黄连素对IL-1β诱导炎性退变软骨细胞增殖的影响及其分子机制

目的观察黄连素对白细胞介素1β(IL-1β)诱导炎性退变软骨细胞增殖的影响,并探讨其可能的作用机制。方法采用酶消化法提取小鼠膝关节软骨细胞,通过镜下观察及甲苯胺蓝染色鉴定证实。使用IL-1β构建软骨细胞炎性退变模型,采用MTT法检测不同浓度黄连素对软骨细胞活性的影响,筛选出对软骨细胞活性有积极作用的低、高两个黄连素浓度(6.25×10^(-3)g/L、0.05 g/L)。将软骨细胞随机分为空白组(不采取任何干预)、模型组(仅加入10 ng/mL IL-1β干预)、黄连素低剂量组(10 ng/mL IL-1β+6.25×10^(-3)g/L黄连素干预)、黄连素高剂量组(10ng/mL IL-1β+0.05 g/L黄连素干预),分组处理后继续培养2 d。采用FDA荧光染色检测细胞增殖活性(活细胞数),番红O染色检测软骨细胞分泌功能(染色面积),Real-time PCR法检测软骨细胞特异性相关基因[蛋白聚糖(Acan)、Ⅱ型胶原1(Col2a1)]及炎症相关基因[基质金属蛋白酶13(MMP-13)、环氧合酶2(COX-2)]表达,Western blotting法检测转化生长因子β(TGF-β)/Smad2/3信号通路相关蛋白(TGF-β_(1)、Smad2、Smad3)表达。结果模型组、空白组、黄连素低剂量组、黄连素高剂量组活细胞数分别为(212.50±17.68)、(375.00±35.35)、(530.00±42.43)、(650.00±70.71)个,组间两两比较P均<0.05。模型组、空白组、黄连素低剂量组、黄连素高剂量组染色面积分别为24.50%±4.95%、44.50%±6.36%、65.00%±7.07%、77.5%±3.53%,组间两两比较P均<0.05。模型组、空白组、黄连素低剂量组、黄连素高剂量组软骨细胞Acan、Col2a1 mRNA及TGF-β_(1)、Smad2、Smad3蛋白表达均依次升高,MMP-13、COX-2 mRNA表达均依次降低,组间两两比较P均<0.05。结论黄连素可促进IL-1β诱导炎性退变软骨细胞的增殖及活性,其机制可能与抑制炎症反应及激活TGF-β/Smad2/3信号通路有关。

膝关节骨关节炎患者胫骨平台后倾角不同测量方法的相关性研究

目的探究胫骨前皮质线(tibial cortical line,ATC)测量法、后皮质线(tibial posterior cortical line,PTC)测量法与胫骨近端解剖轴(proximal anatomical center axis of the tibia,TPAA)测量法的相关性和不同严重程度的膝关节骨关节炎,对胫骨后倾角测量结果的影响以及胫骨前皮质线法、后皮质线法的临床实用价值。方法采用系统随机抽样法从我院符合纳入标准的 500 例患者中,选取膝关节退行性骨关节炎患者100 例进行研究(143 膝),男 22 例,女 78 例,平均年龄 66(52~84)岁,平均身高 157(136~188)cm,平均体重 63(37~85)kg。平均体重指数 26。143 膝关节中 K-Lgrade I 级 2 膝,占 1.4%,K-Lgrade II 级 30 膝,占 20.9%,K-Lgrade III 级 63 膝,占 44.1%,K-Lgrade IV 级 48 膝,占 33.6%;使用我院影像 Pacs 系统在标准膝关节(站立位)侧位X线片上分别选用 ATC、PTC 及 TPAA 为测量轴测量胫骨平台后倾角,并对测量值进行统计学分析。结果 K-Lgrade II^IV 级膝关节炎,均可得到相应的直线回归方程,ATC、PTC 与 TPAA 有回归关系存在(F 检验P<0.001),因变量(ATC、PTC)及回归系数 t 检验 P<0.001,ATC、PTC 测量法分别与 TPAA 测量法有线性回归关系;K-Lgrade II 级膝关节炎 Spearson 相关系数r值分别为 0.96、0.96(P<0.001);K-Lgrade III 级膝关节炎 Spearson 相关系数 r 值分别为 0.92、0.93(P<0.001);K-Lgrade IV 级膝关节炎 Spearson 相关系数r值分别为 0.94、0.94(P<0.001);差异均有统计学意义,ATC、PTC 分别与 TPAA 有高度的线性关系,即有显著的相关性(r>0.8);而不同性别、不同侧间三种测量方法的差异性无统计学意义(P>0.05)。结论退行性膝关节骨关节炎患者,以 ATC、PTC 为测量轴时,胫骨平台后倾角测量值均与以 TPAA 为测量轴时有显著的相关性,其相关程度受膝关节骨关节炎严重程度的影响,但并非随着膝关节骨关节炎的逐渐加重而依次降低;患者可以在普通的膝关节侧位X线片上,选用胫骨 ATC 或 PTC 作为测量轴,进行胫骨平台后倾角测量,方便经济、辐射少。但是存在大量骨赘、关节面塌陷及关节脱位、症状较重等膝关节炎较严重的患者,不建议选用 ATC 或 PTC 作为测量轴测量胫骨后倾角。