RP-HPLC法测定O/W型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素的含量

目的:建立柱前衍生化 HPLC 法测定 O/W 型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素含量的方法。方法:采用青蒿素的柱前碱性衍生反应,Agilent HC—C_(18)(250 mm×4.6 mm,5μm)色谱柱,流动相为甲醇:0.05 moL·L^(-1)醋酸钠-醋酸缓冲液(pH5.8)=66:34;流速:0.5 mL·min^(-1);柱温:25℃;检测波长:259.8 nm。结果:青蒿素的柱前衍生化反应彻底可靠,该方法在检测波长259.8 nm,试样浓度0.3～10μg·mL^(-1)范围内,与检测峰峰面积呈良好的线性关系(r=0.999),平均回收率为96.1%,RSD=1.1%。结论:本方法简便、精密,回收率与精密度高,重现性好,可用于青蒿素脂肪乳剂中青蒿素含量的测定。

注射用青霉素钠与脂肪乳的配伍稳定性及体外抑菌活性检测

目的考察注射用青霉素钠分别与10%,20%,30%脂肪乳配伍后的稳定性及体外抑菌活性。方法分别利用pH计和动态光散射粒径仪检测配伍液在25℃和4℃下24 h内pH和粒径的变化情况,采用高效液相色谱法检测配伍液中药物的含量变化情况,采用微量液体稀释法考察配伍液的体外抑菌活性。结果注射用青霉素钠分别与10%,20%,30%脂肪乳配伍后,配伍液的外观、pH、粒径、含量均无明显改变,配伍后对青霉素钠的抑菌作用也无影响。结论注射用青霉素钠与10%,20%,30%脂肪乳配伍后,稳定性良好,符合注射液的要求,可以配伍使用。

前列地尔脂微球注射液中游离药物浓度测定方法研究

目的建立检测前列地尔脂微球中游离药物浓度的方法。方法采用不同规格的超滤膜、以不同离心速率对前列地尔脂微球注射液样品进行处理，高效液相色谱-质谱法检测水相中游离药物浓度。结果用10K超滤膜滤过、以5000r／min速率4℃离心30min，对前列地尔脂微球注射液样品进行处理；采用高效液相色谱-质谱法检测水相中游离药物浓度，结果样品在5h内稳定，RSD为0．43％，方法重现性良好。前列地尔质量浓度在5～60ng／mL范围内与峰面积线性关系良好，线性回归方程为Y=5．7586X＋7．1275，r=0．9972（n=7），最低检测限5ng／mL。方法的平均回收率为96．4％，RSD为0．88％。结论该法可快速简便有效地检测出前列地尔脂微球注射液中游离前列地尔的浓度，重现性良好。

紫外分光光度法测定O/W型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素的含量

建立了以紫外分光光度计法测定O/W型青蒿素脂肪乳剂中青蒿素的含量的方法.溶剂为V(乙醇):V(0.2%NaOH水溶液)=1:4,检测波长为290nm.青蒿素在10～60 μg/mL检测波长范围内与吸收度呈良好的线性关系(r=0.999166),平均回收率为100.72%(RSD=2.12).方法可用于青蒿素脂肪乳剂中青蒿素含量的测定.

离子对反相高效液相色谱法测定阿仑膦酸钠的含量

以四丁基溴化铵为离子对试剂，采用离子对反相高校液相色谱法，配以示差折光检测器（RI）检测，建立了用于阿仑膦酸钠含量测定的分析方法。以Agilent CLC-ODS C18柱为固定相，流动相为V（甲醇）：V（水）=10：90，含5mmol／LNH4H2P04，2mmol／L四丁基溴化铵，1．5mmol／L乙二胺四乙酸二钠，用NaOH调节pH至7．2），流速为1．0mL／min，柱温为室温。方法的线性范围为80～720mg／L；回归方程为A=0．3971ρ-10．624，r=0．9993；方法的平均回收率为100．0％：RSD为0．76％．在该色谱条件下,得到阿仑膦酸钠主峰。

自组装多肽支架材料的研究进展

多肽分子可以利用氢键、疏水性作用、π-π堆积作用等非共价键力自组装形成形态与结构特异的多肽分子聚集体,如分子积木、分子开关、分子涂料及纳米纤维等,由于多肽分子良好的生物相容性和可调控的降解性,自组装多肽在组织工程、药物缓释等方面表现出巨大的应用潜力。本文总体介绍了多肽自组装的几种结构模型及自组装的设计原则,重点叙述了自组装多肽作为组织工程支架材料的研究进展。

青霉素钠和头孢唑林钠与脂肪乳配伍时的含量测定

目的建立检测两种常用的抗生素（注射用青霉素钠、注射用头孢唑林钠）在分别与10％，20％，30％脂肪乳配伍时含量的高效液相色谱法，同时考察配伍后24h内两种抗生素的含量变化。方法色谱柱为AgilentHCc。s柱（250mm×4．6mm，5μm）。检测青霉素钠的流动相为0．1mol／L磷酸二氢钾溶液（pH=2．5）-乙腈（70：30），流速为1．0mL／min，柱温为25℃，检测波长为225nm。检测头孢唑林钠的流动相为磷酸氢二钠-枸橼酸水溶液（各3．8×10～mol／L）-乙腈（88：12），流速为1．0mL／min，柱温为25℃，检测波长为254nm。结果青霉素钠的质量浓度在0．075～4．8g／L范围内与峰面积呈良好线性关系（r=0．9998）。头孢唑林钠的质量浓度在0．0078～8．0g／L范围内，与峰面积呈良好线性关系（r=0．9998）。结论该方法简便、精密，回收率与精密度高，重现性好，可用于青霉素钠及头孢唑林钠在脂肪乳中的含量检测。

HPLC法测定炔雌醇脂质体的含量及包封率

目的建立测定炔雌醇脂质体的含量及包封率的方法。方法采用HPLC法，以AgilentHC—C18柱（4．6mm×250mm，5μm）为色谱柱，流动相为甲醇-水（体积比70：30），柱温为室温，流速为1．0mL·min^-1，紫外检测波长为281nm。结果炔雌醇与卵磷脂、溶剂峰能有效分离，炔雌醇在2～20μg·mL^-1范围内线性关系良好（r=0．9997，n=10），回收率在98．0％～102．0％之间。结论所建立的方法简便、准确、灵敏度高、方法可靠，可作为炔雌醇脂质体的含量及包封率的质量控制方法。

三维多肽支架中前成骨细胞MC3T3-E1成骨分化的初步研究

在多肽EAK16水凝胶支架上接种小鼠前成骨细胞MC3T3-E1,采用倒置显微镜观察细胞形态,CCK-8(细胞计数试剂盒)检测细胞增殖情况。细胞在诱导培养基中培养1周后,观察不同时间段细胞碱性磷酸酶的分泌活性。采用ALP染色和茜素红-S染色作为定性实验研究MC3T3-E1向成骨方向的分化情况。结果表明,MC3T3-E1细胞在水凝胶支架EAK16上有较好的黏附和增殖能力,诱导培养后细胞有较高水平的碱性磷酸酶表达和矿化基质沉积。多肽水凝胶支架对前成骨细胞MC3T3-E1具有较好的生物相容性。

先进递药技术创新研究和专利保护

随着我国医保范围的扩大，保障全民用药安全、有效、经济成为医药领域的重大课题，针对制药企业如何在有效降低药品费用的基础上，让老百姓及时使用全新开发的特效药物成为全行业面对的巨大挑战。目前国内外成功开发全新化合物药物单体的难度不断提升，新药研究费用大幅度增加．新药研发周期持续延长，使得我国新药研发面临前所未有的冲击和考验。

反相高效液相色谱法测定O/W型二氢青蒿素脂肪乳剂中二氢青蒿素含量

目的建立测定O／W型二氢青蒿素脂肪乳剂中二氢青蒿素含量的高效液相色谱法。方法采用AgilentHC—C18柱（250mm×4．6mm，5μm），流动相为乙腈-水（60：40），流速1．0mL／min，柱温25℃，检测波长216nm。结果该方法试样质量浓度0．002129-2．18g／L范围内与检测峰峰面积呈良好线性关系，平均回收率为95．33％，RSD=1．40％（n=9）。结论该方法简便、精密，回收率高，重现性好，可用于二氢青蒿素脂肪乳剂中二氢青蒿素含量的测定。

注射用头孢唑林钠与脂肪乳的配伍稳定性及对体内外抑菌活性的影响

目的考察注射用头孢唑林钠(CS)与脂肪乳配伍时的稳定性及配伍后在体内外的抑菌活性。方法分别利用pH计和动态光散射粒径仪检测CS与脂肪乳配伍液在25℃和4℃下24 h内的pH值和粒径的变化情况,采用HPLC法检测配伍液中药物的含量变化情况,采用微量液体稀释法考察配伍液的体外抑菌活性,考察CS(900、300、100 mg·kg^(-1))分别与生理盐水及10%脂肪乳配伍后对金黄色葡萄球菌感染小鼠存活率的影响。结果 CS分别与10%、20%和30%脂肪乳配伍后,脂肪乳的外观、pH值、粒径、含量均无明显改变(P>0.05)。CS-10%脂肪乳、CS-20%脂肪乳和CS-30%脂肪乳对大肠杆菌的最低抑菌浓度分别为1、0.5、0.5 mg·L^(-1),与CS(2 mg·L^(-1))相比无显著差异(P>0.05);对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为0.25、0.25、0.25 mg·L^(-1),与CS(0.5 mg·L^(-1))相比无显著差异(P>0.05)。CS 300 mg·kg^(-1)与10%脂肪乳配伍后对金黄色葡萄球菌的体内抑菌作用(小鼠7 d存活率40%)优于用生理盐水稀释(小鼠7 d存活率20%)(P<0.01)。结论 CS在分别与10%、20%和30%脂肪乳配伍时稳定性良好,与10%脂肪乳配伍对体内外抑菌效果也无影响。

二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用

采用CCK-8细胞增殖检测、流式细胞仪、Hoechst 33258染色、细胞周期检测、细胞凋亡检测等研究了二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导作用。细胞增殖检测发现二氢青蒿素对MG-63细胞48h及72h时的50%抑制率分别为44.87μmol/L和19.15μmol/L;细胞周期检测发现细胞生长被阻滞在G_0/G_1期;Hoechst33258染色凋亡检测发现细胞核出现致密的固缩形态及颗粒状荧光;Annexin V-FITC双染细胞凋亡检测发现二氢青蒿素对MG-63细胞的凋亡率为45.10%。表明:二氢青蒿素可明显诱导MG-63细胞的凋亡,并且MG-63细胞的凋亡与二氢青蒿素存在剂量与时间依赖关系,二氢青蒿素对人成骨肉瘤MG-63细胞凋亡的诱导具有显著作用,这将为进一步研究细胞凋亡机制提供基础和实验依据。

反相离子对色谱法分析阿仑膦酸酰胺化衍生物

目的:建立高效液相色谱分析亲脂性阿仑膦酸酰胺化衍生物的方法。方法:采用反相离子对色谱法、示差折光检测器,以Agilent CLC-ODS C18为固定相,流动相为甲醇-水(含5mmol·L-1磷酸二氢铵,2mmol·L-1十二烷三丁基溴化胺,pH7.2),两者比例为75∶25,等度洗脱,流速1.0mL·min-1。结果:衍生物与其他物质分离良好,方法在0.5～30mg·mL-1内线性关系良好(r=0.9994),回收率为98.3%,RSD=0.4%(n=6)。结论:该方法操作简单方便,重复性较好,结果令人满意,可用于阿仑膦酸钠衍生物的分析。

高分子聚合物包裹胰岛素微球的制备及其体外质量评价

目的：采用水包油包张复乳法制备聚乙烯醇-聚乳酸羟基乙酸（PVA-g-PLGA）胰岛素微球,建立测定胰岛素PVA-g-PLGA微球药物含量的高效液相色谱法,通过考察微球的外观、粒径、载药率和包封率对微球的质量进行评价,通过比较PLGA和PVA-g-PLGA微球的体外降解pH变化来初步判断PVA-g-PLGA是否具有蛋白保护能力。方法：利用扫描电子显微镜观察胰岛素微球的表面形貌,使用激光粒度仪测定微球的粒径分布,用高效液相色谱仪测定微球的载药率和包封率。结果：所制备的胰岛素PVA-g-PLGA微球粒径均一、光滑、圆润,微球之间没有粘连,微球粒径在1800～4000 nm之间,分布相对集中;微球含量为170.8μg·mg-1,载药率为1.53%,包封率为56.51%,96 h的累积释放率为42.67%;随着时间的延长,PLGA微球体外降解的pH明显低于PVA-g-PLGA微球。结论：采用复乳法制备的微球外观光滑、圆润,微球之间无粘连,粒径均一;所建立的HPLC含量测定方法符合方法验证基本要求;PVA-g-PLGA微球具有一定的蛋白保护能力。