HbA1c、Betatrophin对2型糖尿病肾脏疾病相关性及诊断价值研究

目的:分析糖化血红蛋白(HbA1c)和促代谢因子(Betatrophin)与2型糖尿病肾脏疾病(DKD)的相关性,及对DKD早期诊断的临床意义。方法:回顾性分析2021年10月—2022年06月期间在我院内分泌科住院的2型糖尿病(T2DM)患者90例。依据尿微量白蛋白与肌酐比值(ACR)分为:正常白蛋白尿组、微量白蛋白尿组、大量白蛋白尿组,各30例;同期随机抽取30例健康体检者作为对照组。收集患者一般资料与常规检测指标,分析HbA1c、Betatrophin与上述指标相关性,运用Logistic回归和ROC曲线分析HbA1c、Betatrophin联合检测在DKD诊断中的应用价值。结果:四组性别、BMI、TC、LDL-C水平差异无统计学意义(P>0.05);年龄、FBG、Scr、TG、mALb、UACR、HbAlc、Betatrophin为DKD2>DKD1>DKD0>NC(P<0.05);eGFR、HDL-C为NC>DKD0>DKD1>DKD2(P<0.05);2型糖尿病肾脏病患者血清中Betatrophin表达水平与年龄、UREA、Scr、mAlb、UACR呈正相关关系,与eGFR呈负相关关系,HbA1c表达与FBG、TC呈正相关关系,与Scr、eGFR呈负相关(P<0.05);患者年龄、FBG、TG、UREA、Scr、UACR、HbAlc、Betatrophin水平升高是2型DKD发生的危险因素,HDL-C、eGFR是2型糖尿病肾脏病发生的保护因素(P<0.05);HbA1c、Betatrophin联合检测的敏感性和特异性较单一检测高,HbA1c、Betatrophin及联合检测曲线下面积分别为0.713、0.860、0.887。结论:HbA1c、Betatrophin表达水平与早期DKD发生、发展密切相关,可作为早期DKD诊断的重要生物学指标,两者联合检测可提高早期糖尿病肾脏病的诊断效能。

苦参碱对TIM2转基因小鼠肝癌细胞的作用研究

目的:观察苦参碱对TIM2转基因修饰小鼠H22肝癌细胞瘤苗的体内作用。方法:构建小鼠TIM2基因真核表达载体并用以转染H22细胞,经体外稳定筛选后获得TIM2转基因H22肝癌细胞全细胞瘤苗(H22-TIM2),用以建立小鼠肝癌移植瘤模型,观察该瘤苗在小鼠体内的成瘤性和免疫原性;加用药物苦参碱(matrine,M)治疗后,观察苦参碱对其体内抗癌活性的影响。结果:筛选得到的TIM2转基因H22肝癌细胞瘤苗有TIM2 mR-NA及EGFP的稳定表达,此瘤苗接种后,在小鼠体内的成瘤率为41%,远低于H22对照组和H22-EGFP空载体组(H22-EGFP)(后两者成瘤率在92%以上),对小鼠肿瘤的抑制率为69.2%,明显高于苦参碱治疗组(67.5%)和其他各组。同时苦参碱可进一步增强H22-TIM2瘤苗的肿瘤抑制率。H22-TIM2组小鼠的脾指数,CD4+T细胞亚群和CD4/CD8较其他实验组明显增高。结论:TIM2基因修饰H22细胞瘤苗可显著降低H22肝癌细胞在小鼠体内的致瘤性,在体内具有一定的免疫原性,苦参碱可明显改善其体内抗癌活性,为进一步研究TIM2基因在肿瘤免疫中的作用及苦参碱的抗癌机制奠定了基础。

苦参碱对小鼠H22肝癌细胞凋亡作用的实验研究

目的:研究中药苦参碱在体内外对小鼠H22肝癌细胞的诱导凋亡作用,探讨其可能的抗肿瘤作用机制。方法:An-nexinⅤ-FITC/PI双标记法检测苦参碱对H22细胞的早期促凋亡作用;免疫组织化学法检测苦参碱作用后H22细胞内Bc l-2、Bax两种凋亡相关蛋白的表达。建立H22肝癌移植瘤小鼠模型,观察苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤生长情况的影响及肿瘤抑制率;电镜观察荷瘤小鼠肿瘤组织的超微结构改变;免疫组化方法检测小鼠肿瘤组织内Bc l-2、Bax的表达情况。结果:AnnexinⅤ法检测到1.0 mg/mL和1.5 mg/mL苦参碱作用48 h后H22细胞有早期凋亡改变,凋亡细胞百分率分别为11.71%和17.86%,与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05)。苦参碱对荷瘤小鼠肿瘤的抑制率达60%以上;免疫组化显示,苦参碱作用后H22细胞内及小鼠肿瘤组织内Bc l-2蛋白的表达水平下降,Bax蛋白表达增强。电镜证实苦参碱治疗后荷瘤小鼠肿瘤组织内有凋亡细胞和凋亡小体的存在。结论:苦参碱在体内体外都对小鼠H22肝癌细胞表现出较强的抗肿瘤作用和诱导凋亡作用,促凋亡作用与其上调细胞内Bax表达,抑制Bc l-2表达有关。

苦参碱抗肿瘤作用及其机制的初步研究

目的:研究中药苦参碱(Matrine)的抗肿瘤作用及其免疫学机制。方法:MTT比色法检测肿瘤细胞的生长抑制率;流式细胞术分析细胞周期的改变。建立荷瘤小鼠模型,观察小鼠肿瘤的生长情况,计算肿瘤生长抑制率;MTT法测定苦参碱对荷瘤小鼠PBMC体外增殖作用的影响;ELISA法检测苦参碱治疗后小鼠血清中IL-2和IL-12的活性。结果:苦参碱可显著抑制小鼠肿瘤细胞的体外分裂和增殖,且抑制作用呈浓度和时间依赖性,使G1期细胞增多,S期和G2/M期细胞减少,细胞增殖指数降低。苦参碱对小鼠实体瘤生长具有显著抑制作用,抑瘤率高达60.7%以上;明显抑制小鼠静止PBMC的体外增殖作用;不能提高荷瘤小鼠血清中IL-2和IL-12的含量。结论:苦参碱具有较强的抗肿瘤作用,体内体外却表现出一定的免疫抑制作用,提高机体的免疫功能不是苦参碱发挥抗癌活性的主要机制。

苦参碱对小鼠H_(22)细胞抗肿瘤作用的实验研究

目的:观察苦参碱在体内和体外的抗肿瘤作用。方法:MTT法检测苦参碱对小鼠腹水瘤细胞H2 2 的体外杀伤作用;AnnexinV -FITC/PI双标记法检测苦参碱对体外培养的H2 2 细胞的诱导凋亡作用;在BALB/C小鼠H2 2 移植瘤模型上观察苦参碱的体内抑瘤活性,透射电镜观察苦参碱治疗后荷瘤小鼠肝癌细胞的超微结构改变;免疫组化法检测荷瘤小鼠肝癌组织中Bcl- 2、Bax蛋白表达。结果:苦参碱在体外能够明显抑制H2 2 细胞的生长和增殖,并可诱导细胞凋亡;对小鼠肿瘤生长也有明显抑制作用,高、低浓度组抑瘤率分别为6 0 .71%和6 2 .5 3% ;用药组小鼠肿瘤组织中,电镜下可见较为典型的细胞凋亡的形态学改变;肿瘤组织中Bcl- 2蛋白表达明显降低,Bax蛋白表达增强,与荷瘤对照组相比有显著性差异(P <0 .0 1)。结论:苦参碱在体内外对H2 2 肿瘤细胞生长均有抑制作用,同时可促进肿瘤细胞表达Bax蛋白,抑制Bcl- 2表达,诱导肿瘤细胞凋亡。

苦参碱对白血病细胞NKG2D配体表达的作用研究

本研究旨在探讨人白血病细胞表面NK细胞活化性受体NKG2D配体分子的表达水平及中药苦参碱对白血病细胞NKG2D配体表达的作用。流式细胞术检测白血病细胞表面MICA/B和ULBP1、2、3四种NKG2D配体的表达。苦参碱处理白血病细胞株K562、OUN-1、U937和K562/AO2及原代培养的人白血病细胞,流式细胞术分析药物处理后细胞表面NKG2D配体的表达改变。结果表明,几株常见人白血病细胞及原代人白血病细胞表面均有NKG2D配体分子的表达,多数有ULBP分子的高表达或ULBP表达明显高于MICA/B,但不同细胞表面NKG2D配体的表达模式明显不同。苦参碱处理可上调白血病细胞表面部分NKG2D配体的表达水平,提示苦参碱对不同白血病细胞NKG2D配体分子的表达调节不同。K562细胞表面NKG2D配体ULBP2和ULBP3分子的高表达可能是介导NK细胞对其高杀伤性的重要原因。结论:人白血病细胞及原代人白血病细胞表面均有NKG2D配体的表达,但不同细胞NKG2D配体的表达模式不同。苦参碱可上调白血病细胞表面部分NKG2D配体分子的表达。

苦参对急性白血病患者sICAM-1和sVCAM-1水平的影响

目的探讨苦参对急性白血病患者可溶性细胞间黏附分子-1(sICAM-1)和可溶性血管细胞黏附分子-1(sVCAM-1)水平的影响。方法选取2013年3月至2015年3月该院收治的急性白血病患者60例,按照治疗方式的不同将患者分为常规化疗组和苦参治疗组,每组各30例。常规化疗组患者给予常规化疗方案实施治疗,苦参治疗组患者在常规化疗基础上加用苦参治疗。另选取同期该院健康体检者60例作为健康对照组。采用酶联免疫吸附试验(ELISA)分析急性白血病患者治疗前后和健康体检者血清sICAM-1、sVCAM-1水平。结果急性白血病患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平在治疗前及治疗后均明显高于健康对照组,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。常规化疗组及苦参治疗组,治疗后患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平均有下降,苦参治疗组sICAM-1、sVCAM-1的水平下降程度较常规化疗组更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。苦参治疗组治疗有效率为90.00%,高于常规化疗组的67.67%,差异有统计学意义(P<0.05)。结论苦参可明显降低急性白血病患者血清sICAM-1、sVCAM-1水平,改善常规化疗药物疗效,促进患者康复。

小鼠TIM2基因真核表达载体的构建及鉴定

目的:构建真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠肝癌细胞系H22中进行表达。方法:用RT-PCR法扩增得到TIM2基因,构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并进行BamHI及BglⅡ双酶切鉴定和测序。通过脂质体法转染H22细胞,用RT-PCR法检测H22细胞中TIM2mRNA的表达。结果:构建了真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,用脂质体法转染H22细胞后,用荧光显微镜观察和RT-PCR法检测,可见细胞内有EGFP及TIM2mRNA的表达。结论:成功地构建重组真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,并在小鼠H22细胞中表达,为进一步研究TIM2在肿瘤生物治疗中的应用奠定了基础。

三阴性乳腺癌中COX-2、NF-κB及VEGF表达的临床研究

目的研究环氧酶(COX-2)、核因子-κB(NF-κB)及血管内皮生长因子(VEGF)在三阴性乳腺癌中的表达及临床意义。方法选取2010年1月至2014年12月于该院进行乳腺癌治疗的100例患者为研究对象,其中三阴性乳腺癌50例,非三阴性乳腺癌50例,采用免疫组织化学法检测100例患者乳腺癌组织中COX-2、NF-κB及VEGF的表达,并应用D2-40标记检测淋巴管浸润和淋巴管密度,对相关的临床病理资料进行统计分析。结果 COX-2在三阴性与非三阴性乳腺癌中的表达分别为76%、70%,差异无统计学意义(P>0.05),VEGF在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为60%和36%,差异有统计意义(P<0.05)。NF-κB在三阴性乳腺癌病变和非三阴性乳腺癌病变中阳性表达率分别为66%和32%,差异有统计意义(P<0.05)。三阴性乳腺癌组织中乳腺癌中NF-κB与VEGF,COX-2与VEGF表达呈正相关。结论放化疗是三阴性乳腺癌术后治疗的主要手段,而抑制NF-κB、VEGF和COX-2的表达有望成为治疗三阴性乳腺癌的新靶点,值得研究探索。

非小细胞肺癌中CAR和CD46的表达及临床意义

目的研究柯萨奇-腺病毒受体(Coxsackie and adenovirus receptor,CAR)及B组腺病毒受体CD46分子在人非小细胞肺癌(Non-small cell lung carcinoma,NSCLC)组织中的表达水平及临床意义。方法免疫组织化学方法检测144例NSCLC组织中CAR、CD46的表达,对两者的表达水平与腺病毒的转染效率以及肺癌发生、发展之间的关系进行分析。结果 144例NSCLC组织中,CAR在肺鳞癌和肺腺癌中CAR的阳性表达率分别为77.5%(31/40)和36.8%(14/38);CD46则分别为58.3%(14/24)和88.1%(37/42);不同病理类型NSCLC组织中,CAR和CD46的表达模式明显不同(P<0.05)。此外,CAR表达与NSCLC临床TNM分期密切相关。30例TNMⅠ期患者中,13例CAR表达阳性(43.3%),48例Ⅱ～Ⅲ期患者中,32例CAR表达阳性(66.7%),Ⅱ～Ⅲ期患者的CAR阳性表达率明显高于Ⅰ期患者(P<0.05)。结论 CAR及CD46在NSCLC中的表达水平明显不同,鳞癌普遍高表达CAR,腺癌则有CD46的高表达,提示依赖不同受体的腺病毒对NSCLC的基因转移效率也有所不同;CAR表达水平可能是判断NSCLC预后的有用指标。

STAT3基因沉默抑制人白血病细胞体外生长的实验研究

目的:构建人STAT3 shRNA(short hairpin RNA)慢病毒载体,研究慢病毒介导的STAT3 SiRNA(small interferenceRNA)对人慢性粒细胞白血病K562细胞体外生长特性的影响。方法:针对STAT3基因RNAi有效靶点构建STAT3 shRNA慢病毒载体,293T细胞内包装产生STAT3 SiRNA慢病毒,感染K562细胞后RT-PCR和Western-blot方法验证STAT3基因的敲减效率;细胞生长曲线和MTT法观察STAT3敲减后K562细胞体外生长和增殖情况;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI法检测细胞周期改变和早期凋亡。结果:成功得到STAT3 SiRNA慢病毒,RT-PCR和Western-blot实验证实,针对其中两个靶点的STAT3 SiRNA对STAT3基因的敲减效率均在70%以上(P<0.05)。STAT3敲减后,K562细胞生长变慢,细胞增殖活性降低40%(P<0.05);细胞阻滞于G1→S期,并出现早期凋亡。结论:STAT3 SiRNA慢病毒可有效抑制K562细胞内STAT3基因表达,使细胞生长增殖受抑,细胞周期阻滞,细胞出现早期凋亡。

受体依赖性TRAIL重组腺病毒对人肺癌细胞凋亡的诱导作用

目的:观察重组TRAIL腺病毒(Ad5-TRAIL及Ad5F35-TRAIL)对人非小细胞肺癌(nonsmall-cell lung cancer,NSCLC)原代培养细胞和细胞株的凋亡诱导作用,探讨两种Ad-TRAIL用于肺癌基因治疗的价值。方法:采用流式细胞术检测人肺癌细胞系A549、Z793、QG56和NCI-H520及10例原代培养肺癌细胞中CAR和CD46的表达水平;分别以Ad5-TRAIL及Ad5F35-TRAIL重组腺病毒按MOI 10和50感染上述细胞,48 h后Annexin V-FITC双标法流式细胞术检测细胞的早期凋亡。结果:A549、Z793、QG56和NCI-H520 4株肺癌细胞中,CD46的表达均明显高于CAR表达。Z793、QG56细胞对Ad5-TRAIL和Ad5F35-TRAIL的作用较敏感,MOI=10感染后凋亡率分别为(11.76±2.10)%、(15.96±2.89)%和(6.05±1.58)%、(10.11±1.26)%,显著高于对照组[(2.33±0.37)%和(5.95±1.89)%,P<0.05];MOI=50感染时NCI-H520细胞凋亡率分别为(12.89±3.2)%和(9.08±1.35)%,与对照组(7.04±2.17)%相比差异无统计学意义(P>0.05);Ad5-TRAIL和Ad5F35-TRAIL均不能诱导A549细胞凋亡。10例原代肺癌细胞CD46表达也明显较CAR高;Ad5-TRAIL或Ad5F35-TRAIL感染后,5例的原代肺癌细胞检测到凋亡;与Ad5-TRAIL相比,Ad5F35-TRAIL诱导的凋亡率更高。结论:两种TRAIL重组腺病毒对非小细胞肺癌细胞均有凋亡诱导作用,Ad5F35-TRAIL的作用强于Ad5-TRAIL,更适合于非小细胞肺癌的基因治疗。

TIM2转基因细胞瘤苗对小鼠作用的初步研究

目的观察小鼠TIM2转基因H22肝癌细胞瘤苗在小鼠体内的成瘤作用,初步研究其免疫原性。方法构建TIM2基因真核表达载体pIRES2-EGFP-TIM2,脂质体法转染H22细胞,制备得到TIM2基因修饰的H22细胞瘤苗,建立小鼠肝癌移植瘤模型,观察其在小鼠体内的成瘤作用。结果成功得到TIM2基因修饰的H22细胞瘤苗,免疫接种小鼠后,可明显抑制小鼠体内肿瘤的发生和发展;给予H22-TIM2接种的小鼠CD4亚群、CD4/CD8比值显著高于H22-EGFP细胞接种组、荷瘤对照组和正常对照组。结论TIM2基因修饰H22细胞后,可显著降低H22细胞的体内成瘤性,抑制小鼠肿瘤生长,同时。在体内具有一定的免疫原性,为进一步探讨TIM2在肿瘤生物治疗中的作用提供了初步的实验依据。

NKG2D在细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)抗血液肿瘤细胞的作用

本研究探讨细胞因子诱导的杀伤性细胞(CIK)通过NKG2D受体和配体相互作用杀伤血液肿瘤细胞的机制。用含有rhIL-2,抗CD3抗体,IFN-γ的培养液培养健康人的外周血单个核细胞(PBMNC)2周后,用流式细胞仪分析CIK细胞的细胞亚群以及细胞表面NK细胞受体,同时检测血液肿瘤细胞株表面NKG2D配体的表达水平。CAM标记靶细胞,用流式细胞仪检测CIK细胞对血液肿瘤细胞的杀伤作用。结果表明,大部分CIK细胞为CD3+细胞(97.85±1.95%),CD3+CD8+细胞和CD3+CD56+细胞的比率较培养前明显升高(P<0.001;P=0.033);约86%的CIK细胞表达NKG2D受体,几乎不表达CD158a,CD158b和NCR受体;血液肿瘤细胞株U266、K562和Daudi均表达一定水平的NKG2D配体,CIK细胞对这3种血液肿瘤细胞株均具有较高的杀伤作用,这种杀伤作用可以被抗NKG2D抗体部分抑制(U266 52.67±4.63%vs 32.67±4.81%,P=0.008;K562 71.67±4.91%vs 50.33±4.91%,P=0.007;Daudi 68.67±5.04 vs 52.67±2.60%,P=0.024)。结论:大多数的CIK细胞表达NKG2D受体,NKG2D受体和配体的相互作用可能是CIK细胞杀伤血液肿瘤细胞的作用机制之一。

直接免疫荧光法病毒抗原测定在呼吸道感染性疾病诊断中的应用

目的采用直接免疫荧光法检测呼吸道病毒抗原,为临床呼吸道病毒感染的早期诊断提供病原学依据。方法选择呼吸道感染患者762例,采集鼻咽深部分泌物,用直接免疫荧光法检测呼吸道合胞病毒(RSV)、腺病毒(ADV)、流感病毒A型(InfA)、流感病毒B型(InfB)以及副流感病毒1、2、3型(PIV1、2、3)7种呼吸道常见病毒抗原。结果在762例呼吸道感染患者(儿童724例、成人38例)中,呼吸道病毒抗原阳性者264例(儿童261例、成人3例),阳性检出率为34.65%;其中RSV 186例(70.45%)、PIV3 29例(10.98%)、InfA 20例(7.58%)、ADV 13例(4.92%)、PIV1 4例(1.52%)、PIV2 2例(0.76%)、InfB 2例(0.76%)、混合型8例(3.03%)。结论直接免疫荧光法病毒抗原测定可以用于呼吸道病毒感染的早期诊断。

复发性口腔溃疡患者血清中TNF-α、IL-2及T淋巴细胞亚群的变化

目的探讨复发性口腔溃疡患者血清中血清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-2(IL-2)及T淋巴细胞亚群的变化。方法选择我院2014年5月至2015年10月间治疗的100例复发性口腔溃疡患者纳入观察组,并选择同期100例健康体检者纳入对照组,比较两组受检者血清TNF-α、IL-2水平及T淋巴细胞亚群水平(包括CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+)的差异。结果观察组患者的血清TNF-α、IL-2水平分别为(15.58±3.76)pg/m L、(36.84±5.89)pg/m L,均明显高于对照组的(11.16±3.54)pg/m L、(22.87±5.27)pg/m L,差异均有统计学意义(P<0.05);观察组患者的血清CD3^+、CD4^+及CD4^+/CD8^+分别为(67.29±8.25)%、(31.58±5.76)%、(1.17±0.29),均明显低于对照组的(71.26±6.91)%、(35.16±5.54)%、(1.26±0.26),差异有统计学意义(P<0.05);两组受检者的CD8^+水平比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论复发性口腔溃疡的发病与细胞免疫功能紊乱有关,通过测定患者血清TNF-α、IL-2含量可反映患者免疫功能状态,有利于患者预后的判断。

冠心病患者血浆periostin蛋白与血管内皮生长因子的相关性

目的测定冠心病患者血浆periostin蛋白和血管内皮生长因子水平,分析periostin蛋白与血管内皮生长因子之间的关系并探讨其临床意义。方法采用酶联免疫吸附法测定180例冠心病患者(其中急性心肌梗死患者58例,陈旧性心肌梗死患者30例,不稳定型心绞痛患者40例,稳定型心绞痛患者52例)和52例健康体检者血浆periostin和血管内皮生长因子水平,比较各组间的差异有无统计学意义。结果急性心肌梗死组、陈旧性心肌梗死组、不稳定型心绞痛组和稳定型心绞痛组血浆periostin蛋白及血管内皮生长因子水平显著高于对照组。在不同类型冠心病患者中,血浆periostin蛋白水平除在陈旧性心肌梗死组与稳定型心绞痛组之间以及不稳定型心绞痛组与陈旧性心肌梗死组之间比较差异无无显著性外,其余各组之间两两比较均有统计学差异(P<0.05或P<0.01),且在急性心肌梗死组>不稳定型心绞痛组>陈旧性心肌梗死组>稳定型心绞痛组;在不同类型冠心病患者中,血浆血管内皮生长因子水平在各组之间两两比较均具有统计学差异(P<0.05或P<0.01),且在急性心肌梗死组>不稳定型心绞痛组>陈旧性心肌梗死组>稳定型心绞痛组。冠心病患者血浆periostin水平与血管内皮生长因子水平呈显著正相关(r=0.593,P<0.01)。结论血浆periostin蛋白与冠心病有密切关系,periostin蛋白水平增高可能是冠心病发病危险的一个生物指标。冠心病患者血浆periostin与血管内皮生长因子呈正相关,periostin很有可能通过血管生长调节等途径导致粥样硬化斑块的生长及不稳定性进而参与冠心病的发生与发展。

苦参碱抑制慢性粒细胞白血病K562细胞生长和诱导凋亡作用研究

目的研究苦参碱在体外对人慢性粒细胞白血病(慢粒)K562细胞的生长抑制作用并探讨可能的分子机制。方法光学显微镜下观察苦参碱作用前后K562细胞的形态学改变;联苯胺染色观测K562细胞的红系分化趋势;MTT法检测苦参碱对K562细胞的增殖抑制效应;流式细胞术和Annexin V-FITC/PI双标记法检测苦参碱对K562细胞的周期改变及早期凋亡作用。结果与阴性对照组相比,0.05,0.1和0.2 g/L苦参碱作用下的K562细胞均出现红系分化趋势,其中0.05 g/L的分化趋势最明显;MTT结果显示0.2,0.5及1.0 g/L苦参碱对K562细胞的生长抑制率分别为25.88%,46.96%和63.04%(P均<0.01),其中效作用浓度(IC50)为0.6 g/L;苦参碱可使K562细胞周期阻滞于S期,阻止细胞的有丝分裂,同时可诱导K562细胞凋亡:0.05,0.1和0.2 g/L苦参碱对K562细胞的早期凋亡率分别是11.60%,69.81%和44.12%,明显高于对照细胞的自发凋亡率(1.49%)(P均<0.01)。结论苦参碱对体外培养的人慢粒K562细胞具有显著抑制增殖作用,且可诱导细胞向红系分化和早期凋亡。

三氧化二砷诱导A549细胞凋亡及对survivin、cyclin D1表达的影响

目的:了解三氧化二砷对肺腺癌A549细胞株细胞增殖、细胞凋亡以及survivin、cylin D1基因表达的影响。方法:分别以不同浓度的三氧化二砷作用于A549细胞,作用不同时间对细胞增殖活性、细胞凋亡及细胞survivin、cylin D1基因表达的变化进行检测。结果:稍高浓度(>2μmol/L)的三氧化二砷可抑制A549细胞增殖,并有剂量和时间依赖性。逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)检测survivin、cylin D1基因转录水平和细胞爬片免疫组化检测survivin、cyclin D1基因蛋白表达的相对强度,发现三氧化二砷作用组survivin和cyclin D1基因的表达与对照组相比明显减低(P<0.01)。结论:三氧化二砷可有效抑制A549细胞增殖,诱导A549细胞凋亡,与作用剂量和作用时间呈正相关,这一过程可能与三氧化二砷抑制survivin、cyclin D1表达有关。

支原体快速培养诊断儿童肺炎支原体感染的临床研究

目的:探讨肺炎支原体(Mycoplasma pneumoniae,MP)快速培养法在诊断儿童MP感染中的临床价值,并分析其影响因素。方法:MP快速培养鉴定患儿咽试子标本,被动凝集法检测血清MP抗体(MP-Ab),分析MP感染的相关临床因素。结果:MP快速培养与MP-Ab检测诊断MP感染的阳性率基本一致,差异无统计学意义(P=0.556)。女性儿童MP培养的阳性率(46.26%)略高于男性(42.16%)。3～5岁幼儿的MP培养阳性率(54.05%)明显高于其他各组(P<0.001)。冬、春季MP培养阳性率分别为48.05%和49.03%,显著高于夏秋两季(26.26%和36.97%,P<0.001)。MP感染患儿体温增高、咳嗽、咳痰等症状与MP培养结果无明显相关性,血液常规分析中性粒细胞比值显著上升,与其他呼吸道感染相似,尚不能作为诊断MP感染的独立指证。结论:MP感染冬春易发,儿童易感。MP感染缺乏特异的临床症状和体征,MP快速培养对早期快速诊断儿童MP感染具有重要临床价值和意义。