高校生物类实验室安全分级分类管理实践与探索

实验室安全管理是高校管理工作的重要组成部分。随着科学技术的迅速发展和高等教育规模的不断扩大,如何保障实验室安全成为一个新课题。贵州大学对实验室安全分级分类管理进行了持续的探索和实践,制订了各项规章制度和具体措施。介绍了生物类实验室存在的安全隐患类型及分级管理原则,提出了具体的管理策略,杜绝实验室安全事故发生,为学校顺利开展教学和科研工作提供基本保障。

基于属性识别模型的铜仁市空气质量评价

为行政部门有效治理城市环境和生态保护,科学客观评价空气质量极为重要。本研究以铜仁市为对象,统计分析了2015-2020年铜仁市空气污染物变化动态特征,同时利用属性识别模型综合评价了铜仁市空气质量水平。研究结果表明:1)铜仁市主要污染物是PM_(2.5)、PM_(10)和O_(3),其污染程度为PM_(2.5)>PM_(10)≈O_(3),PM_(2.5)和PM_(10)浓度水平处于Ⅱ级标准,PM_(2.5)在冬季处于不达标水平,PM_(10)于2020年达Ⅰ级以下标准,有显著好转,O_(3)浓度2016年以来显著增加,存在污染风险。2)铜仁市近几年空气综合质量均为Ⅰ级标准,但空气质量综合水平呈下降趋势,主要原因在于PM_(2.5)作为首要的空气污染物,污染水平一直没有得到有效控制。此外,O_(3)污染程度风险增加。因此,PM_(2.5)和O_(3)是以后污染物控制的重点。

数码显微互动系统对《微生物学》课程教学模式的影响

数码显微互动系统是基于数台光学显微镜的图像采集和汇总显示系统,通过在光学显微镜上加装UOP0500CC数码相机进行图像采集,通过Image View软件对相机采集图像进行处理,通过易创数字网络显微互动系统软件,实现将教室中任意一台电脑显示屏上显示的图像、视频等在教室内部的各台电脑上同步显示,从而使《微生物学》实验中涉及显微观察的部分有了重大的技术改革。

基于能力培养的“生物科学大实验”课教学改革

高校“生物科学大实验”课程的开设对学生的实践能力、创新能力及团队协作能力的培养具有指导意义。文章对贵州大学生命科学学院“生物科学大实验”课程设置做了简介,分析了该课程开展的基本情况及存在的问题,并针对目前实验课程开展的现状提出了相应对策。经改革后的“生物科学大实验”课程有助于巩固学生对以往知识的理解,激发科研热情,也可为其他学校专业发展和学生培养提供参考。

污染土壤重金属修复的开放性实验

本文研究了不同浓度水杨酸对孔雀草生长和吸收土壤中重金属镉能力的影响。以镉超积累植物孔雀草为实验植物,在穴盘中种植孔雀草长至3~4片真叶,移栽至100 mg•kg−1镉污染土壤中,每隔5天向孔雀草地上部喷施不同浓度(0, 0.1, 0.2, 0.3, 0.4 mmol•L−1)水杨酸,在种植70天后收获,测定孔雀草各部分生理指标及镉含量。结果表明:0.2 mmol•L−1水杨酸能够促进土壤中的镉向孔雀草地上部转移。可见,水杨酸能够提高孔雀草生长和吸收镉的能力,从而提高孔雀草修复镉污染土壤的效率。该实验具有综合性、开放性和创新性的特点,有利于培养学生的综合素质及创新能力。

PCR克隆EB病毒潜伏膜蛋白-1基因

目的：构建ＥＢ病毒潜伏膜蛋白－１重组表达质粒。方法：ＰＣＲ克隆技术，即用ＰＣＲ方法从Ｂ９５－８细胞中钓出ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因ＤＮＡ序列，然后定向克隆到真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３．１中，以此构建成ｐｃＤＮＡ３．１－ＬＭＰ重组质粒。结果：经酶切鉴定，确定已获得重组质粒ｐｃＤＮＡ３．１ＬＭＰ１。结论：在真核表达质粒中已成功地克隆了ＥＢ病毒ＬＭＰ１基因。

呼吸道合胞病毒G蛋白胞外区基因克隆及序列分析

目的 对呼吸道合胞病毒G蛋白胞外区基因进行克隆及序列分析 .方法 从RSV感染的喘息型支气管炎患儿咽试子分离的病毒培养物中提取病毒RNA ,进行逆转录及PCR扩增 ,克隆到G蛋白胞外区基因DNA序列分析 .结果 克隆片段全长 6 90bp ,编码一个含有 2 2 9个氨基酸的多肽 .与 5个GenBank中不同的RSV分离株(包括A ,B亚型 )的G蛋白胞外区的氨基酸序列相比 ,A亚型的RSV毒株氨基酸水平的同源率为 95 .2 %～86 .0 % ,B亚型的氨基酸水平同源率为 44 .3% .氨基酸的变异主要集中在胞外区一个高度保守的两端 .该G蛋白胞外区的核苷酸序列与A亚型RSV -G32 3相比同源率为 97.9% .结论 广州地区RSV分离株 (9815 9)属于A亚型 ;其G蛋白胞外区基因具有较高的变异性 。

高效凝胶色谱法测定猴头菇多糖分子量及含量

利用高效凝胶过滤色谱法（GFC）,示差折光检测猴头菇子实体和猴头菇口服液中的猴头菇多糖的分子量和含量。通过建立不同分子量的葡聚糖标准品校正曲线,测定了猴头菇多糖的分子量和分子量分布;以保留时间与猴头菇多糖最接近的葡聚糖作为标准品,利用峰面积外标法定量测定猴头菇多糖的含量。结果表明,猴头菇子实体和猴头菇口服液多糖数均分子量Mn均为1.6×10^4Da,重均分子量Mw均为1.7×10^4Da,分布宽D值在1.05-1.07范围,重复良好。猴头菇子实体多糖含量为0.66%,猴头菇口服液多糖含量为37.1mg/100mL,方法学验证基本符合要求。

一种口服液对酒精性肝损伤小鼠的保护作用机制探讨

目的:探讨以葛根、灵芝、枳椇子、五味子、甘草为中药组方的口服液对酒精性肝损伤小鼠的保护功能及其作用机制。方法:建立小鼠酒精性肝损伤模型,测定并比较各组小鼠TP,ALT、AST、TG的水平与肝组织匀浆中丙二醛(MDA)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)的含量和活性。结果:(1)与模型对照组相比,低、中、高3个剂量给药30 d后,小鼠血液中的乙醇含量均不同程度的降低,差异有统计学意义(P<0.05),且各剂量组具有较好的量效关系。(2)与模型对照组相比,低、中、高剂量组能够不同程度的改善小鼠血清肝功能生化指标,其中,中、高剂量组小鼠的AST、ALT活力明显下降,3个剂量组均明显降低血清TG含量,差异有统计学意义(P<0.01);高剂量组能明显降低肝脏中的MDA含量,差异有统计学意义(P<0.01),而低、中高剂量组,还均能够明显提升ADH和GSH-Px酶活力,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:以葛根、灵芝、枳椇子、五味子、甘草为中药组方的口服液对小鼠酒精性肝损伤的有明确的保护功能,这对开发对酒精性肝损伤的有保护作用的药品与保健品方面具有一定的参考价值。

论银行业务网络性能分析与优化研究

本文从银行业务网的网络结构分析入手,介绍了银行业务网的现状和存在的问题,提出了银行系统网络优化的必要性。并结合业务网自身的网络结构特点,论述了系统网络优化的设计原则,对优化后的网络构架进行了性能分析,对银行业务网的网络优化设计方案进行了总结。

超表达HnCYP82M3和DsTRI基因对颠茄托品烷生物碱合成的影响

托品烷生物碱(TAs)是一类临床上广泛应用的抗胆碱药物,颠茄是提取TAs的主要药源植物,利用代谢工程技术大量获取TAs具有重要的产业价值。本研究基于开源引流代谢工程策略,在颠茄发根中超表达TAs合成途径分支处的细胞色素氧化酶(cytochrome oxidase,CYP82M3)HnCYP82M3(来源于天仙子)和托品酮还原酶I(tropinone reductase I,TRI)DsTRI(来源于曼陀罗)两个酶基因,以期通过CYP82M3催化合成托品酮(开源),TRI进而将托品酮引入TAs合成的代谢方向(引流),大量促进3种TAs的积累。从天仙子根中克隆了HnCYP82M3基因,其编码氨基酸与颠茄AbCYP82M3序列一致性高达91.7%。单独超表达HnCYP82M3不影响颠茄发根TAs的含量,说明CYP82M3不是TAs合成的关键酶。同时超表达HnCYP82M3和DsTRI极大促进了3种TAs的积累,莨菪碱、山莨菪和东莨菪碱含量分别是对照的4.97倍、2.83倍和2.19倍,并且提高幅度大于DsTRI单表达。本研究证明分支点处酶基因共表达的开源引流策略是有效提高颠茄TAs合成的代谢工程新方法,为工业化大量获取TAs奠定了理论和技术基础。

rolB基因对颠茄表型发育和托品烷生物碱合成的影响

发根农杆菌pRiA4质粒上的rol基因是促进次生代谢的强效基因,可利用rol基因对颠茄进行分子育种以提升颠茄中托品烷生物碱(tropane alkaloids, TAs)含量。本研究将rolB基因在颠茄植株中进行超表达,为了研究rolB基因对颠茄TAs生物合成的影响,分析了转基因颠茄的表型、TAs含量及TAs合成途径中关键酶基因的表达水平。结果表明,转基因颠茄根系发达,叶片增大、叶片鲜重增加、叶片颜色加深,花朵增大、花形改变,雌蕊高度降低,花粉活力下降。转基因颠茄茎中TAs的含量显著高于对照,东莨菪碱、山莨菪碱、莨菪碱的含量分别为对照的2.11~2.91、1.23~2.37、4.88~5.20倍。与对照组相比, TAs合成途径中的关键酶基因N-甲基腐胺转移酶(PMT)、吡咯烷聚酮合酶(PYKS)、托品酮还原酶I (TRI)、芳香族氨基酸氨基转移酶4 (ArAT4)、UDP-糖基转移酶1 (UGT1)和莨菪碱6-β-羟化酶(H6H)的表达上调,且托品酮还原酶II (TRII)作为代谢分流基因表达下调。研究表明rolB基因通过增强TAs合成途径代谢流和减弱竞争支路代谢分流,增强了颠茄根中TAs的合成能力和茎中的积累。本研究为利用rolB基因进行高产TAs颠茄的分子育种奠定了基础。