z细胞的生长,其24、48、72h的IC50分别为32.5、20.7、16.7μmol/L。苷甲诱导CNE-2Z细胞发生程序性死亡:流式细胞分析发现Sub-G1峰,50μmol/L苷甲作用CNE-2Z细胞12h,凋亡指数为72.8%;CNE-2Z细胞经苷甲作用(10μmol/L,24、48、72h;30、40、50、60μmol/L,12h)后,其DNA电泳图中出现典型的梯形条带。苷甲诱导bcl-2表达下调且磷酸化,并伴有bax高表达。结论:苷甲诱导CNE-2Z细胞发生形态学和生化学上典型的程序性死亡,其诱导的CNE-2Z细胞凋亡与bcl-2失活和bax激活有关。

土贝母苷甲对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响

目的:探讨土贝母苷甲(下称苷甲)对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:PGCL3细胞经不同剂量苷甲处理24、48、72h,MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用重组基底膜侵袭模型、粘附基质分析、Transwell小室趋化运动模型研究苷甲对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测苷甲对PGCL3细胞分泌Ⅳ型胶原酶(MMP-2)能力及活性的影响。结果:苷甲明显抑制PGCL3细胞的生长,且呈剂量依赖关系,作用24、48、72h的IC50分别为15.70、14.20和13.32μmo.lL-1。苷甲1.25、2.50、5.00μmol·L-1处理PGCL3细胞24h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为28.7%、41.0%、57.5%;对PGCL3细胞迁移能力的抑制率分别为21.6%、35.2%、53.7%。苷甲降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且呈一定的剂量依赖关系。结论:苷甲抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力,其对PGCL3细胞的侵袭和粘附的影响可能与其降低PGCL3细胞MMP-2的分泌量及其活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率有关。

土贝母苷甲和苷乙的抗肿瘤作用

土贝母 [Bolbostemmapaniculatum(Maxim )Franquet (Cucurbitaceae) ]是一种传统中药。土贝母苷甲和苷乙都是从土贝母中分离、纯化出来的抗肿瘤活性成分 ,属齐墩果烷型三萜皂苷 ,苷甲和苷乙在结构上的惟一区别是苷乙 16位碳上的羟基。苷甲和苷乙的构效关系研究表明 ,苷乙的抗肿瘤活性较苷甲更强 ,毒性更低。苷甲和苷乙都能诱导细胞周期阻滞和细胞凋亡。

土贝母皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞侵袭行为的影响

目的:土贝母[Bolbostemma paniculatum(Max-im.)Franquet]是一种传统中药。我们以前的研究结果已证实从土贝母块茎中分离得到的土贝母皂苷(下称皂苷)有强抗肿瘤效果和诱导肿瘤细胞调亡作用。本研究旨在探讨皂苷对人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞粘附、侵袭和迁移能力的影响。方法:MTT法检测其对PGCL3细胞生长的影响;分别用粘附相关基底膜成分分析试验、重组基底膜侵袭试验、Transwell室趋化运动模型研究皂苷对PGCL3细胞的粘附、侵袭和运动能力的影响;用酶谱法检测皂苷对Ⅳ型胶原酶分泌及活性的影响。结果:皂苷明显抑制PGCL3细胞的生长,且其效果呈剂量依赖关系。皂苷作用PGCL3细胞24、48、72 h的IC50值分别为16.77、14.62、14.46μmol.L-1。皂苷1.25、2.50、5.00μmol.L-1处理PGCL3细胞24 h,对PGCL3细胞侵袭能力的抑制率分别为20.6%、30.6%、46.8%,对PGCL3细胞运动能力的抑制率分别为14.2%、24.7%、42.5%。皂苷降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及Ⅳ型胶原酶活性,降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,且其效果呈一定的剂量依赖关系。结论:皂苷抑制人高转移巨细胞肺癌PGCL3细胞的粘附、侵袭和迁移能力;皂苷对PGCL3细胞粘附和侵袭的影响与其降低PGCL3细胞对层粘连蛋白、纤维粘连蛋白的粘附率,降低PGCL3细胞Ⅳ型胶原酶的分泌量及其活性有关。

福安泰-03对肿瘤血管生成的抑制作用

目的研究从赤魟组织中分离到的福安泰-03(Fuan-tai-03,FAT-03)对肿瘤血管生成的影响。方法鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)法检测FAT-03对人低分化鼻咽癌细胞(CNE-2Z)诱导的CAM血管生成的影响;免疫组化法检查FAT-03对裸小鼠Lewis肺癌组织微血管密度(MVD)和血管生成因子表达的影响。结果FAT-03抑制CNE-2Z细胞诱导的CAM血管生成,当其用量为20、40、80、160μg/胚/d×5时,其抑制率分别为22.3%、34.3%、43.3%、46.2%。FAT-03降低小鼠Lewis肺癌组织的MVD,FAT-03组平均微血管数为9.1±1.5(对照组为18.2±3.2,P<0.05)。免疫组化检测结果显示,FAT-03明显下调小鼠Lewis肺癌组织血管内皮细胞生长因子(VEGF),碱性成纤维细胞因子(bFGF)和血小板衍生生长因子(PDGF)的表达。结论FAT-03有抗肿瘤血管生成作用,其作用与它的下调VEGF、bFGF和PDGF的表达密切相关。

土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤和Lewis肺癌转移的抑制作用

目的:本研究旨在探讨土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤和Lewis肺癌转移的影响。方法:采用裸BALB/c小鼠B16黑色素瘤实验转移和裸BALB/c小鼠Lewis肺癌自发转移模型研究土贝母苷甲对肿瘤转移的影响;采用免疫组织化学法检测土贝母苷甲对转移相关基因CD44v6、ErbB-2和nm23-H1表达的影响。结果:腹腔注射低于全身中毒水平剂量的土贝母苷甲明显减少接种B16黑色素瘤细胞小鼠的肺重和肺转移灶数量,而对小鼠的健康和活力无明显影响;土贝母苷甲(2、3 mg.kg-1.d-1×14 d)和环磷酰胺(50 mg.kg-1.wk-1×2 d)对B16黑色素瘤细胞肺转移的抑制率分别为68.8%、82.8%和49.1%。土贝母苷甲治疗组小鼠Lewis肺癌原发肿瘤的平均瘤重明显低于对照组(P<0.05)。土贝母苷甲(2、3 mg.kg-1.d-1×14 d)和环磷酰胺(50 mg.kg-1.w-1×2 d)治疗组小鼠的肝转移抑制率分别为46.3%、52.0%和54.7%。土贝母苷甲显著下调促转移基因CD44v6和ErbB-2的表达,上调抑转移基因nm23-H1的表达。结论:土贝母苷甲对小鼠B16黑色素瘤的实验性转移和Lewis肺癌的自发性转移都有显著的抑制作用。土贝母苷甲对肿瘤转移的这种抑制作用与其抑制原发肿瘤生长、下调促转移基因CD44v6和ErbB-2及上调抑转移基因nm23-H1的表达有关,提示土贝母苷甲是一个阻止癌扩散和转移的候补化合物。

土贝母皂苷诱导人鼻咽癌细胞株CNE-2Z细胞凋亡的研究

目的 研究土贝母皂苷 (下称皂苷 )对人鼻咽癌细胞株CNE 2Z细胞凋亡的影响。方法 MTT法检测皂苷对CNE 2Z细胞生长的影响 ;形态学方法 (荧光显微镜和透射电镜 )、流式细胞仪和DNA琼脂糖凝胶电泳观察和分析在皂苷作用下CNE 2Z细胞形态、DNA含量的变化和DNA断裂的情况 ;蛋白免疫印迹法检测凋亡相关基因bcl 2、bax和cas pase 3表达的变化。 结果 皂苷抑制CNE 2Z细胞的生长 ,其效果与皂苷的浓度和作用时间相关 ;诱导CNE 2Z细胞发生典型程序性死亡 ;凋亡抑制基因bcl 2表达逐渐减少 ;而凋亡诱导基因bax和caspase 3在 1、3、5h表达增高。 结论 诱导细胞凋亡是皂苷发挥抗瘤效果的一种重要机制 ;皂苷诱导的CNE 2Z细胞凋亡与bcl 2、bax和caspase