花色苷抑制JNK和AKT蛋白磷酸化对哮喘幼鼠气道炎症的影响

目的探讨饲料添加花色苷对哮喘幼鼠气道炎症的影响及其机制。方法 45只4周龄的SPF级雌性BALB/c小鼠随机分成3组,即正常对照组、哮喘模型组和花色苷组,前两组饲喂普通饲料,花色苷组饲喂添加花色苷的普通饲料(400 mg/kg)。卵清蛋白(OVA)致敏和激发制作哮喘模型。苏木精-伊红(HE)染色观察肺组织炎性细胞浸润;过碘酸雪夫(PAS)染色观察杯状细胞增生和黏液分泌;酶联免疫吸附法(ELISA)检测血浆总IgE、肺泡支气管灌洗液(BALF)白细胞介素-4(IL-4)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-13(IL-13)的浓度;免疫印迹法(Western blot)检测肺组织c-Jun氨基端激酶(JNK)和Akt的表达水平。结果与正常对照组小鼠相比,哮喘模型组BALF中炎症细胞总数及嗜酸性粒细胞百分比、IL-4、IL-5、IL-13浓度,血浆中总IgE浓度,肺组织炎症、杯状细胞增生和黏液分泌及磷酸化JNK(p-JNK)和磷酸化Akt(p-Akt)表达明显升高(P<0.05);与哮喘模型组相比,花色苷组除血浆总IgE浓度基本持平外,其余各项指标均明显降低(P<0.05)。结论饲料添加花色苷通过抑制肺组织p-JNK和p-Akt表达而减轻哮喘幼鼠的气道炎症。

姜黄素通过抑制p38 MAPK和AKT活化改善幼鼠过敏性气道炎症

【目的】选择幼龄小鼠模拟3~12岁儿童的过敏性气道炎症,探索膳食补充姜黄素对幼龄小鼠过敏性气道炎症的防治作用。【方法】4周幼龄雌性BALB/c小鼠随机分为3组(每组n=8),分别是空白对照组,过敏性气道炎症模型组,姜黄素干预组。在末次卵清白蛋白激发24 h后,观察各组小鼠的症状,测定肺泡灌洗液(BALF)中的炎症细胞数,全血细胞分析白细胞亚型的数量,用HE染色观察肺部支气管周围炎症细胞浸润情况,用过碘酸-雪夫染色观察杯状细胞增生情况,酶联免疫吸附法测定BALF中的细胞因子IL-4、IL-5、IL-13以及血浆中的总Ig E水平,western blot技术检测肺组织磷酸化p38丝裂原活化蛋白激酶(p-p38 MAPK)/p38 MAPK,,p-AKT/AKT蛋白表达情况。【结果】与过敏性气道炎症模型组相比,饲料添加姜黄素的干预组可以明显改善幼鼠的反复抓挠鼻子、点头呼吸、体质量减轻等症状,外周血中嗜酸性粒细胞降低具有统计学差异(P<0.05),肺泡灌洗液和肺支气管周围的炎症细胞以及肺泡灌洗液中IL-4,IL-5,IL-13的水平降低(P<0.05),支气管上皮杯状细胞增生减轻,此外,肺组织的磷酸化p38 MAPK和磷酸化AKT水平降低,组间差异有统计学意义(P<0.05)。【结论】膳食添加姜黄素可以抑制幼龄小鼠过敏性气道炎症,其机制可能与抑制肺组织的p-38 MAPK和AKT信号传导有关。

姜黄素对过敏性哮喘小鼠血小板功能的调节作用

目的研究膳食补充姜黄素(curcumin,Cur)对过敏性哮喘低龄小鼠的血小板功能的影响及其可能机制。方法4 w龄雌性BALB/c小鼠随机分为正常对照组(control group,C),过敏性哮喘M组(mdel group,M),姜黄素干预组(Cur group,Cur)。在末次卵清白蛋白(ovalbumin,OVA)激发24h后,观察各组小鼠的症状,测定出血时间和血小板聚集率;测定全血中平均血小板体积(MPV);酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆中的β-血小板球蛋白(β-TG)和血小板因子4(PF4);Western blotting检测血小板信号蛋白。结果 Cur组的小鼠抓挠鼻子的过敏性症状比M组明显减轻(P<0.05);与M组相比,Cur组血浆中β-TG水平由(18.97±5.40)ng/ml下降到(12.70±3.76)ng/ml,而PF4水平由(208.14±52.97)ng/ml下降到(98.6±9.97)ng/ml,以上指标差异有统计学意义(P<0.05);Cur干预抑制哮喘小鼠血小板p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)磷酸化水平和c-Jun氨基末端激酶(c-Jun N-terminal kinase,JNK)磷酸化水平的升高(P<0.05)。小鼠出血时间和血小板聚集率在各组间无统计学差异(P>0.05)。结论膳食补充Cur可抑制过敏性哮喘低龄小鼠的血小板活化,这可能是Cur改善哮喘的途径之一。

辅酶Q10通过调控糖蛋白Ⅵ信号通路抑制血小板聚集和活化

目的 血小板过度活化在血栓以及动脉粥样硬化(AS)的发生发展中发挥重要的作用,糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)是血小板表面重要的受体,在血管损伤处通过与胶原结合介导血小板活化参与血栓以及AS的形成。辅酶Q10(CoQ10)作为膳食补充剂通过抗炎、抗氧化等发挥预防心血管疾病的功能,尤其是抗AS作用。但是CoQ10是否影响血小板功能尚未见报道,因此本研究通过体外实验探讨CoQ10对血小板活化的影响及其对GPⅥ信号通路调控作用。方法 用不同浓度CoQ10(0、1、10、100μmol/L)与健康人纯化血小板在体外共同孵育50 min,采用血小板聚集仪测定胶原诱导的血小板聚集率;用流式细胞术测定血小板表面CD62P、CD63、αⅡbβ3的活化和纤维蛋白原结合率(Fibrinogen binding);用West-ern blot检测胶原诱导的血小板GPⅥ信号通路相关蛋白磷酸化水平。结果 CoQ10可以显著降低胶原诱导的血小板聚集率,抑制血小板表面CD62P和CD63的表达,并能显著抑制αⅡbβ3的活化以及降低Fibrinogen binding百分率。CoQ10下调胶原诱导的GPⅥ信号通路中Syk、LAT、SLP76、PLCγ2以及PKC的磷酸化水平。结论 CoQ10抑制胶原诱导的血小板活化可能是通过下调GPⅥ信号通路来实现。