50 Hz磁场暴露对APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层组织代谢的影响

目的探究50 Hz磁场暴露对APP/PS1双转基因小鼠大脑皮层组织代谢的影响。方法将12只APP/PS1双转基因12周龄雄性小鼠随机分为对照组(C组)和50 Hz磁场暴露组(MF组),每组6只。磁场暴露组小鼠暴露在1.0 mT 50 Hz磁场中,2 h/d,持续21 d;对照组小鼠除无磁场暴露外,其余条件与磁场暴露组相同。暴露结束后按标准方法取小鼠大脑皮层组织,进行高分辨非靶代谢组学检测,包括样品代谢物提取、样品LC-MS/MS质谱分析、代谢物定性定量、数据分析等。结果50 Hz磁场暴露对APP/PS1双转基因小鼠的发育无明显影响。本次高分辨非靶代谢组学检测共鉴定出1068种代谢物。依据变异倍数分析(FC>1.5或FC<0.67倍,P<0.05),50 Hz磁场暴露后小鼠皮层组织共定性出22种差异代谢物,其中11-酮-β-乳香酸增加最明显(FC=80.68),5-氨基酮戊酸降低最明显(FC=0.34)。依据OPLS-DA(VIP>1,P<0.05),共筛选30种差异代谢物,其中VIP位居前3位的是2-油酰-1-软脂酰-sn-甘油-3-磷酸胆碱(VIP=19.76,FC=0.52)、去氢抗坏血酸(VIP=12.71,FC=0.72)、肌苷(VIP=10.64,FC=1.05)。差异代谢物层次聚类分析、相关性和KEGG通路分析显示,这些差异代谢物可能参与了16条KEGG通路,其中差异代谢物L-天冬氨酸可参与其中的13条通路、L-丙氨酸可参与其中的7条通路、乙酰胆碱可参与其中的3条通路。结论50 Hz磁场暴露可能对APP/PS1双转基因小鼠的氨基酸代谢、蛋白转运、辅酶A和氨酰tRNA生物合成、肌动蛋白细胞骨架调节、神经细胞配体-受体的相互作用等方面产生一定影响。

上市公司融资问题探讨

指出了在经济转轨过程中我国上市公司出现了过度融资现象,主要表现为股权融资偏好、资本结构畸形等问题.研究了这些问题产生的本质原因,并提出了相应的解决建议,包括完善公司治理和改善外部融资环境.

50 Hz磁场暴露对Neuro2a/APP(695)细胞基因转录的影响

目的研究50 Hz磁场暴露对Neuro2a/APP(695)细胞基因转录的影响。方法Neuro2a/APP(695)细胞简单随机分为假性辐照组和磁场暴露组(n=3)。暴露条件为1.0 mT 50 Hz正旋波磁场,4 h/d,连续3 d;假性辐照组细胞除无磁场暴露外,余同磁场暴露组。暴露结束后按标准方法送样,进行转录组测序检测,包括样品RNA提取、数据质量评价和数据分析等。结果50 Hz磁场暴露后Neuro2a/APP(695)细胞有141种定性的基因表达发生了明显的变化,其中有129种表达上调、12种表达下调。GO富集分析结果显示,Neuro2a/APP(695)细胞中62种上调差异表达基因涉及432类显著GO功能富集,其中涉及生物学过程337类、细胞组分16类、分子功能79类;3种下调差异表达基因共涉及275类显著GO功能富集,其中涉及生物学过程260类、细胞组分5类、分子功能10类。KEGG通路分析显示,这些差异基因可能参与了20条KEGG通路,其中2个下调差异表达基因通路,18个上调差异表达基因通路。结论50 Hz磁场暴露可能对Neuro2a/APP(695)细胞的黏附连接、Hippo信号通路、糖胺聚糖生物合成-硫酸软骨素/硫酸皮肤素、蛋白消化和吸收和甘露糖型O-聚糖生物合成等方面产生影响,以上通路可能是50 Hz磁场对Neuro2a/APP(695)细胞产生影响的主要途径。

中国居民收入分配差距扩大的原因及对策

当前我国居民收入分配差距逐渐扩大是不容置疑的事实。造成这一现状的原因主要是城市和农村劳动力配置不均、税收不按实际收入计算、制度不健全、垄断行业的存在等,本文通过分析提出了相应的改进措施。

1800MHz射频电磁场通过瞬时受体电位C通道影响原代大鼠皮层神经元突起生长

目的研究1 800 MHz射频电磁场(radio frequency electromagnetic field,RF-EMF)对原代培养皮层神经元突起生长的影响,并通过瞬时受体电位C通道介导的钙内流,探讨RF-EMF对突起生长影响的机制。方法将原代培养皮层神经元(primarily cultured cortical neurons,PCCNs)用随机数表法分为4组:假暴露(Sham)、Sham+SKF-96365、辐照组(RF)和RF+SKF-96365组。使用s Xc-1800辐照系统,1 800 MHz频率talk模式,5 min开10 min关,比吸收率为4 W/kg,辐照组辐照时间分别为12、24 h和48 h。SKF-96365干预处理是在维持培养基中加入SKF-96365(5μmol/L)后与假暴露组、RF组进行相同的处理。辐照结束后即刻进行以下指标检测:1细胞活力(CCK-8法)和LDH释放;2TRPC1、TRPC3蛋白表达(Western blot);3钙库操纵性钙内流变化(store-operated calcium entry,SOCE)(激光共聚焦显微镜);4神经元突起总长度、初级突起数和分支数(Tuj-1免疫荧光染色)。结果 RF组细胞活力和LDH释放与相应Sham组相比差异均无统计学意义(P>0.05)。与Sham组比较,RF组辐照24 h后,TRPC1和TRPC3蛋白表达分别降低24%和23%,SOCE下降54%,辐照48 h引起PCCNs突起总长度、初级突起数和分支数分别下降20%、12%、31%,以上变化均有统计学意义(P<0.05)。Sham+SKF-96365组SOCE下降24%,突起总长度、初级突起数、分支数分别下降10%、12%、24%,与Sham组比较均有统计学意义(P<0.05),而RF+SKF-96365组SOCE和突起总长度、突起数、分支数的变化与RF组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 RF-EMF可引起原代皮层神经元突起长度、初级突起数和分支数减少,该效应可能与TRPC1和TRPC3通道蛋白表达降低和TRPC通道介导的钙信号减弱有关。

TBL教学法在神经行为学测评实验课教学中的应用

目的针对传统验证性实验教学模式存在的问题,探讨基于团队的教学法(team-based learning,TBL)在神经行为学测评实验课教学中的应用效果。方法以2019级临床医学五年制1班(107人)和2班(125人)学生为教学对象,分别采用传统教学法和TBL教学法开展实验课教学。采用个人准备度测试问卷和自制满意度调查问卷,评价各班学生对实验相关理论知识的掌握程度,以及授课教师和学生对TBL教学法的满意度。结果TBL教学组个人准备度测试评分明显高于传统教学组(P<0.001)。参与TBL教学的学生中,91.2%学生表示TBL教学法很有趣,愿意参与TBL教学;79.2%学生认为TBL教学法能够实现将理论知识运用到实践的教学目标;86.4%学生认为团队学习能够提高学习效率;76.0%学生认为TBL教学法有助于自主学习能力及人群现场工作能力的形成。授课教师均认为,与传统教学法相比,TBL教学法可以调动学生的学习积极性,提高其自主学习能力、表达能力和团队合作能力,丰富课堂内容,促进其相关理论知识的掌握和人群现场工作能力的形成。结论将TBL教学法应用于神经行为学测评实验课教学是一次成功的探索实践。

移植用小鼠胶质前体细胞的培养及其移植后形态和功能初探

目的完善体外分离培养移植用胶质前体细胞的方法,并运用双光子显微镜在活体动物水平,对小鼠大脑皮层移植的胶质细胞进行单细胞水平的在体功能研究。方法体外分离培养小鼠胚胎神经干细胞,并将其诱导为胶质前体细胞及星形胶质细胞。分别用Nestin、A2B5以及GFAP对体外培养的神经干细胞、胶质前体细胞以及星形胶质细胞进行形态学鉴定。体外给予ATP及毒胡萝卜素(Thapsigargin),对体外分化的星形胶质细胞进行功能学鉴定。将以上诱导得到的胶质前体细胞移植入成年小鼠大脑皮层,并在移植12周后对其进行形态学观察。另外,应用双光子活体钙成像技术,观察移植胶质细胞对ATP刺激的反应。结果 1体外诱导神经干细胞成为胶质前体细胞(A2B5阳性)的比率达到(87.4±3.4)%,继续将其诱导为成熟星形胶质细胞(GFAP阳性)的比率达到(83.4±3.3)%。2体外诱导而来的星形胶质细胞可对ATP及毒胡萝卜素产生钙反应。3移植进入成年小鼠皮层的胶质前体细胞,在移植12周后仍可存活,并可分化为成熟的星形胶质细胞。4双光子活体钙成像实验证实,ATP可诱导活体小鼠皮层内移植细胞产生钙信号。结论神经干细胞来源的胶质前体细胞在移植进入成年小鼠皮层内可分化为成熟星形胶质细胞,并至少存活12周。另外,胶质前体细胞在移植4周后,便可在活体动物大脑皮层内具备功能活动。

0.22太赫兹电磁辐射暴露致神经母细胞瘤Neuro-2a细胞损伤的非热效应研究

目的探讨0.22太赫兹(terahertz,THz)电磁辐射暴露致小鼠神经母细胞瘤细胞株——Neuro-2a细胞损伤的非热效应特点。方法以Neuro-2a细胞作为体外实验暴露模型,采用频率为0.22 THz,平均功率密度为0(Sham组)、25(25 mW/cm^2辐照组)、50 mW/cm^2(50 mW/cm^2辐照组)辐照细胞,辐照时间为5 min,监测辐照引起的细胞培养基温度变化;于暴露后24 h检测细胞增殖(EdU阳性细胞比例和细胞活力)、凋亡(γH2AX、TUNEL阳性细胞比例、Bax与Bcl2基因表达水平);于暴露后48 h分析细胞突触生长(突触长度、分支数目及Tubb3与Syp基因表达水平)的变化情况。结果与Sham组比较,两辐照组细胞培养基温度升高在0.1~0.4℃;EdU阳性细胞比例、细胞活力、γH2AX和TUNEL阳性细胞比例及Bax、Bcl2基因表达水平均无明显改变;仅50 mW/cm^2辐照组细胞突触长度和分支数目较Sham组明显减少(P<0.01),Tubb3和Syp基因表达也明显降低(P<0.05)。结论THz辐射暴露以非热效应为主,可抑制Neuro-2a细胞突触生长,而不影响细胞增殖和凋亡,提示神经细胞突触生长是THz辐射产生神经生物效应的敏感靶标。

太赫兹辐射暴露致小鼠皮肤损伤效应研究

目的探讨太赫兹(terahertz,THz)辐射暴露所致皮肤组织损伤的生物效应特点及其潜在的分子机制。方法采用C57BL/6J小鼠为实验动物模型,通过频率为0.22 THz,平均功率密度为0、25、50 mW/cm^2的THz辐照动物,辐照时间为5 min,观察辐照引起的暴露部位皮肤升温曲线特点和皮肤组织病理损伤特征,同时通过对辐照部位皮肤组织进行转录组测序及生物信息学分析,揭示损伤的整体效应及潜在分子机制,并进一步通过ELISA验证RNA-seq揭示的相关效应。结果25 mW/cm^2 THz辐照不引起明显的升温效应,但50 mW/cm^2 THz辐照能够导致辐照动物皮肤平均温度迅速升高超过2℃,并且导致辐照部位皮肤组织出现上皮脱落及出血等病理损伤特征。通过对损伤皮肤组织进行转录组测序,共筛选出上调基因49个,下调基因27个。对这些基因进行GO及KEGG分析结果显示,其主要功能为调控机体组织免疫及炎症反应等。ELISA检测结果显示,THz暴露后皮肤炎症因子IL-1β、IL-6及TNF-α表达明显升高(P<0.05,P<0.01)。结论THz辐射导致暴露部位皮肤出现明显的热效应损伤及引起炎症反应等损伤效应,并导致一系列基因表达异常。

NLRP3炎症小体激活在太赫兹暴露所致小鼠皮肤炎症中的作用

目的研究太赫兹(terahertz,THz)辐射暴露对小鼠皮肤组织可能的损伤影响,探讨太赫兹暴露致皮肤无菌性炎症的潜在机制。方法采用C57BL/6J小鼠为实验动物模型,使用频率为0.22 THz的太赫兹辐射局部暴露小鼠皮肤组织,太赫兹峰值功率密度为25、80、160 mW/cm^2,占空比1∶5,暴露时间5 min和10 min。暴露后观察动物皮肤炎症因子释放、氧化应激反应和NLRP3炎症小体激活。并通过Caspase-1抑制剂,探讨NLRP3炎症小体激活在太赫兹辐射致皮肤炎症中的作用。结果160 mW/cm^2太赫兹辐照10 min可导致小鼠皮肤氧化应激反应,并引起皮肤组织内IL-1β、IL-6和PGE2含量升高(P<0.05)。80 mW/cm^2和160 mW/cm^2暴露10 min均可导致皮肤组织NLRP3炎症小体激活,而Caspase-1抑制剂则可显著降低皮肤组织炎症因子水平(P<0.05)。结论太赫兹电磁辐射暴露能够引起小鼠皮肤氧化应激反应和无菌性炎症,NLRP3炎症小体激活则介导了太赫兹暴露所致的皮肤组织炎症,并可能与氧化应激有关。

太赫兹辐射暴露引起小鼠视网膜基因表达改变

目的探讨太赫兹(terahertz,THz)辐射暴露后视网膜组织基因表达变化的整体情况,揭示THz暴露所致视觉系统损伤效应的关键信号通路及关键基因。方法通过平均功率密度80 mW/cm^2的THz辐射暴露小鼠眼部,暴露时长2 min,取暴露后视网膜组织,采用RNA-seq测序分析基因表达变化的整体差异,采用聚类分析及富集分析揭示差异基因富集的信号通路和所揭示的生物功能;并进一步通过Real-time PCR揭示THz辐射暴露对视网膜损伤关键基因表达影响的时效关系。结果以P<0.05、|logFC|≥1为筛选条件对差异表达基因进行筛选,共筛选出上调基因625个,下调基因9个。GO分析差异基因主要分布于细胞外成分,分子功能主要为影响蛋白结合等,生物功能主要为细胞应激反应与细胞增殖等。KEGG信号通路分析结果显示,差异基因主要影响PPAR信号通路、癌症相关信号通路、钙离子信号通路及PI3K-Akt信号通路。通过Real-time PCR对视网膜损伤相关基因进行验证发现,在暴露后5 min及24 h,THz辐射暴露均上调Krt12、Cfd、Wnt3a及Adipoq表达,下调Foxe3、Serpine3、Lix1、Rpe65、Rgr及Arsi基因表达,且暴露后5 min上调或下调幅度明显强于24 h。结论THz辐射能够导致视网膜大量基因表达异常,提示THz暴露可能造成视网膜损伤。

职业卫生与职业医学的发展新趋势及其对本科教育的启发

工业化和信息化的快速发展使职业人群的分布特征、工作环境及相应的职业人群健康数据等均产生了较大变化,职业卫生与职业医学研究对象也随之改变.与之相应,其研究目标也产生了一些新趋势,表现在对职业有害因素的评价、职业人群健康维护、工作效率促进以及职业卫生服务等方面.以上变化对这一领域从业人员的知识背景体系及个人能力等素质提出了新的要求,也对高校人才培养尤其是本科教育提出了新的挑战,因此,高校本科教育应在培养学生系统学习能力、多学科知识整合能力、信息及大数据处理能力、合作能力以及研究能力等方面创新性地开展工作,以适应这一变化需求,培养面向未来的职业卫生人才.

多学科融合的综合实验在预防医学教学中的应用探讨

预防医学是一门应用性较强的学科,预防医学专业人才不仅需要扎实的理论基础,还需要具备较强的实践操作能力。通过对近2 000人的教学实践发现,预防医学综合实验课程的开展能够有效促进学生对所学专业知识的综合运用,提高学生分析问题和解决问题的能力,增强学生创新能力。综合实验的主要特点是打破学科界限进行内容整合,强调以实际问题为导向来开展教学活动。因此,在实施过程中,应当注重跨学科教学内容的整合,尽量利用社会资源和真实场景开展现场实验教学,并通过评估模式的优化来引导学生进行学习和研究,通过交互式教学模式建立教与学的良性反馈,并以此进行教学活动的质量把控,将其渗透到整个教学过程的各个环节中,从而从整体上提高教学质量。

研讨式教学在军事作业医学教学中的应用与探索

军事作业医学是军事预防医学的一门新兴学科,具有较强的综合性和实践性。通过对近年来军事预防医学专业本科生的教学实践发现,开展研讨式教学能提高学生的自学能力,培养其团队意识,有助于学生综合素质的提升。本文通过总结分析研讨式教学的具体实施过程及教学效果,从学校、教师和学生三个层面论述开展研讨式教学应注意的问题,以期进一步提升教学质量。

50 Hz磁场和双酚A暴露对大鼠脑组织和Neuro-2a细胞Tau蛋白磷酸化的影响

目的研究50 Hz磁场、双酚A(bisphenol A,BPA)单独和联合暴露对神经细胞Tau蛋白磷酸化的影响。方法24只SD雄性大鼠,体质量(150±10)g,分为对照组(生理盐水灌胃+50 Hz磁场假性暴露)、50 Hz磁场暴露组(0.5 mT、4 h/d 50 Hz磁场暴露+生理盐水灌胃)、BPA暴露组(BPA20μg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃+50 Hz磁场假性暴露)、50 Hz磁场和BPA复合暴露组(BPA 20μg·kg^(-1)·d^(-1)灌胃+0.5 mT、4 h/d 50 Hz磁场暴露)4组,每组6只。处理1次/d,6 d/周,连续12周。小鼠神经母细胞瘤细胞株(Neuro-2a),分为对照组、50 Hz磁场暴露组(1 mT、48 h)、BPA暴露组(100μmol/L、24 h)、50 Hz磁场+BPA复合暴露组(1 mT、48 h+100μmol/L,24 h)4组。大鼠暴露结束按标准方法取材,组织免疫荧光化学方法检测大脑皮层和海马脑组织Tau-Thr^(231)、Tau-Ser^(404)的表达以及细胞凋亡。细胞实验暴露后采用CCK-8法检测细胞活力,采用细胞免疫荧光化学和Western blot方法检测Tau-Thr^(231)、TauSer;、Caspase-3的表达。结果50 Hz磁场暴露12周后,大鼠皮层和海马脑区Tau-Thr^(231)位点磷酸化水平明显升高(P<0.05);BPA暴露或与50 Hz磁场复合暴露12周后,大鼠皮层和海马脑区Tau-Thr^(231)位点磷酸化水平、皮层Tau-Ser^(404)位点磷酸化水平明显升高(P<0.05),复合暴露组皮层和海马脑区细胞凋亡水平变化明显(P<0.05)。50 Hz磁场暴露、BPA单独暴露或与50 Hz磁场复合暴露48 h后,Neuro-2a细胞活力均明显低于对照组(P<0.05)。50 Hz磁场暴露48 h后,Neuro-2a细胞Tau-Ser^(404)位点磷酸化水平明显高于对照组(P<0.05);BPA单独暴露或与50 Hz磁场复合暴露48 h后,Neuro-2a细胞Tau-Thr^(231)位点和Tau-Ser^(404)位点磷酸化水平、Caspase-3的表达水平明显升高(P<0.05)。结论50 Hz磁场、BPA暴露可引起神经细胞Tau蛋白不同位点过度磷酸化,并且二者之间存在协同效应,可引起神经细胞损伤。

环境电磁辐射现场测量综合实验设计与教学实践

现代通讯技术的飞速发展使居民环境电磁辐射暴露日趋复杂,科学、准确测量评估电磁辐射特征及强度是预防医学专业本科生应掌握的基本技能。该研究设计以社区环境电磁辐射现场测量为例,目的是引导学生观察分析测量对象特征,依据电磁辐射测量的基本原理和方法,讨论制订测评方案,并开展电磁辐射现场测量。本研究发现现场实验教学能加深学生对理论知识的理解,培养学生的组织协作和实践能力。