超声波法提取马鞭草黄酮条件的优化及其抗菌活性研究

采用超声波法提取马鞭草(Verbena officinalis)中总黄酮,设计单因素试验和正交试验考察超声波功率、乙醇体积分数、超声波处理时间和料液比对总黄酮提取效果的影响,优化提取工艺条件。并采用纸片琼脂扩散法考察马鞭草提取物对几种微生物的抑制作用。结果表明,优化的马鞭草总黄酮提取条件为乙醇体积分数60%、超声波功率350W、超声波处理时间50min、料液比m马鞭草∶V乙醇=1∶30(g/mL)。抑菌试验表明,马鞭草黄酮类化合物对大肠杆菌(Escherichia coli)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)、枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)、白假丝酵母(Candida spp.)、青霉(Penicillium citrimum)、黑曲霉(Aspergillusniger)均有一定的抑制作用。

新医科背景下“医学微生物学”课程教学改革

为探索新医科背景下医学人才培养新模式,“医学微生物学”课程教学改革秉持以学生为中心的教学理念,积极采用信息技术发展所提供的信息化平台,采取线上、线下相结合的教学方式,在教学内容上与临床案例、学科交叉点及科研进展相结合,在考核方式上注重对学生能力的考查。通过一系列改革,增强了学生将所学知识融会贯通解决实际问题的能力,提高了学生的科学素养和创新意识,培养了学生的人文主义精神,获得了学生的肯定,为培养新型复合型、创新型人才打下坚实的基础。

猕猴桃-芦荟酸奶的研制

以猕猴桃汁、芦荟汁、鲜牛乳为主要原料,通过乳酸菌发酵,制得保健饮品发酵猕猴桃-芦荟酸奶。通过正交法确定了发酵工艺参数,筛选出优化组合。实验结果表明,鲜牛奶中加入10%猕猴桃汁、7%芦荟汁、8%白砂糖,3%发酵剂,41℃条件下发酵4h,制得的发酵奶色香味甚佳。

野生蓝莓汁乳酸菌饮料的研究

通过采用四因素三水平的正交试验,对野生蓝莓汁乳酸菌饮料的最佳工艺配方进行研究。结果表明:蓝莓汁8%、白砂糖9%、发酵乳25%、乳化稳定剂0.30%,42℃发酵4h。菌种比1∶1,接种量2.5%,VC含量高达25g/L。

甲病灶中病原真菌的分离与鉴定

目的通过系统分类鉴定确定甲病致病真菌的分类地位。方法从甲病患者的病灶中分离、纯化致病菌,并对其基本形态学特征及菌体可溶性蛋白电泳进行了初步的比较研究从而确定其分类地位。结果经分离、纯化获得4株丝状真菌,分别命名为菌株Fh2、Fh3、Fh5和W3,依形态学特征均符合丛梗孢科(Moniliaceae)。菌株Fh5属于曲霉属(Aspergillus Link),Fh3和W3具有相同的可溶性蛋白电泳条带,Fh2和Fh3其可溶性蛋白电泳条带不同。结论菌株Fh2、Fh3、Fh5和W3同属半知菌类(Fungi Imperfec-tI)、丝孢纲(Hyphomycetes)、丝孢目(Hyphomycetables)、丛梗孢科(Moniliaceae)。菌株Fh5属于曲霉属(Aspergillus Link)的黄曲霉群;菌株Fh2、Fh3和W3为头孢霉属(Cephalosporium Corda),其中Fh3和W3鉴定为顶头孢霉(Cephalosporium acremonium),Fh2为其变种(Cephalosporium acremonium var.)。

提取致病丝状真菌的DNA的简便方法

目的找到一种合适简便的致病丝状真菌的DNA提取方法。方法 用3种DNA提取方法分别提取2种致病的丝状真菌的DNA,比较提取的DNA的产物质量和纯度,找出简便合适的方法。结果改进的氯化苄法提取的2种真菌的DNA的质量在3种方法中都是最高的,分别达到2.925mg/mL和2.763mg/mL,改进的氯化苄法提取的DNA没有降解,质量和产量较高,纯度也是较好的。提取产物可适用于各种分子生物学实验。结论 改进的氯化苄法是一种适用于致病丝状真菌DNA提取的简便方法。

L-乳酸细菌培养条件的优化

实验通过对L-乳酸细菌(LactobacilluscaseiFH-2)菌体生长、产酸速率、耐酸水平、高糖发酵性能的优化,实现了优化该菌生长和条件的目的。并对培养基中不同辅料的添加进行了研究。结果证明:共同加入麦根一麸皮浸泡液时,可以提高乳酸的产量,其最佳方案为50℃、4h、1%麸皮浸泡液和2%麦根。乳酸产量为40.5gL。结论:实验通过优化L-乳酸细菌的发酵条件提高了乳酸的产量。

海洋微生物活性产物及研究方法

海洋多变复杂的环境导致了海洋微生物的多样性。近年来,在对海洋微生物的研究中发现了许多独特的生物活性物质。通过对这些生物活性物质的提取、药理研究,为新药的开发和各种疑难疾病的治愈提供了新的希望。就海洋微生物活性物质的几种重要生物活性,如抗肿瘤、抗菌、酶及酶抑制剂活性分别进行概述,同时概括了海洋微生物活性物质的研究方法以及存在的问题。

L-乳酸高产菌株的诱变育种

对L-乳酸细菌(Lactobacillus casei FH2)进行诱变,得到产酸量高的突变株FH2-8-9,并与出发菌株FH2的性能进行比较,结果表明:①FH2-8-9的产酸速率明显高于FH2,且维持时间较长,具有更高的耗糖速率和糖转化率;②突变株FH2-8-9对乳酸的耐受性好,进入对数生长期的时间短,能保持更长的对数生长期,最终菌体浓度高于出发菌株FH2,FH2-8-9的菌体密度比FH2高55%。

DDT降解菌DH-7的分离鉴定与降解特性研究

[目的]研究DDT降解菌的生物学、降解特性及其发酵条件的优化。[方法]从化工厂采集土样,分离、筛选到1株能够在好氧条件下DDT降解率较高的菌株DH-7,并对其进行研究。[结果]通过16S rDNA序列分析结合传统分类学方法初步确定菌株DH-7为铜绿假单胞菌。对菌体降解DDT特性的研究表明,该菌株对DDT降解10 d的降解率为73.6%。在优化培养条件后,该菌株10 d的降解率达81.4%。[结论]该研究结果为DDT污染土壤的生物修复提供依据。

纤溶酶液的脱色及纯化研究

以活性炭、高岭土以及D290和D392离子交换树脂为脱色介质,应用硫酸铵分级盐析以及超滤脱盐的方法,对纤溶酶液进行脱色及纯化。结果表明,D290强碱性阴离子交换树脂脱色效果优于D392弱碱性阴离子交换树脂,活性炭及高龄土不能对粗纤溶酶液脱色。70%饱和度的硫酸铵,工作压力0．11MPa,超滤脱盐纯化倍数达到12．37,冻干酶粉的比活力为638．9U/mg,回收率为73．37%。

L-山梨糖流加发酵高效生产2-酮基-L-古龙酸

实验充分利用混合菌系氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacter oxydans)和蜡状芽孢杆菌(Bacillus cereus)混合发酵的优良特性,通过在发酵过程中间歇流加L-山梨糖的方法,实现了在自动控制温度、pH和溶氧的条件下,高效发酵L-山梨糖生成2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的目的。结果表明:当将L-山梨糖的终浓度调高到14%(w/v)时,2-KLG产量为130mg/mL左右,转化率达90%,发酵周期40-60h之间。结论:发酵过程中间歇流加L-山梨糖可以解除高浓度糖对产酸的抑制作用,提高了糖的转化率,但是发酵周期略有延长。

L-乳酸细菌培养条件的研究

对突变株干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)FH2-8-9菌体培养条件、液体培养基成分进行了研究。结果证明,发酵过程中pH的调节及H+和游离乳酸的添加可以促进菌体生长,并提高了L-乳酸的产量;培养基中添加乳糖和果糖、酵母膏和蛋白胨、CaCO3对菌体生长和产酸均有重要影响;调节葡萄糖与丙酮酸钠的比例为9∶3,并在发酵42h时添加丙酮酸钠,L-乳酸产量可达75g/L。

纤溶菌固态发酵条件及溶栓作用的研究

分离出一株能产纤溶酶的芽孢杆菌菌株,以大豆为原料对其产纤溶酶的固态发酵工艺进行研究,对发酵产物进行了提取。结果表明,最适培养基组成为面粉∶大豆(W/W)=1∶8,培养基加水量为0.75 mL/g物料,初始pH自然;接种量为2 mL/100 g物料,培养基厚度为18 g/250 mL三角瓶,培养时间为60 h,温度37℃。优化条件下的固体发酵纤溶酶产量平均达580.52 U(尿激酶单位)/g物料。

阿维菌素B_(1a)组分高产菌株的诱变育种

目的了解阿维菌素产生菌S.avermitilis的生长特性,提高产生菌B1a组份的产量。方法采用紫外线(UV)、诱变剂氯化锂(LiCl),亚硝基胍(NTG)并结合甲硫氨酸(Met)诱导等手段对出发菌株S.avermitilisH0065进行诱变处理,初筛、复筛。结果筛选获得总效价达到4524.3μg/ml的高产阿维菌突变株N-3-133,其中B组分含量显著提高且高达85.3%,B1a也显著提高达到2533.6μg/ml。结论采用紫外线及亚硝基胍诱变方法,结合甲硫氨酸诱导筛选,与出发菌株相比可以获得阿维菌素总效价及B1a组分显著提高的菌株。

Avermectin B_(1a)高效突变株的选育及发酵条件的优化

目的筛选获得Avermectins B1a高效突变菌株。方法通过离子注入诱变、紫外线与氯化锂复合诱变法处理阿维链霉菌出发菌株N-5-9。获得高效突变株,再对其进行发酵条件的优化,寻找最适发酵培养条件。结果筛选获得Avermectins高效突变菌株A-30-6,总效价达到6988.2μg·ml-1,B1a含量达到79.4%,较出发菌株N-5-9的B1a组提高46.3%。结论利用离子注入诱变、紫外线与氯化锂复合诱变方法,诱变效果显著,再进行发酵条件的优化,获得目的菌株。

基于SPOC模式的“医学微生物学”实验微课设计

伴随信息技术的发展,高等教育改革也进入了新的时代。近年来,虽然基于SPOC(Small Private Online Courses,小规模限制性在线课程)模式的教学改革取得了良好效果,获得广大师生的好评,但是改革的目光主要集中在理论课改革。如若基础医学实验课要进行SPOC模式改革就要根据本校实际情况构建线上资源平台,主要就是拍摄录制实验微课。以获奖的“医学微生物学”实验微课为例,详细讲解实验微课的设计过程,为广大高校教师构建自己的线上资源提供一些参考。

L-山梨糖流加发酵高效生产2-酮基-L-古龙酸

混合菌系氧化葡萄糖酸杆菌(Gluconobacteroxydans)和蜡状芽孢杆菌(Bacilluscereus)能够在长时间内保持较强的代谢活力。在自动控制温度、pH和溶氧的条件下,探索间歇流加L-山梨糖发酵生成2-酮基-L-古龙酸(2-KLG)的新工艺。该工艺即充分利用了混合菌系的优良特性,又可解除糖的高浓度对产酸的抑制作用。通过本实验使L-山梨糖的终浓度达到14%,2-KLG产量为130mg/mL左右,转化率达90%,发酵周期40～60h之间。

R362菌株产黑色素的安全性研究

利用小鼠急性毒性试验、小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验、Ames试验和小鼠精子畸形试验对R362菌株产黑色素的食用安全性进行研究。急性毒性试验表明R362菌株产黑色素LD50为6.2 g/kg bw,为实际无毒级物质;而且毒理学试验检测表明均呈阴性,无致突变性,可以作为天然食用色素使用。

R362菌株产黑色素提取及稳定性研究

通过液体培养R362菌株,提取其产生的黑色素,并研究酸度、温度、光照、碳水化合物、氧化剂、还原剂、金属离子对色素稳定性的影响。结果表明:该色素的最大吸收峰为390nm,在碱性条件下较稳定,在酸性条件下易褪色;热、光、碳水化合物对色素稳定性无影响,色素对H2O2和Na2SO3较敏感;几种常见的金属离子(除Fe3+)对色素色泽无影响。