糖氧剥夺/再灌注损伤对人正常肝L02细胞自噬水平的影响

目的探讨糖氧剥夺/再灌注损伤(OGD/R)对人正常肝L02细胞自噬水平的影响。方法体外培养人正常肝L02细胞,制备OGD/R模型,模拟临床的肝脏缺血再灌注损伤。分为5组:正常对照组、OGD 6 h/R 1、3、6、12 h组。随后在倒置显微镜下观察L02细胞形态;采用MTT比色法检测L02细胞的相对增殖情况;Western blot法检测自噬相关蛋白LC3、Beclin-1和p62的表达变化。结果与正常对照组相比,随着再灌注时间的延长,OGD/R组处理L02细胞的形态损伤逐渐加剧,增殖活性逐渐降低,呈时间依赖性。自噬相关蛋白LC3和Beclin-1在OGD 6 h/R 1 h即有所增高,随着再灌注时间的延长,LC3的表达量逐渐增高并于再灌注6 h时大量增加,于再灌注12 h时达到最大值(P<0.01);Beclin-1蛋白的表达量随再灌注时间的延长逐渐增加于6 h和12 h急剧增加(P<0.01);p62蛋白于OGD 6 h/R 1 h时和3 h无明显变化,而在再灌注6 h时开始急剧增加,于12 h达到最大值(P<0.01)。结论 OGD/R可诱导人正常肝L02细胞自噬水平上调,并且导致细胞的自噬性死亡。

错愕与困惑——对基层区乡人大换届工作的思考

人民代表大会制度最基层的单位是区乡人大，定期进行换届选举，但在选举中，存在非常多的问题，诸如事先指派候选人、拉选票、违规委托代投选票等，究其原因，不仅在于上级人大的摊派任务，更在于人民群众对政治活动的漠视态度。

幼儿国画教学探微

国画是我园传统的绘画形式,具有非常悠久的文化历史,它风格独特,在世界美术史上有着重要的地位.让幼儿接触中国画,一方面可以从小培养孩子对本民族艺术的爱好;另一方面可以借助国画教学来激发幼儿感受美、表现美、创造美的潜能.事实上毛笔不象油画棒、水彩笔它用起来还是有一定的难度.因此应选择适合幼儿的教学方法,激发幼儿爱画、想画的兴趣,帮助他们学习绘画的方法,培养他们对国画的审美能力,接受中国传统文化的熏陶.

异丙酚对人肝细胞氧糖剥夺-复氧复糖时自噬的影响

目的评价异丙酚对人肝细胞氧糖剥夺-复氧复糖时自噬的影响。方法HL-7702细胞培养至对数生长期后，接种于培养板中，采用随机数字表法分为3组（n=12）：对照组（C组）、氧糖剥夺一复氧复糖组（OGD／R组）和异丙酚＋氧糖剥夺-复氧复糖组（P＋OGD／R组）。C组正常培养；OGD／R组和P＋OGD／R组氧糖剥夺6h，复氧复糖12h制备氧糖剥夺-复氧复糖损伤模型；P＋OGD／R组于缺氧缺糖前10min加入终浓度50μmol／L的异丙酚。采用MTT法检测细胞活力；采用Western blot法测定自噬蛋白微管相关蛋白1轻链3（LC3）和Beclin-1的表达水平；采用免疫荧光法观察自噬小体的数量及分布情况。结果与C组比较，OGD／R组和P＋OGD／R组肝细胞活力降低，LC3和Beclin-1的表达上调（P〈0．05），自噬小体数量增加；与OGD／R组比较，P＋OGD／R组肝细胞活力升高，LC3和Beclin—1的表达下调（P〈0．05），自噬小体数量减少。结论异丙酚减轻人肝细胞氧糖剥夺-复氧复糖损伤的机制可能与抑制自噬有关。