白蛋白对肾小管上皮细胞增殖的影响

目的探讨蛋白尿检在不同时间点对大鼠近端肾小管上皮细胞增值的影响。方法观察组采用体外培养大鼠近端肾小管上皮细胞(Rat proximal renal tubular epithelial cells,NRK-52E),取生长状态良好,待其接近融合时模拟体内大量蛋白尿环境,给予不同浓度(10、20、30 mg.ml-1)去脂牛血清白蛋白(fat free bovine serum albumin,BSA)刺激,共同孵育6、12、18、24 h;对照组给予同体积无血清培养基共同培养。采用MTT试验检测BSA对体外培养NRK-52E细胞毒作用。结果与对照组比较,白蛋白浓度为10 mg.ml-1时对NRK-52E细胞分别作用6、12、18和24 h后,对细胞增殖程度影响没有差异(P>0.05)。当白蛋白浓度为20 mg.ml-1时,对NRK-52E细胞作用6 h后,细胞增殖程度与对照组比较没有差异(P>0.05),但随着作用时间的延长,细胞增殖低于对照组(P<0.05)。当白蛋白浓度为30 mg.ml-1时,随着作用时间的延长细胞增殖几乎停滞,与对照组比较有统计学差异(P<0.05)。结论白蛋白以时间和剂量依赖方式抑制NRK-52E细胞增殖,并可促进肾小管上皮细胞凋亡。

长期应用环孢素A致大鼠肾脏病变演变过程观察

目的:动态观察和分析大鼠长期应用环孢素A(CsA)导致的肾脏病变的演变过程。方法:SD大鼠随机分为3组:普通饮食对照组,低盐饮食对照组和CsA组,分4个时间点(第4天、第8天、第14天和第28天)观察大鼠一般情况、肾功能和组织学病变演变过程。结果:与低盐饮食组相比,CsA组在第4天出现间质细胞数显著增加,第8天出现体质量增长缓慢和典型的小动脉病变,第14天出现显著的收缩压增高、血肌酐升高、24h尿量增加和尿渗透压下降。这些病变随时间延长持续加重,第28天典型的小管间质病变与低盐饮食对照组差异有统计学意义。所检测的各项指标在普通饮食组和低盐饮食组间差异无统计学意义。结论:大鼠长期应用CsA可导致肾脏出现功能和组织学病变,提示可以通过合适的手段在最佳的时间干预病变的演变过程,从而防止CsA慢性肾毒性的发生。

1982例成人急性腹泻病例病原谱检测分析

目的 了解成人腹泻病流行特征和病原谱分布,为临床制订防控及治疗措施提供科学依据。方法 收集复旦大学附属上海市第五人民医院成人24 h肠道门诊2014年1月1日~2015年12月31日急性腹泻患者粪标本1982份,送上海市闵行区疾病预防控制中心进行细菌培养和病毒检测。结果 1982份粪便标本中,感染任一致病菌282例,感染率为14.23%,其中副溶血性弧菌感染率最高（8.48%）。感染任一病毒160例,感染率为8.07%,其中诺如病毒感染率最高（5.20%）。本研究显示,无论细菌或病毒感染,均呈现比较明显的季节性高峰,夏秋季以细菌性腹泻高发,而病毒性腹泻多出现在冬季。结论 本研究急性腹泻患者中病原谱较广。副溶血性弧菌、非伤寒沙门菌为细菌性腹泻的主要致病性病源菌,诺如病毒、轮状病毒为病毒性腹泻的主要致病性病原病毒,应根据不同病原的流行情况,在不同季节采取具有针对性的预防措施。

家系感染乙型肝炎病毒基因变异与HLA-Ⅱ类等位基因的关系

目的研究家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异特征及与HLA-II类分子基因多态性的关系。方法采用PCR扩增和产物测序检测HBV前C区1896位及BCP区1762/1764位变异,分析家系内慢性HBV感染者121例(实验组)病毒变异特征及与非家系慢性乙肝患者83例(对照组)病毒变异频率差异;用PCR/SSP对家系内慢性HBV感染者的HLA-DQA1和DQB1等位基因多态性进行测定;分析HLA-II类分子基因多态性与家系内慢性乙型肝炎病毒基因变异的关系。结果实验组前C区1896位变异、BCP区1762/1764位双变异及联合变异率均高于对照组;HLA-DQA1*0501和DQB1*0301等位基因频率和家系慢性HBV感染者前C区1896位、BCP区1762/1764位及联合变异有关;母亲为第一代的感染家系中,子女的前C区1896位及BCP区1762/1764位变异与母亲是否有该位点变异差异无显著性。结论家系感染HBV患者中,HBV前C区1896位、BCP区1762/1764位双突变及联合变异频率明显高于无家系感染的慢性乙型肝炎患者;家系内感染HBV前C区1896位、BCP区1762和1764位变异并非都是由上一代遗传或传播而来,而主要是与个体的免疫状况有关。

白蛋白联合低氧对NRK-52E细胞凋亡的影响

目的:探讨白蛋白联合低氧对肾小管上皮细胞(NRK-52E)凋亡的影响。方法:应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在不同质量浓度白蛋白(0、10、20、30和40g/L)和常氧(含体积分数为5%CO2的空气)条件下培养24h的凋亡率,得到最适的白蛋白质量浓度;再应用流式细胞技术检测NRK-52E细胞在30g/L白蛋白和低氧(体积分数为1%O2、5%CO2和94%N2)联合培养24h的凋亡率,同时设常氧对照组、低氧对照组和常氧+30g/L白蛋白培养组。采用RT-PCR检测凋亡相关基因bcl-2和bax mRNA表达。结果:在常氧环境下NRK-52E细胞凋亡率随白蛋白质量浓度的增加而增高(F=55.748,P<0.001)。常氧对照组、低氧对照组和常氧+30g/L白蛋白培养组及低氧+30g/L白蛋白培养组NRK-52E细胞凋亡率(F=112.174,P<0.001)、bax mRNA(F=114.522,P<0.001)和bcl-2 mRNA(F=63.097,P<0.001)的表达差异均有统计学意义。低氧+30g/L白蛋白培养组的凋亡率[(37.36±4.95)%vs(25.59±3.32)%,P<0.05)和bax mRNA的表达(2.54±0.19vs1.87±0.19,P<0.05)高于常氧+30g/L白蛋白培养组,而bcl-2 mRNA的表达则低于常氧+30g/L白蛋白培养组[(0.42±0.08)vs(0.66±0.05)](P<0.05)。结论:低氧可加剧白蛋白诱导的NRK-52E细胞凋亡,其机制可能与促进bax mRNA高表达和bcl-2 mRNA低表达有关。

肝纤维化大鼠肝脏胸腺表达趋化因子和神经趋化蛋白的表达变化

目的:观察趋化因子胸腺表达趋化因子(CCL25)和神经趋化蛋白(CX3CLl)在正常大鼠肝脏组织和肝纤维化大鼠肝脏内的表达变化。方法:研究正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组,每组10例,以ELISA法测定大鼠肝脏组织中CCL25和CX3CL1的含量。结果:CCL25在正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组的含量分别为(5.1±1.4)ng/g、(11.5±3.3)ng/g、(15.2±3.5)ng/g,肝纤维化组的含量显著高于正常肝组。CX3CL1在正常肝组、肝纤维化造模4周组和肝纤维化造模6周组的含量分别为(3.1±1.3)ng/g、(9.9±2.5)ng/g、(10.4±2.7)ng/g,肝纤维化组的含量均显著高于正常肝组(P<0.01)。结论:趋化因子CCL25和CX3CLl在大鼠的正常肝组织中有表达,但表达的数量水平较低。肝脏发生纤维增生性损伤时,肝内CCL25和CX3CL1的含量都显著增加,随着病变由肝纤维化向肝硬化阶段发展,肝内CCL25和CX3CLl的含量呈现出不同变化,CCL25表现为进一步升高,CX3CL1表现为维持在高水平。

浅谈高速公路PPP项目资金来源及财务管理存在的问题

当前我国每年都会在高速公路项目上投入大量资金,高速公路项目本身存在较大财务风险,而高速公路PPP项目的财务风险更是需要予以重点关注。为了能够提高高速公路PPP模式项目的财务管理控制水平,本文尝试分析当前高速公路PPP项目资金来源、账务处理及财务管理方面所存在的问题,并针对性的采取相关措施,为我国高速公路PPP项目的顺利开展提供部分理论和经验,以供参考。

经营柳州灯花品牌的体会

本文主要阐述作者在经营“灯花”品牌的实践中 ,企业如何适应生产经营已进入品牌时代的新形势 ,努力创品牌、提升品牌、开发、储备新产品、工商结合开拓市场、共同求生存求发展的切身体会 ,供参考。

EVA在国有企业业绩评价和员工激励中的运用

目前,国有企业的激励机制还存在一定的局限性,这样就会在一定程度上限制企业的经营与发展。国有企业在经营和发展的过程中怎样对企业经营层进行有效激励,实现股东价值最大化非常关键。本文对EVA在国有企业业绩评价与员工激励中的运用进行了研究分析,旨在提升EVA激励机制在国有企业中的应用效果,促进国有企业的进一步发展。

公路建设中的筹融资渠道以及融资风险防范

本文对公路建设中主要的筹融资渠道进行概述,从债券及信贷融资导致负债增加、PPP模式筹融资带来经营风险这两个方面入手,并对公路建设筹融资带来的风险进行解析,并提出公路建设筹融资风险防范策略。

CAD在云纹图案设计中的运用

本文主要阐述运用Anseries系列软件有序进行云纹图案的设计与处理的实践及如何取得成功的技巧

血红素加氧酶1对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的探讨血红素加氧酶1（HO-1）对白蛋白诱导肾小管上皮细胞凋亡的影响及其可能机制。方法体外培养大鼠肾小管上皮细胞（NRK．52E）为正常对照。白蛋白对照组加去脂的小牛血清白蛋白（BSA）30g／L共同培养。干预组先加钻卟啉（Cobalt protoporphyrin IX，CoPP，血红素加氧酶1诱导剂）5μmol／L，0．5h后再加入BSA30g／L，作用24h。四甲基偶氮唑盐（MTT）比色法检测CoPP对BSA抑制NRK-52E细胞增殖的影响。细胞免疫荧光染色检测细胞凋亡率。RT—PCR法检测凋亡相关蛋白Bcl-2、BaxmRNA表达情况。结果与正常对照组比较，BSA对细胞增殖具有抑制作用并诱导细胞凋亡，差异有统计学意义（P〈0．05），而CoPP对BSA引起的细胞毒性作用具有保护作用（P〈0．05）；BSA对照组HO-lmRNA表达增加（0．44±0．06比0．39±0．05，P〈0．05），差异有统计学意义（P〈0．05）。CoPP预处理后，HO-1mRNA表达（0．50±0．06）较BSA对照组增加（P〈0．05）。BSA可上调BaxmRNA表达（0.87±0．04比0．67±0．03，P〈0．05）及下调Bcl-2mRNA的表达（0．25±0．04比0．42±0．02，P〈0．05），当加入CoPP预处理后可抑制上述改变（BaxmRNA：0．75±0．07，Bcl-2mRNA：0．36±0．03，均P〈0．05）。结论BSA可显著增加细胞的凋亡率并直接调控凋亡相关蛋白mRNA的表达，CoPP可抑制上述BSA的作用。HO-1对BSA所致肾小管上皮细胞凋亡具有保护作用，可以抑制细胞凋亡。

成人H7N9禽流感首现患者6例临床分析

目的 分析6例H7N9禽流感首现患者的临床和流行病学特点,并对治疗方法进行探讨.方法 对我院6例H7N9禽流感患者的临床表现、流行病学资料、实验室检查、影像学资料进行回顾性分析.结果 6例患者均在闵行江川地区发病,均有发热、咳嗽,大多有痰中带血和呼吸困难（5/6）,部分患者伴畏寒寒战（1/6）、恶心（2/6）、呕吐（2/6）.血常规正常或下降（5/6）,淋巴细胞有不同程度下降（5/6）,C反应蛋白、门冬氨酸氨基转移酶、肌酸激酶和乳酸脱氢酶均明显升高（6/6）,胸部CT检查显示双肺磨玻璃样及实变阴影,具有短期内病灶进展快的特点;6例患者中进展为急性呼吸窘迫综合征4例,并最终死亡,2例无急性呼吸窘迫综合征者存活.结论 人感染H7N9禽流感为新发传染性疾病,可导致严重的呼吸窘迫综合症,死亡率高.

708例腹泻患者粪标本病毒检测及临床特点

目的了解成人散发性腹泻病毒感染情况，为临床防治提供依据。方法收集上海市第五人民医院肠道门诊2012年5月至2013年4月腹泻患者粪便标本708份，送上海市闵行区疾病预防控制中心采用反转录（RT）-PCR进行病毒检测。统计学处理采用Pearson卡方检验和Fisher确切概率检验。结果708份粪便标本中，检出诺如病毒GI型7份，占0．99％；诺如病毒GⅡ型150份，占21．19％；轮状病毒21份，占2．97％；星状病毒3份，占0．42％；腺病毒4份，占0．56％。男性腹泻患者感染诺如病毒GⅡ占26．80％，高于女性的15．32％，差异有统计学意义（X2＝13．957，P〈0．01）。结论本组腹泻患者粪便标本检测结果以诺如病毒GⅡ型多见，男性高于女性，其次为轮状病毒、星状病毒和腺病毒感染。本组成人腹泻病例病程短，预后良好。

成功抢救人感染H7N9禽流行性感冒一例分析

人感染H7N9禽流行性感冒（流感）是由H7N9亚型禽流感病毒引起的急性呼吸道传染病，自2013年2月以来，全国各地先后发生人感染H7N9禽流感，现将复旦大学附属上海市第五人民医院感染科与上海市公共卫生临床中心感染科首例抢救成功病例报道如下。

低氧诱导因子1α在白蛋白过负荷致肾小管上皮细胞转分化中的作用

长期蛋白尿可致肾脏纤维化，细胞外基质（ECM）的主要来源之一是转分化的肾小管上皮细胞（TEC），因此上皮细胞-间充质细胞转分化（EMT）是蛋白尿患者肾脏纤维化的主要机制之一。低氧诱导因子1（HIF-1）可诱导多种细胞转分化。本研究检测大鼠TEC（NRK-52E细胞）在含高浓度牛血清内蛋白（BSA）的培养基中是否发生转分化，以及shRNA-HIF—1α能否抑制BSA致NRK-52E细胞转分化的作用，以探讨HIF—1α在蛋白尿致肾脏纤维化中的作用。

3,4-二羟基苯甲酸乙酯预处理对白蛋白诱导低氧培养肾小管上皮细胞凋亡的影响

目的 探讨脯胺酰羟化酶抑制剂3,4-二羟基苯甲酸乙酯（EDHB）对白蛋白诱导的低氧条件下培养的肾小管上皮细胞（NRK-52E）凋亡的影响.方法 NRK-52E细胞在以下各组孵育24 h：常氧（5%CO2＋空气）组,低氧（1%O2＋5%CO2＋94%N2）组,常氧＋白蛋门（30 g/L）组及低氧＋白蛋白（30 g儿）组,观察各组NRK-52E细胞的凋亡情况.然后NRK-52E细胞在以下各组孵育24 h：常氧组、低氧组,低氧＋白蛋白（30 g/L）组,低氧＋EDHB（500 μmol/L）组,EDHB预处理组（培养细胞中先加入EDHB 500 μmol/L,0.5 h后再加入BSA 30 g/L,低氧培养）,观察EDHB对白蛋白诱导低氧培养NRK-52E凋亡的影响.流式细胞技术检测细胞凋亡;RT-PCR检测凋亡相关蛋门bcl-2、bax及血管内皮生长因子（VEGF）mRNA表达;Western印迹检测VEGF蛋白表达.结果 NRK-52E细胞凋亡率在常氧组与低氧组差异无统计学意义（P〉0.05）,但低氧＋白蛋白组细胞凋亡率显著高于常氧＋白蛋白组（37.36%±4.95%比25.59%±3.32%,P〈0.05）.低氧＋白蛋白组bax mRNA表达显著高于常氧＋白蛋白组（P〈0.05）,而bcl-2 mRNA的表达则显著低于常氧＋白蛋白组（P〈0.05）.EDHB预处理可显著抑制低氧＋白蛋白组细胞凋亡率的增高（P〈0.05）、bax mRNA表达的增高（P〈0.05）以及bcl-2 mRNA表达的降低（P〈0.05）.低氧组NRK-52E细胞VEGF mRNA和蛋白表达显著高于常氧组（P〈0.05）,而低氧＋白蛋白组则显著低于低氧组（P〈0.05）.EDHB预处理可显著抑制低氧＋白蛋白组细胞VEGF mRNA和蛋白表达的降低（P〈0.05）.结论 白蛋白和低氧联合刺激可显著增加NRK-52E细胞凋亡,EDHB预处理可改善该病变,可能与其提高VEGF的表达有关.

家系内慢性HBV感染与HLA-Ⅱ类基因多态性

目的探讨家系内慢性乙型肝炎病毒感染与人类白细胞抗原-Ⅱ(HLA-Ⅱ)类基因多态性的关系及可能的原因。方法采用聚合酶链反应序列特异性引物(PCR/SSP)对(37个)慢性乙型肝炎病毒感染家系内成员(慢性HBV感染组121人,HBsAg阴性组76人)的人类白细胞抗原(HLA)DQA1和DQB1等位基因多态性进行分析;并从外周血中分离单个核细胞,在培养基中诱导培养为树突状细胞(DC),采用混合淋巴细胞反应检测DC刺激淋巴细胞增殖的能力。结果 HLA-DQA1 0501和DQB1 0301,DQB1 0201在慢性乙型肝炎病毒(HBV)感染组的等位基因频率明显高于HBsAg阴性组;HLA-DQB1 0402和DQB1 0604等位基因频率明显低于HBsAg阴性组;慢性HBV感染组DC刺激淋巴细胞增殖的刺激指数(SI)与HBsAg阴性组比较明显降低(P<0.01);HLA-DQA1 0501、DQB1 0301阳性组DC刺激淋巴细胞增殖指数明显低于阴性组;HLA-DQB1 0402、DQB1 0604阳性组淋巴细胞增殖指数明显高于阴性组。结论家系内HBV慢性感染与HLA-DQA1和DQB1的基因多态性相关,HLA-Ⅱ类基因可通过影响DC刺激淋巴细胞增殖能力发挥免疫调查作用,可能与HBV感染慢性化有关。