耐异烟肼结核分支杆菌耐药相关基因突变研究

目的:阐明结核分支杆菌耐异烟肼临床分离株katG基因、inhA基因、ahpC基因、kasA基因及oxyR基因突变特点,探讨是否可能通过DNA序列分析来判断结核分支杆菌对异烟肼的敏感性.……

结核分枝杆菌Rv2352c基因的克隆表达及其抗原活性鉴定

目的构建含结核分枝杆菌（M．tb）rv2352c基因原核表达载体，经转化E．coli以表达Rv2352c融合蛋白，并研究其抗原性。方法用PCR扩增M．tbrv2352c基因，克隆入pET30a（＋）质粒，构建pET30a（＋）：rv2352c重组质粒，阳性克隆测序验证正确后转化入表达宿主大肠杆菌BL21（DE3），经IPTG诱导Rv2352c蛋白表达。经Ni＋-NTA层析柱纯化融合蛋白，通过SDS—PAGE和结核患者血清Westernblot进行鉴定。将纯化的重组蛋白分别免疫家兔，制备抗Rv2352c抗血清，抗血清的效价测定采用酶联免疫吸附试验法（ELISA），取兔抗血清与纯化蛋白Rv2352c通过Westernblot方法，检测抗体特异性。结果经酶切鉴定和测序分析证实rv2352c原核表达质粒构建正确，SDS．PAGE和Westernblot结果显示，在45kD处呈现单一蛋白条带。用重组蛋白Rv2352c免疫接种后可诱导出高滴度的特异性抗体。纯化蛋白通过Westernblot鉴定证实为目的蛋白，有较强的免疫原性。结论成功构建原核表达重组质粒pET30a（＋）：rv2352c，制备和纯化的Rv2352c融合蛋白具有较好的纯度和生物学功能，为进一步研究结核病的潜在分子标志物奠定基础。

选择比努力更重要

成功没有捷径，关键是走的路是否正确。 常常听人这样说：我很努力地做了，但是幸运之神总是不眷顾我，使我不能摆脱现在这种平庸的处境。是的，也许你真的足够努力了。但你立该想一想，为什么幸运之神总是不青睐你？是否是你选择努力的方向错了？

思恩

思恩是我的儿子。两个多月前出生在我县的中心医院。临出院时,婴儿的出生证明上要写上宝宝的姓名,妈妈问我取个什么名字,我说叫“思恩”吧。 思恩,思想神的恩典。 我的外太婆是基督徒,外公外婆是基督徒,妈妈也是基督徒。小时候。

混合式学习模式在高职艺术设计课程中的应用

信息化的发展变化改变着我国传统的教学方式.尽管我国多年来一直在进行着职业教育教学方面的改革和探究,但若始终坚持传统的以教师在课堂上进行授课方式很难调动学生的主动性和积极性,并且几乎做不到培养学生创新思维和创新能力,只有运用新型的教学方式才能够使学生的创新能力得以开发.专业教师将在企业培训过程中运用的混合式学习方式运用到高等职业教育教学过程中,混合式学习模式将为职业教育带来新的挑战和机遇.

浅议非结核分枝杆菌肺病的诊断

随着非结核分枝杆菌（ nontuberculous mycobacteria，NTM）细菌学和分子生物学鉴定技术的发展、人们对NTM认识的提高、获得性免疫缺陷综合征（艾滋病）的流行及人口老龄化等诸多因素的影响，使得NTM病的发病率呈增长趋势，痰抗酸杆菌阳性者中诊断为NTM肺病的病例也逐渐增多。在有些国家和地区，NTM感染率和患病率甚至超过结核病。

结核杆菌体内诱导基因的筛选及初步分析

目的筛选结核杆菌在人体内诱导表达的基因，进而作为候选的免疫及药物分子新靶位。方法构建结核杆菌基因组表达文库，应用体内诱导的抗原技术，用吸收过的结核患者血清筛选文库，对阳性克隆测序得到开放阅读框（ORF）。结果实验共确定了51个ORF。按照功能分为8类：毒力、解毒及调节相关基因1个，细胞壁与细胞处理相关基因13个，中间代谢和呼吸相关基因11个，脂类代谢基因7个，信号通路基因2个，PE／PPE蛋白家族基因3个，保守假设蛋白基因12个，与牛型分支杆菌同源的保守假设蛋白基因2个。结论应用体内诱导抗原技术可以筛选到结核杆菌进入人体后诱导表达的基因，其中部分基因可以作为结核病预防、诊断和治疗研究的候选靶位。

结核分枝杆菌rv3873基因原核表达载体的构建、表达和纯化

目的构建结核分枝杆菌（M．tb）rv3873基因原核表达载体并进行表达。方法用聚合酶链反应（PCR）扩增MTBrv3873基因，并克隆入pGEM～TEasy质粒。测序正确后，再亚克隆入pET30a（＋）质粒，构建pET30a（＋）：rv3873重组体。结果以重组体分别转化DH5a和BL21（DE3）菌后，经0．4mmol／L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷（IPTG）诱导，pET30a（＋）：rv3873表达出相对分子质量为47000左右的重组蛋白。SDS-PAGE分析显示，IPTG诱导4h重组蛋白的表达量最高。表达蛋白以包涵体形式存在于胞质中，表达量占全菌蛋白质的50％，Westernblot证实其具有良好的抗原性。经Ni-NTA柱纯化，获得纯度为90％的重组蛋白。结论成功地构建原核表达载体pET30a（＋）：rv3873，并获得重组Rv3873蛋白，为辅助诊断结核菌的感染奠定了基础。

反应时间对水热法制备VO2(B)纳米电池材料的影响

采用水热处理法制备VO2(B)纳米带结构,对VO2(B)纳米带的微观形貌及其应用为钠离子正极材料时的电化学性能进行了检测。结果表明:水热处理时间为2 h时,反应生成了高纯度VO2(B);当水热处理时间进一步加长到10 h,产物结晶度没有明显变化;不同水热处理时间后,产物中都生成了纳米带结构,水热处理6 h制备的产物生成了众多的纳米带(厚度10 nm,宽度40 nm,长度2μm);不同水热处理时间后,材料的放电量均随着循环数的增加单调减小。电压为1.5~4.5 V时,VO2(B)的放电比容量为175 mA·h/g,充放电循环60次后的比容量约为原来的50%。