红芸豆根腐病拮抗内生细菌的筛选和鉴定

为获得对红芸豆根腐病菌具有良好拮抗效果的菌株,研究采用组织分离法,从苍耳中分离内生细菌,以红芸豆根腐病菌尖镰孢菌(Fusarium oxysporum)为靶标菌,通过平板对峙法、形态特征观察和分子生物学方法进行拮抗细菌的筛选和鉴定,采用共培养法研究拮抗细菌对尖镰孢菌的抑制作用,并测定拮抗细菌抑菌谱及其对红芸豆种子萌发的影响。结果表明,从苍耳根、茎、叶中共分离得到36株内生细菌,从中筛选到对尖镰孢菌具有明显抑制作用的菌株xj-1-2。结合形态学和gyrB基因序列分析,结果将菌株xj-1-2鉴定为贝莱斯芽孢杆菌(Bacillus velezensis);xj-1-2能导致尖镰孢菌菌丝分枝增多,产孢量减少;在4、6、8 h时对孢子萌发抑制率分别为100%、79.45%、73.54%。该菌株具有广谱抑菌活性,对厚垣镰孢菌、三线镰孢菌、芬芳镰孢菌等8种病原真菌均具有不同程度的拮抗作用。分别用浓度为1×10^(7)、1×10^(8)、1×10^(9)cfu/mL的xj-1-2菌悬液和发酵液处理红芸豆种子后,发芽率和芽长与对照相比均无显著差异,说明xj-1-2对红芸豆生长具有安全性。从苍耳中分离筛选到具有广谱抑菌活性的贝莱斯芽孢杆菌xj-1-2菌株,为红芸豆根腐病的生物防治提供了菌种资源。

花生根腐病病原菌尖镰孢菌对噁霉灵的抗性风险评估

为明确花生根腐病病原菌尖镰孢菌Fusarium oxysporum对噁霉灵的抗性风险等级,采用菌丝生长速率法测定分离自河南、山东、河北、辽宁和北京等省市的112株尖镰孢菌对噁霉灵的敏感性,通过20代药剂驯化和紫外诱变2种方式分别获得抗噁霉灵尖镰孢菌突变体,并对药剂驯化获得的抗性突变体及其亲本菌株进行遗传稳定性、交互抗性和生物学性状测定。结果显示:供试尖镰孢菌对噁霉灵的敏感性频率分布呈近似正态分布的连续单峰曲线,敏感基线为37.34μg/mL。通过药剂驯化共获得5株噁霉灵抗性突变体,抗性倍数范围为9.21倍~13.16倍,抗药性可以稳定遗传。通过紫外诱变共获得12株噁霉灵抗性突变体,抗性突变频率为8.57×10^(-6)。药剂驯化获得的抗性突变体生物适合度低于其亲本菌株,噁霉灵与多菌灵、丙硫菌唑和吡唑醚菌酯对其均不存在交互抗性。表明尖镰孢菌对噁霉灵为低至中等抗性风险,在使用噁霉灵防治花生根腐病时建议与无交互抗性或者负交互抗性的杀菌剂合理轮用来控制田间病原菌的抗药性发展。